For FFPE tissues we used liver tiss

For FFPE tissues we used liver tissues of male C57BL/6 mice that were fixed by 10% formaldehyde and embed- ded in paraffin. First, we examined dependence of pro- tein extraction efficiency from FFPE mouse liver on 20 mM, 100 mM and 500 mM TRIS, respectively, in PEB. The incubation time during the heat-treatment was also varied; 0, 30, 60, 90 and 120 min. After the treat- ment, the protein extraction efficiency was evaluated by band intensities of Grp78, Ass and Ldha observed in Western blotting (Figure 1). The band intensities of pro- teins drastically increased with prolonged incubation time of the heat-treatment. Without heat-treatment, all PEBs containing various concentrations of TRIS failed to extract proteins effectively (0 min in Figure 1A). With the heat treatment for 30 min, band intensities of Grp78

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับเนื้อเยื่อ FFPE เราใช้เนื้อเยื่อตับของหนู C57BL/6 ตัวผู้ที่ถูกตรึงด้วยฟอร์มาลดีไฮด์ 10% และฝังอยู่ในพาราฟิน ขั้นแรก เราตรวจสอบการพึ่งพาประสิทธิภาพการสกัดโปรตีนจากตับของหนู FFPE บน 20 mM, 100 mM และ 500 mM TRIS ตามลำดับใน PEB เวลาในการฟักตัวระหว่างการให้ความร้อนก็แปรผันเช่นกัน 0, 30, 60, 90 และ 120 นาที หลังการรักษา ประสิทธิภาพการสกัดโปรตีนได้รับการประเมินโดยความเข้มของแถบที่ Grp78, Ass และ Ldha ที่สังเกตได้ใน Western blotting (รูปที่ 1) ความเข้มของแถบโปรตีนเพิ่มขึ้นอย่างมากเมื่อได้รับความร้อนนานขึ้น หากไม่มีการบำบัดด้วยความร้อน PEB ทั้งหมดที่มี TRIS ที่มีความเข้มข้นต่างกันไม่สามารถสกัดโปรตีนได้อย่างมีประสิทธิภาพ (0 นาทีในรูปที่ 1A) ด้วยการอบชุบด้วยความร้อนเป็นเวลา 30 นาที ความเข้มของแถบที่ Grp78

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับเนื้อเยื่อ FFPE เราใช้เนื้อเยื่อตับของหนู C57BL/6 ตัวผู้ที่ยึดด้วยฟอร์มาลดีไฮด์ 10% และฝังอยู่ในพาราฟิน ประการแรกเราทดสอบประสิทธิภาพของการสกัดโปรตีนจากตับของหนู FFPE ใน PEB ขึ้นอยู่กับทริส 20 มม., 100 มม. และ 500 มม. ตามลำดับ เวลาในการเก็บรักษาความร้อนในกระบวนการรักษาความร้อนก็แตกต่างกันไป 0, 30, 60, 90 และ 120 นาที หลังจากการประมวลผลประสิทธิภาพการสกัดโปรตีนจะถูกประเมินโดยความแข็งแรงของแถบของ Grp78, Ass และ Ldha ที่สังเกตได้จากการพิมพ์โปรตีน (รูปที่ 1) ด้วยการยืดเวลาการรักษาความร้อนความแข็งแรงของแถบพลังงานของโปรตีนจะเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว PEB ทั้งหมดที่มีความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ TRIS ไม่สามารถสกัดโปรตีนได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยไม่ต้องใช้ความร้อน (0 นาทีในรูปที่ 1A) ความแข็งแรงของแถบพลังงานของ Grp78 หลังจากการรักษาความร้อน 30 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สําหรับเนื้อเยื่อFFPEเราใช้ฟอร์มาลดีไฮด์10 %เพื่อยึดและฝังตัวในเนื้อเยื่อตับของหนูตัวผู้c 57bl/6ในพาราฟิน ประการแรกเราได้ทดสอบการพึ่งพาโปรตีนจากตับ20มม.และ100มม.และ500มม.ตามลําดับ ระยะเวลาการเพาะเลี้ยงระหว่างการบําบัดความร้อนยังแตกต่างกัน 0, 30, 60, 90 และ 120 นาที. หลังจากการรักษาประสิทธิภาพในการสกัดโปรตีนได้รับการประเมินโดยความแข็งแรงของแถบของGrp 78,AssและLdhaที่สังเกตได้ในการพิมพ์โปรตีน(รูปที่1 ) เมื่อเวลาในการรักษาความร้อนเพิ่มขึ้นความเข้มของแถบโปรตีนจะเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว PEBsทั้งหมดที่มีความเข้มข้นที่แตกต่างกันของTRISไม่สามารถสกัดโปรตีนได้อย่างมีประสิทธิภาพ( 0นาทีในรูปที่1 a )โดยไม่มีการบําบัดความร้อน หลังจากผ่านการบําบัดความร้อนเป็นเวลา30นาทีความแข็งแรงของแถบgrp 78จะเพิ่มขึ้น