Microinjection is an effective meth

Microinjection is an effective method for creating transgenic animals, for RNAi of selected genes, and for introducing various types of molecules directly to cells. For DNA transformation, the easiest approach is to inject DNAs into the distal arm of the gonad (Figure 1; Mello et al., 1991; Mello and Fire, 1995). The distal germ line of C. elegans contains a central core of cytoplasm that is shared by many germ cell nuclei (see Introduction to the germ line). Therefore, DNAs injected here can be delivered to many progeny. This approach usually leads to the formation of large extrachromosomal DNA arrays (Mello et al., 1991). Microinjection directly into oocyte nuclei can induce chromosomal integration of transgenes, but this technique is relatively difficult to do (Fire, 1986). For RNAi experiments, most progeny of injected animals can be affected by simply injecting dsRNA into a single gonad or intestinal cell because of a very efficient RNA transport system (see Reverse genetics). While RNAi by feeding is best for high throughput experiments, RNAi by microinjection is more effective for at least some genes (see Reverse genetics). Contrary to common perceptions, nematode microinjection is not hard to learn and does not require the most expensive equipment. The microinjection method described below is geared towards generating transgenic worms, but it can be readily adapted for injecting a variety of molecules into various locations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Microinjection เป็นวิธีมีประสิทธิภาพ สำหรับการสร้างสัตว์ถั่วเหลือง RNAi เลือกยีน และ การแนะนำต่าง ๆ ของโมเลกุลโดยตรงไปยังเซลล์ สำหรับการเปลี่ยนแปลงของดีเอ็นเอ วิธีที่ง่ายที่สุดคือการ ฉีด DNAs เป็นกระดูกแขน gonad (รูปที่ 1 Mello et al., 1991 Mello กไฟ 1995) บรรทัดกระดูกจมูกของ C. elegans ประกอบด้วยหลักกลางของไซโทพลาซึมที่ใช้ร่วมกัน โดยแอลฟาเซลล์จมูกมาก (ดูบทนำบรรทัดจมูก) ดังนั้น DNAs ฉีดที่นี่สามารถส่งให้ลูกหลานหลาย วิธีการนี้มักจะนำไปสู่การก่อตัวของใหญ่ extrachromosomal DNA อาร์เรย์ (Mello et al., 1991) Microinjection ลง oocyte แอลฟาสามารถก่อให้เกิดบูรณาการของโครโมโซมของ transgenes แต่เทคนิคนี้จะค่อนข้างยาก (ไฟไหม้ 1986) สำหรับการทดลอง RNAi ลูกหลานส่วนใหญ่ของสัตว์ฉีดสามารถได้รับผลกระทบ โดยเพียง injecting dsRNA gonad เดียวหรือเซลล์ลำไส้เนื่องจากระบบขนส่งของอาร์เอ็นเอมีประสิทธิภาพมาก (ดูพันธุศาสตร์ย้อน) ในขณะที่ RNAi โดยให้อาหารที่ดีสุดสำหรับการทดลองอัตราความเร็วสูง RNAi โดย microinjection จะมีประสิทธิภาพมากสำหรับยีนบางอย่าง (ดูพันธุศาสตร์ย้อน) ขัดต่อการรับรู้ทั่วไป microinjection นีมาโทดาไม่ยากที่จะเรียนรู้ และไม่ต้องใช้อุปกรณ์ราคาแพงที่สุด วิธี microinjection ที่อธิบายไว้ด้านล่างจะมุ่งไปทางการสร้างหนอนถั่วเหลือง แต่มันสามารถพร้อมปรับสำหรับ injecting หลากหลายโมเลกุลเข้าไปในสถานต่าง ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Microinjection เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพในการสร้างสัตว์พันธุ์สำหรับ RNAi ของยีนเลือกและแนะนำหลากหลายชนิดของโมเลกุลโดยตรงกับเซลล์ สำหรับการเปลี่ยนแปลงดีเอ็นเอวิธีที่ง่ายที่สุดคือการฉีดเข้าไปในดีเอ็นเอแขนปลายของอวัยวะสืบพันธุ์ (รูปที่ 1; เมลโล et al, 1991;. เมลโลและไฟ 1995) สายปลายจมูกของ elegans ซีมีแกนกลางของเซลล์ที่ใช้ร่วมกันโดยนิวเคลียสเซลล์สืบพันธุ์จำนวนมาก (ดูรู้เบื้องต้นเกี่ยวกับเชื้อโรคแถว) ดังนั้น DNAs ฉีดที่นี่สามารถส่งไปยังลูกหลานจำนวนมาก วิธีการนี​​้จะนำไปสู่​​การก่อตัวของอาร์เรย์ดีเอ็นเอ extrachromosomal ขนาดใหญ่ (Mello et al., 1991) Microinjection โดยตรงในนิวเคลียสของเซลล์สามารถทำให้เกิดการรวมตัวของโครโมโซมของ transgenes แต่เทคนิคนี้ค่อนข้างยากที่จะทำ (ไฟ 1986) สำหรับการทดลอง RNAi ลูกหลานมากที่สุดของสัตว์ที่ฉีดได้รับผลกระทบโดยเพียงแค่ฉีด dsRNA เข้าไปในอวัยวะสืบพันธุ์เดียวหรือเซลล์ลำไส้เพราะของระบบการขนส่งอาร์เอ็นเอที่มีประสิทธิภาพมาก (ดูพันธุศาสตร์ถอยหลัง) ในขณะที่การให้อาหารโดย RNAi ที่ดีที่สุดสำหรับการทดลองผ่านสูง RNAi โดย microinjection มีประสิทธิภาพมากขึ้นสำหรับยีนอย่างน้อยบางส่วน (ดูพันธุศาสตร์ย้อนกลับ) ตรงกันข้ามกับการรับรู้ร่วมกัน microinjection ไส้เดือนฝอยไม่ยากที่จะเรียนรู้และไม่ต้องใช้อุปกรณ์ที่มีราคาแพงที่สุด วิธี microinjection อธิบายไว้ด้านล่างจะมุ่งสู่การสร้างหนอนพันธุ์ แต่ก็สามารถปรับได้อย่างง่ายดายสำหรับการฉีดหลากหลายของโมเลกุลเข้าไปในสถานที่ต่างๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไมโครอินเจคชั่นเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพสำหรับการสร้างสัตว์ดัดแปลงพันธุกรรม เพื่อหาของที่เลือกยีน และแนะนำประเภทต่างๆของโมเลกุลโดยตรงต่อเซลล์ สำหรับการเปลี่ยนแปลงดีเอ็นเอ , วิธีที่ง่ายที่สุดคือการฉีดเข้าไปในแขนส่วนปลายที่จำเพาะของต่อมเพศ ( รูปที่ 1 ; เมล et al . , 1991 ; เมลโลและไฟ , 1995 ) ส่วนปลายสายของ เชื้อโรคถิ่นประกอบด้วยแกนกลางของท่อที่ใช้ร่วมกัน โดยมากเชื้อโรคเซลล์นิวเคลียส ( ดูเบื้องต้น สายเชื้อ ) ดังนั้น แถบ ฉีดที่นี่สามารถส่งไปยังหลายคนลูกหลาน วิธีนี้มักจะนำไปสู่การก่อตัวของรูปแบบดีเอ็นเอ extrachromosomal ขนาดใหญ่ ( เมล et al . , 1991 ) ไมโครอินเจคชันตรงเข้าไปในนิวเคลียสของไข่สามารถชักนำให้เกิดการบูรณาการของ transgenes โครโมโซม ,แต่เทคนิคนี้ค่อนข้างยากที่จะทำ ( ไฟ , 1986 ) สำหรับ RNAi ทดลอง ลูกหลานส่วนใหญ่ฉีดสัตว์สามารถได้รับผลกระทบโดยเพียงแค่ฉีด dsRNA เข้าสู่อวัยวะชายเดี่ยวหรือลำไส้ เซลล์ เพราะระบบการขนส่งที่มีประสิทธิภาพมาก RNA ( เห็นกลับพันธุศาสตร์ ) ในขณะที่หาโดยการให้อาหารที่ดีที่สุดสำหรับการทดสอบ throughput สูงหาไมโครอินเจคชันมีประสิทธิภาพอย่างน้อยบางยีน ( ดูกลับพันธุศาสตร์ ) ขัดกับการรับรู้ร่วมกัน โดยไมโครอินเจคชันไม่ยากที่จะเรียนรู้ และไม่ต้องใช้อุปกรณ์ราคาแพงที่สุด โดยวิธีไมโครอินเจคชันอธิบายไว้ด้านล่างนี้จะมุ่งสู่การสร้างหนอนพันธุ์ แต่ก็สามารถพร้อมเหมาะสำหรับฉีด ความหลากหลายของโมเลกุลในสถานที่ต่างๆ