Years ago, Fisher and Allen (7) sug

Years ago, Fisher and Allen (7) suggested that the characteristic
damage observed with P. aeruginosa eye infections
may be attributable to the action of bacterial proteases on
the corneal proteoglycan. Several groups, including Kawaharajo
et al. (16), Hirao and Homma (12), Kreger and Gray
(20) and Kreger and Griffin (21) have since provided data to
support this hypothesis. Recently, Ohman et al. (27) initiated
Isolation of mutants specifically deficient in the production
of alkaline protease would facilitate definitive studies
addressing the role of alkaline protease in P. aeruginosa
infections. This approach has been complicated by the fact
that most strains of P. aeruginosa produce at least two
distinct extracellular proteases (25) and that alkaline protease
does not possess a unique or stringent substrate specificity
(26). We have been unable to specifically inhibit the
activity of interfering protease (elastase) to facilitate detection
of alkaline protease mutants on skim milk agar plates
(unpublished data). To circumvent these problems, we chose
to isolate alkaline protease mutants in strain PA103, which
produces alkaline protease (4) but no detectable elastase
(28). Despite the fact that strain PA103 is serum sensitive
(41), it is virulent in a mouse eye model of corneal infection
(17, 27). We have isolated alkaline protease-deficient mutants
of strain PA103 after ethyl methanesulfonate (EMS)
mutagenesis and screening of mutagenized colonies on skim
milk agar plates. After in vitro characterization of these

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปีที่ผ่านมา Fisher และอัลเลน (7) แนะนำที่ลักษณะสังเกต ด้วยติดเชื้อ P. aeruginosa ตาความเสียหายอาจรวมถึงการกระทำของแบคทีเรีย proteases ในproteoglycan ที่กระจกตา กลุ่มหลาย รวมทั้ง Kawaharajoal. ร้อยเอ็ด (16), Hirao และ Homma (12), Kreger และสีเทา(20) และ Kreger และกริฟฟอน (21) มีตั้งแต่ให้ข้อมูลสนับสนุนสมมติฐานนี้ ล่าสุด Ohman et al. (27) เริ่มต้นแยกของสายพันธุ์โดยเฉพาะขาดสารในการผลิตรติเอสอัลคาไลน์จะช่วยในการศึกษาทั่วไปกำหนดบทบาทของรติเอสด่างใน P. aeruginosaติดเชื้อ วิธีการนี้ได้มีความซับซ้อน โดยข้อเท็จจริงสายพันธุ์ส่วนใหญ่ของ P. aeruginosa ที่ผลิตน้อยสองรติเอสที่ด่างและ proteases extracellular หมด (25)มี specificity พื้นผิวเฉพาะ หรือเข้มงวด(26) . เราได้รับไม่สามารถยับยั้งเฉพาะกิจกรรมรบกวนรติเอส (elastase) เพื่อตรวจสอบของสายพันธุ์ด่างรติเอสบนแผ่น agar skim นม(ยกเลิกการประกาศข้อมูล) เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล่านี้ เราเลือกการแยกสายพันธุ์รติเอสด่างในต้องใช้ PA103 ซึ่งสร้างรติเอสด่าง (4) แต่ elastase ไม่สามารถตรวจสอบได้(28) ทั้ง ๆ ที่สายพันธุ์ PA103 เป็นเซรั่ม(41), เป็น virulent ในเมาส์รุ่นตาติดเชื้อกระจกตา(17, 27) เราได้แยกต่างหากสายพันธุ์รติเอสไม่ด่างของต้องใช้ PA103 หลัง methanesulfonate เอทิล (EMS)mutagenesis และคัดกรองของอาณานิคม mutagenized บน skimนม agar แผ่น หลังจากเพาะเลี้ยงจำแนกเหล่านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปีที่ผ่านมาฟิชเชอร์และอัลเลน (7) ชี้ให้เห็นว่าลักษณะ
ความเสียหายสังเกตกับพี aeruginosa ติดเชื้อที่ตา
อาจจะเนื่องมาจากการกระทำของแบคทีเรียโปรตีเอสบน
กระจกตา proteoglycan หลายกลุ่มรวมทั้ง Kawaharajo
และคณะ (16), Hirao และ Homma (12), Kreger และสีเทา
(20) และกริฟฟิ Kreger และ (21) มีตั้งแต่ข้อมูลที่จัดเตรียมไว้เพื่อ
สนับสนุนสมมติฐานนี้ เมื่อเร็ว ๆ นี้ทรงเสน่ห์และคณะ (27) ริเริ่ม
การแยกการกลายพันธุ์โดยเฉพาะขาดในการผลิต
เอนไซม์โปรติเออัลคาไลน์จะอำนวยความสะดวกในการศึกษาที่ชัดเจน
อยู่บทบาทของโปรติเอสด่างใน P. aeruginosa
การติดเชื้อ วิธีการนี้จะได้รับความซับซ้อนโดยความจริงที่
ว่าสายพันธุ์ส่วนใหญ่ของเชื้อ P. aeruginosa ผลิตอย่างน้อยสอง
โปรตีเอสสารที่แตกต่างกัน (25) และอัลคาไลน์โปรติเอสที่
ไม่ได้มีความจำเพาะไม่ซ้ำกันหรือพื้นผิวที่เข้มงวด
(26) เราได้รับไม่สามารถเฉพาะยับยั้ง
การทำงานของเอนไซม์โปรติเอรบกวน (elastase) เพื่ออำนวยความสะดวกการตรวจหา
การกลายพันธุ์ของโปรติเอสอัลคาไลน์ในนมพร่องมันเนยแผ่นวุ้น
(ข้อมูลที่ไม่ถูกเผยแพร่) เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล่านี้เราเลือก
ที่จะแยกการกลายพันธุ์โปรติเอสอัลคาไลน์ในสายพันธุ์ PA103 ซึ่ง
ผลิตเอนไซม์โปรติเออัลคาไลน์ (4) แต่ไม่มี elastase ตรวจพบ
(28) แม้จะมีความจริงที่ว่า PA103 สายพันธุ์ที่มีความสำคัญเป็นซีรั่ม
(41) มันเป็นความรุนแรงในรูปแบบตาเมาส์ของการติดเชื้อที่กระจกตา
(17, 27) เราได้แยกอัลคาไลน์โปรติเอสกลายพันธุ์ขาด
ของ PA103 ความเครียดหลังจากเอทิล methanesulfonate (EMS)
ฉับและการคัดกรองของอาณานิคม mutagenized ในพร่องมันเนย
นมแผ่นวุ้น หลังจากที่ในหลอดทดลองลักษณะของเหล่านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปี ชาวประมงและอัลเลน ( 7 ) พบว่า ลักษณะความเสียหายและ P . aeruginosa การติดเชื้อ

อาจจะดูจากการกระทำของทางแบคทีเรียในโปรตีนโอไกลแคนตา
. หลายกลุ่ม รวมทั้ง kawaharajo
et al . ( 16 ) , hirao และ homma ( 12 ) , kreger เทา
( 20 ) และ kreger กริฟฟิน ( 21 ) มีตั้งแต่ให้ข้อมูล

สนับสนุนสมมุติฐานนี้ เมื่อเร็ว ๆนี้ , โอเมิ่น et al .( 27 ) การแยกสายพันธุ์ โดยเฉพาะการริเริ่ม

ในการผลิตอัลคาไลน์โปรติเอสจะอำนวยความสะดวกในการศึกษา
ที่อยู่ชัดเจนบทบาทของอัลคาไลน์โปรติเอสใน P . aeruginosa
เชื้อ วิธีการนี้มีความซับซ้อน โดยข้อเท็จจริงว่า ส่วนใหญ่ของ P . aeruginosa สายพันธุ์

สามารถผลิตอย่างน้อยสองแตกต่างกันทาง ( 25 ) และการผลิตอัลคาไลน์โปรติเอส
ไม่ได้มีเฉพาะ หรือเข้มงวดต่อ (
( 26 ) เราไม่สามารถเฉพาะยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอส
รบกวน ( elastase ) เพื่อความสะดวกในการตรวจสอบ
อัลคาไลน์โปรติเอสกลายพันธุ์บนจานวุ้นนม
( ข้อมูลจากประกาศ ) เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล่านี้ เราเลือก
แยกแอลคาไล pa103 กลายพันธุ์ในสายพันธุ์ซึ่ง
ผลิตอัลคาไลน์โปรติเอส ( 4 ) แต่ยังไม่พบอีลาสเตส
( 28 ) แม้จะมีความจริงที่ว่า pa103 เมื่อยเซรั่มไว
( 41 ) มันรุนแรงในรูปแบบของการติดเชื้อที่กระจกตาเมาส์ตา
( 17 , 27 ) เราได้แยกแอลคาไลขาดสายพันธุ์สายพันธุ์ pa103 หลังจาก methanesulfonate
-
( EMS ) การกลายพันธุ์และคัดเลือก mutagenized อาณานิคมบนหาง
วุ้นจานนมหลังจากการคุณลักษณะเหล่านี้