ChemicalsAll chemicals were of anal

Chemicals
All chemicals were of analytical-reagent 852
grade and obtained from the following sources: Carrageenan and dextran from Hi media (Mumbai, India); histamine, serotonin and diclofenac sodium from Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA); petroleum ether, methanol from Merck (Darmstadt, Germany) and biochemical kits were purchased from Span Diagnostics Ltd (Sachin, Surat, India).

Test sample preparation for Brine shrimp bioassay
Test sample was dissolved in DMSO (Dimethyl sulfoxide) to obtain stock solution of 1 mg/mL concentration. The final concentration of DMSO in the assay volume was kept at 2% to prevent possible false effects originating from DMSO toxicity. Pure DMSO and artificial seawater were used as negative control and potassium dichromate was used as the reference standard for the cytotoxicity assay.



Hatching of Brine shrimp cysts
Fresh cysts were produced from Fisheries Research Center, Okha, Gujarat, India. The cysts were hatched in a hatching tank containing artificial seawater made through dissolving a commercial marine salt (2%) in RO water (mineral water). The tank was well aerated with the aid of an air pump and the proper light source (1000-4000 lux) was also provided. The nauplii were hatched within 24-36 h at 30-35°C.

Brine shrimp lethality test
The toxicity of compound was tested at various concentrations viz. 10, 100, 250, 500, 750 and 1000 μg/mL in seawater containing 2% DMSO (v/v). Ten nauplii were used in each test. Three replications were used for each concentration. A parallel series of tests with the standard potassium dichromate solution (LC50 = 20-40 μg) were tested and the blank control was always included. After 24 h, survivors were counted using a dissection microscope and the percentage of the mortality (%M) of each dose was calculated as compared with control. Cytotoxicity was considered significant if the LC50-value was less than 20-30 μg/mL (15).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สารเคมีสารเคมีทั้งหมดได้ของน้ำยาวิเคราะห์ 852เกรด และได้จากแหล่งต่อไปนี้: คาร์ราจีแนนและเดกซ์แทรนจากสื่อสูง (มุมไบ อินเดีย); ฮิสตามีน serotonin และ diclofenac โซเดียมจาก Sigma Aldrich (เซนต์หลุยส์ MO, USA); ปิโตรเลียมอีเทอร์ เมทานอลจากเมอร์ค (ดาร์มสตัดท์ เยอรมัน) และชีวเคมีชุดถูกสั่งซื้อจากช่วงการวินิจฉัย Ltd (Sachin สุราษฎร์ธานี อินเดีย)การเตรียมตัวอย่างทดสอบสำหรับน้ำเกลือกุ้ง bioassayตัวอย่างทดสอบที่ละลายใน DMSO (Dimethyl sulfoxide) รับแก้ปัญหาสต็อกของความเข้มข้น 1 mg/mL ความเข้มข้นสุดท้ายของ DMSO ในปริมาณวิเคราะห์ถูกเก็บไว้ที่ 2% เพื่อป้องกันผลเท็จเป็นไปได้ที่เกิดจากความเป็นพิษของ DMSO DMSO บริสุทธิ์และน้ำทะเลเทียมที่ถูกใช้เป็นตัวควบคุมค่าลบ และโพแทสเซียม dichromate ใช้เป็นมาตรฐานอ้างอิงสำหรับการทดสอบพิษฟักของซีสต์กุ้งน้ำเกลือซีสต์ที่สดถูกผลิตจากศูนย์วิจัยประมง Okha คุชราต อินเดีย ซีสต์มาฟักในถังฟักไข่ที่ประกอบด้วยน้ำทะเลเทียมที่ผ่านการละลายเกลือทะเลเชิงพาณิชย์ (2%) ในน้ำ RO (น้ำแร่) ถังถูกอากาศ ด้วยปั๊มลมอย่างดี และยังมีการให้บริการการแหล่งกำเนิดแสงที่เหมาะสม (1000-4000 ลักซ์) ประกอบกิจการถูกฟักภายใน 24-36 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30-35 องศาเซลเซียสน้ำเกลือกุ้ง lethality ทดสอบรับการทดสอบความเป็นพิษของสารประกอบที่ต่าง ๆ เข้มข้น viz. 10, 100, 250, 500, 750 และ 1000 μ/mL ใน DMSO 2% (v/v) ที่ประกอบด้วยน้ำทะเล ประกอบกิจการสิบถูกใช้ในการทดสอบแต่ละ ระยะที่สามใช้สำหรับแต่ละความเข้มข้น ชุดขนานการทดสอบกับโซลูชันมาตรฐานโพแทสเซียม dichromate (LC50 = 20-40 μ) ได้รับการทดสอบและตัวควบคุมว่างเสมอรวม หลังจาก 24 ชั่วโมง ผู้รอดชีวิตนับได้โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ช่วยให้การวิเคราะห์ และคำนวณเปอร์เซ็นต์ของการตาย (%M) ของแต่ละปริมาณเมื่อเทียบกับการควบคุม พิษเป็นสำคัญถ้าค่า LC50 น้อยกว่า 20-30 μ/mL (15)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สารเคมี
สารเคมีทั้งหมดเป็นของการวิเคราะห์สาร-852
เกรดและได้รับจากแหล่งต่อไปนี้: คาราจีแนนและ dextran จากสื่อฮาวาย (มุมไบประเทศอินเดีย); กระ serotonin และโซเดียม diclofenac จากซิกดิช ( St. Louis, มิสซูรี, สหรัฐอเมริกา); ปิโตรเลียมอีเทอร์เมทานอลจากเมอร์ (Darmstadt, เยอรมนี) และชุดชีวเคมีที่ซื้อมาจากช่วงการวินิจฉัย จำกัด (ชินสุราษฏร์, อินเดีย).

การเตรียมตัวสำหรับการทดสอบน้ำเค็มกุ้งชีวภาพ
ตัวอย่างการทดสอบถูกละลายใน DMSO (Dimethyl sulfoxide) เพื่อให้ได้วิธีการแก้ปัญหาสต็อกของ 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรเข้มข้น ความเข้มข้นสุดท้ายของ DMSO ปริมาณการทดสอบที่ถูกเก็บไว้ที่ 2% เพื่อป้องกันผลกระทบที่ผิดพลาดไปได้ที่มีต้นกำเนิดมาจากความเป็นพิษ DMSO DMSO บริสุทธิ์และน้ำทะเลเทียมที่ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมและโพแทสเซียมไดโครเมเชิงลบที่ใช้เป็นมาตรฐานอ้างอิงสำหรับการทดสอบความเป็นพิษได้.



ฟักกุ้งทะเลซีสต์
ซีสต์สดที่ผลิตจากการประมงศูนย์วิจัย Okha รัฐคุชราตอินเดีย ซีสต์ที่ถูกฟักในถังฟักไข่ที่มีน้ำทะเลเทียมที่ทำผ่านการละลายเกลือทะเลเชิงพาณิชย์ (2%) ในน้ำ RO (น้ำแร่) รถถังที่ถูกมวลเบากันด้วยความช่วยเหลือของปั๊มลมและแหล่งกำเนิดแสงที่เหมาะสม (1000-4000 LUX) ยังถูกจัดให้ ทีเมียถูกฟักภายใน 24-36 ชั่วโมงที่ 30-35 ° C.

น้ำเกลือตายกุ้งทดสอบ
ความเป็นพิษของสารได้รับการทดสอบที่ระดับความเข้มข้นต่างๆ ได้แก่ 10, 100, 250, 500, 750 และ 1,000 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรในน้ำทะเลที่มี 2% DMSO (v / v) สิบทีเมียถูกนำมาใช้ในการทดสอบแต่ละครั้ง สามซ้ำถูกนำมาใช้สำหรับแต่ละความเข้มข้น ชุดคู่ขนานของการทดสอบด้วยโซลูชั่นโพแทสเซียมไดโครเมมาตรฐาน (LC50 = 20-40 ไมโครกรัม) ได้รับการทดสอบและการควบคุมว่างเปล่าถูกรวมอยู่เสมอ หลังจาก 24 ชั่วโมงผู้รอดชีวิตนับโดยใช้กล้องจุลทรรศน์และร้อยละของอัตราการตาย (% M) ของแต่ละปริมาณที่คำนวณได้เมื่อเทียบกับการควบคุม เป็นพิษต่อเซลล์ได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญถ้า LC50 ที่มีมูลค่าน้อยกว่า 20-30 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร (15)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เคมีภัณฑ์ทั้งหมดเคมีภัณฑ์เป็นวิเคราะห์สารเคมีที่เหมาะสมเกรดที่ได้จากแหล่งต่อไปนี้ : คาราจีแนนสอบผ่านจากสวัสดีและสื่อ ( มุมไบอินเดีย ) ; histamine serotonin และไดโคลฟีแนคโซเดียมจากซิกม่า Aldrich ( St . Louis , MO , USA ) ; ปิโตรเลียมอีเทอร์ เมทานอลจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) และชีวเคมีชุดซื้อมาจากช่วงการจำกัด ( ซาคิ , สุราษฎร์ , อินเดีย )ตัวอย่างการทดสอบการเตรียมพันธุ์กุ้งน้ำเกลือตัวอย่างการทดสอบถูกละลายใน DMSO ( เต๊ะ ) เพื่อให้ได้โซลูชั่นหุ้น 1 มก. / มล. ความเข้มข้น สุดท้ายปริมาณ DMSO ในการทดสอบปริมาณไว้ที่ 2% เพื่อป้องกันไม่ให้ได้รับผลกระทบที่มาจาก DMSO เป็นพิษ DMSO ที่บริสุทธิ์และน้ำทะเลเทียมที่ใช้ควบคุมและโพแทสเซียมไดโครเมตลบถูกใช้เป็นมาตรฐานอ้างอิงในเซลล์แบคทีเรียน้ำเกลือกุ้งเชื้อฟักเชื้อสดที่ผลิตจากศูนย์วิจัยประมง Okha , Gujarat , อินเดีย ซิสฟักในถังฟักที่มีน้ำทะเลเทียมเชิงพาณิชย์ผ่านละลายเกลือทะเล ( 2% ) ในน้ำ RO ( น้ำแร่ ) ถังเติมอากาศเป็นอย่างดีด้วยความช่วยเหลือของปั๊มอากาศและแหล่งกำเนิดแสงที่เหมาะสม ( 1000-4000 ลักซ์ ) ก็ให้ การ nauplii ฟักภายใน 24-36 ชั่วโมง ที่ 30-35 องศากุ้งน้ำเค็มชนิดหนึ่ง Lethality ทดสอบความเป็นพิษของสารทดสอบที่ความเข้มข้นต่าง ๆ ได้แก่ 10 , 100 , 250 , 500 , 750 และ 1 , 000 μ g / ml ในน้ำทะเลที่มี DMSO 2 % ( v / v ) 10 nauplii ถูกใช้ในแต่ละแบบ 3 ) ใช้สำหรับแต่ละความเข้มข้น ชุดขนานของการทดสอบกับมาตรฐานสารละลายโพแทสเซียมไดโครเมต ( LC ( , 50 ) = μ 20-40 กรัม ) ถูกทดสอบและควบคุมช่องว่างอยู่เสมอด้วย หลังจาก 24 ชั่วโมง ผู้รอดชีวิตได้ถูกนับโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ชำแหละ และเปอร์เซ็นต์การตาย ( % m ) ของแต่ละขนาดคำนวณได้เมื่อเทียบกับการควบคุม เซลล์ถือว่าสําคัญถ้าค่า LC ( , 50 ) น้อยกว่า 20-30 μ g / ml ( 15 )