one of the important steps for anti

one of the important steps for antigen presentation by MHC class II molecules involves binding of a peptide fragment of the antigen to the class II molecule followed by recognition of the resulting complex by T cells. The most commonly used methods for studying binding of peptide to MHC II are: eqilibrium dialysis, gel filtration chromatography, HPLC and polyacrylamide gel electrophoresis. Each of these methods has some limitations and is time consuming. In addition, each requires a considerable amount of native MHC class II, which is always difficult to obtain. In this report, we describe three different sensitive methods using radiolabeled peptide to study peptide binding to murine MHC class II molecules. These are: nitrocellulose filter binding, thin-layer chromatography (TLC) using plate-supported silica gel or PEI cellulose, and paper electrophoresis using Sepraphor cellulose polyacetate paper. All three methods are rapid, highly sensitive and require only ng quantities of affinity pure MHC class II molecules and peptides. These methods can be used to calculate the peptide occupancy of MHC class II molecules.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หนึ่งในขั้นตอนที่สำคัญสำหรับการนำเสนอแอนติเจนโดย MHC ระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการ ii ผูกพันของส่วนเปปไทด์ของแอนติเจนที่ระดับ ii โมเลกุลตามการรับรู้ของความซับซ้อนที่เกิดขึ้นจากเซลล์ที วิธีการที่ใช้กันมากที่สุดสำหรับการศึกษาของเปปไทด์ที่มีผลผูกพันกับ MHC ii คือ eqilibrium ไตโคเจลกรอง hplc และ polyacrylamide เจลอิเล็กโทรแต่ละวิธีการเหล่านี้มีข้อ จำกัด บางอย่างและใช้เวลานาน ในนอกจากนี้ในแต่ละต้องใช้จำนวนมากของการเรียน MHC พื้นเมือง ii ซึ่งเป็นเรื่องยากเสมอที่จะได้รับ ในรายงานฉบับนี้เราจะอธิบายวิธีการสามวิธีที่แตกต่างกันมีความสำคัญโดยใช้เปปไทด์รังสีในการศึกษาเปปไทด์ที่มีผลผูกพันกับหมา MHC Class II โมเลกุล เหล่านี้คือตัวกรอง nitrocellulose ผูกพันบางชั้นโค (tlc) โดยใช้แผ่นรองรับซิลิกาเจลหรือ pei เซลลูโลสและอิกระดาษใช้กระดาษ polyacetate sepraphor เซลลูโลส ทั้งสามวิธีการอย่างรวดเร็วมีความไวสูงและต้องการเพียงปริมาณ ng ของความสัมพันธ์ที่บริสุทธิ์ชั้น MHC ii โมเลกุลและเปปไทด์ วิธีการเหล่านี้สามารถนำมาใช้ในการคำนวณอัตราการเข้าเรียนของเปปไทด์ MHC ii โมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หนึ่งในขั้นตอนที่สำคัญสำหรับการนำเสนอการตรวจหาโดยเอ็มเอชซีคลาส II โมเลกุลเกี่ยวข้องผูกพันของเพปไทด์ส่วนของการตรวจหาการโมเลกุล II เรียนตามการรับรู้เชิงผลลัพธ์โดยเซลล์ T วิธีที่ใช้บ่อยที่สุดสำหรับการศึกษาผูกของเพปไทด์กับเอ็มเอชซี II: eqilibrium หน่วย เจลอาบน้ำ chromatography, HPLC และ polyacrylamide electrophoresis เจ แต่ละวิธีมีข้อจำกัดบางอย่าง และใช้เวลานาน แต่ละต้องเป็นจำนวนมากของเจ้าเอ็มเอชซีคลาส II ซึ่งเป็นเสมอยากที่จะได้รับการ ในรายงานนี้ เราอธิบายสามสำคัญวิธีใช้เปป radiolabeled เรียนผูกเพปไทด์กับ murine เอ็มเอชซีคลาส II โมเลกุล ได้แก่: กรอง nitrocellulose ผูก ชั้นบาง chromatography (TLC) โดยใช้แผ่นรองรับซิลิก้าเจล หรือเซลลูโลสพีอีไอ และ electrophoresis กระดาษใช้กระดาษ polyacetate เซลลูโลส Sepraphor ทั้งหมดสามวิธีอย่างรวดเร็ว ความไวสูง และต้องการเพียงปริมาณ ng ความสัมพันธ์บริสุทธิ์เอ็มเอชซีคลาส II โมเลกุลและเปปไทด์ วิธีการเหล่านี้สามารถถูกใช้เพื่อคำนวณจำนวนเพปไทด์เอ็มเอชซีคลาส II โมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หนึ่งในขั้นตอนที่มีความสำคัญสำหรับการนำเสนอ, Antigen for โดยโมเลกุลของ MHC Class II เป็นโมเลกุลมีผลผูกพันส่วนท้ายของ peptide ของ, Antigen for ไปที่ระดับ II ตามด้วยการยอมรับของคอมเพล็กซ์ซึ่งเป็นผลโดยเซลล์ T วิธีการที่ใช้กันทั่วไปในการเรียนมีผลผูกพันของ peptide เพื่อ MHC II มีเลือด eqilibrium chromatography การกรองเจลและ hplc electrophoresis polyacrylamide เจลแต่ละวิธีนี้มีข้อจำกัดบางอย่างและเป็นช่วงเวลา บริโภค นอกจากนี้แต่ละครั้งต้องใช้จำนวนมากของพื้นเมือง MHC Class II ซึ่งเป็นเรื่องยากเสมอในการขอรับ ในรายงานฉบับนี้เราอธิบายถึงสามวิธีใดวิธีหนึ่งที่สำคัญอื่นโดยใช้ peptide radiolabeled เพื่อการศึกษาโมเลกุลของปุ่มลัดสำหรับ murine MHC Class II peptide เหล่านี้เป็นแผ่นกรอง nitrocellulose มีผลผูกพันบาง - layer chromatography ( tlc )โดยใช้กระดาษและเซลลูโลส PEI หรือแผ่นซิลิกาเจลที่สนับสนุนการใช้กระดาษ electrophoresis polyacetate เซลลูโลส sepraphor สามทุกวิธีมีปริมาณความไวสูงและต้องใช้เฉพาะไนจีเรียอย่างรวดเร็วของ peptides และโมเลกุลของความสัมพันธ์อันแนบแน่นบริสุทธิ์ MHC Class II วิธีนี้สามารถใช้ในการคำนวณที่รองรับผู้ใช้บริการ peptide ของโมเลกุลของ MHC Class II