Anti-diabetic activity against type

Anti-diabetic activity against type 2 diabetes was
assayed according to method of Sauma L. et al. [31].
HepG2 cells were transfected with plasmid pPPRE-Luc and
plasmid phRL-TK. pPPRE-Luc was a plasmid in which the
PPAR-responsive element (PPRE) and the firefly luciferase
reporter gene were transferred, while plasmid phRL-TK as
internal reference was transfected with Renilla luciferase
reporter gene. After the transfected cells were seeded in
96-well plates at a cell density of 1.5 × 104/well and cultured
in the low-sugar DMEM containing 100 U·mL−1 of
streptomycin and 100 U·mL−1 of penicillin at 37 oC overnight.
The medium was refreshed with low-sugar DMEM
containing the sample under testing. The blank control
(non-transfected cells), negative control (cells transfected and
added no samples), and positive control (cells transfected and
added pioglitazone) were included and cultured under the
same conditions. After an additional 24-h culture, the
luciferase activity and excitation rate were determined by
measuring chemiluminescence intensity L using a Dual-
Luciferase Reporter Gene Assay Kit (Promega, USA). L1
represented the firefly luciferase chemiluminescence intensity,
while L2 represented the L value of internal reference. The
excitation rate (ER) was calculated using the following
equation:
sample blank negative blank
sample blank negative blank
(L1 L1 ) / (L1 L1 )
100%
(L2 L2 ) / (L2 L2 )
ΕR
 
 
 
The anti-diabetic activity was considered as extremely
high when excitation-rate value was greater than 100%. All
samples were analyzed twice at concentration of 10 μg·mL−1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรมป้องกันโรคเบาหวานกับโรคเบาหวานชนิดที่ 2 คือassayed ตามวิธีของ Sauma L. et al. [31]เซลล์ HepG2 ถูก transfected กับ pPPRE plasmid ตกแต่ง และplasmid tk. phRL pPPRE-Luc รับ plasmid ซึ่งการองค์ประกอบที่ตอบสนองต่อ PPAR (PPRE) และ luciferase หิ่งห้อยข่าวยีนถ่ายโอน ขณะทีเค phRL plasmid เป็นอ้างอิงภายในเป็น transfected กับ Renilla luciferaseข่าวยีน หลังจากที่เซลล์ transfected ถูกเตรียมในแผ่น 96 หลุมที่มีความหนาแน่นเซลล์ของ 1.5 × 104/ดี และล้างใน DMEM น้ำตาลต่ำที่ประกอบด้วย 100 U·mL−1streptomycin และ 100 U·mL−1 ยาเพนนิซิลลินที่ 37 oC ข้ามคืนการฟื้นฟู ด้วยน้ำตาลต่ำ DMEMประกอบด้วยตัวอย่างภายใต้การทดสอบ ตัวควบคุมว่าง(ไม่ใช่ transfected เซลล์), ลบควบคุม (เซลล์ที่ transfected และเพิ่มไม่มีตัวอย่าง), และการควบคุมเชิงบวก (เซลล์ที่ transfected และเพิ่มยา pioglitazone) รวม และล้างภายใต้การเงื่อนไขเดียวกัน หลังจาก 24 ชม.เพิ่มเติมวัฒนธรรม การดำเนินการโดย luciferase กิจกรรมและกระตุ้นอัตราวัดความเข้ม chemiluminescence L ใช้ Dual-ยีน luciferase Reporter Assay Kit (Promega สหรัฐอเมริกา) L1แสดงความเข้ม chemiluminescence luciferase หิ่งห้อยในขณะที่ L2 แสดงค่า L ของการอ้างอิงภายใน การกระตุ้นอัตรา (ER) ได้คำนวณการใช้ต่อไปนี้สมการ:ตัวอย่างว่างเปล่าเป็นค่าลบตัวอย่างว่างเปล่าเป็นค่าลบ(L1 L1) / (L1 L1)100%(L2 L2) / (L2 L2)ΕRเวอเวอเวอเวอกิจกรรมการป้องกันโรคเบาหวานได้รับการพิจารณาเป็นอย่างมากสูงเมื่อค่าอัตรากระตุ้นมากกว่า 100% ทั้งหมดมีวิเคราะห์ตัวอย่างสองที่ความเข้มข้นของ 10 μg·mL−1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมป้องกันโรคเบาหวานโรคเบาหวานชนิดที่ 2 ได้รับการ
assayed ตามวิธีการของ Sauma ลิตร, et al [31].
เซลล์ HepG2 ถูก transfected กับพลาสมิด pPPRE-Luc และ
พลาสมิด phRL-TK pPPRE-Luc เป็นพลาสมิดที่เป็น
องค์ประกอบ PPAR ตอบสนอง (PPRE) และหิ่งห้อย luciferase
ยีนนักข่าวถูกย้ายในขณะที่พลาสมิด phRL-TK เป็น
อ้างอิงภายใน transfected กับ Renilla luciferase
นักข่าวยีน หลังจากเซลล์ transfected ถูกเมล็ดใน
แผ่น 96 หลุมที่มีความหนาแน่นของเซลล์ 1.5 × 104 / ดีและเพาะเลี้ยง
ใน DMEM น้ำตาลต่ำที่มี 100 U · ML-1 ของ
streptomycin และ 100 U · ML-1 จากยาปฏิชีวนะที่ 37 องศาเซลเซียส ในชั่วข้ามคืน.
กลางได้รับการฟื้นฟูด้วย DMEM น้ำตาลต่ำ
มีตัวอย่างภายใต้การทดสอบ การควบคุมว่างเปล่า
(เซลล์ที่ไม่ใช่ transfected), เครื่องควบคุมเชิงลบ (เซลล์ transfected และ
เพิ่มไม่มีตัวอย่าง) และเครื่องควบคุมเชิงบวก (เซลล์ transfected และ
เพิ่มยา pioglitazone) ถูกรวมและการเพาะเลี้ยงภายใต้
เงื่อนไขเดียวกัน หลังจากวัฒนธรรม 24-H เพิ่มเติมที่
กิจกรรมและการกระตุ้นอัตรา luciferase ถูกกำหนดโดย
การวัดความเข้ม chemiluminescence L ใช้ dual-
ชุด luciferase ผู้สื่อข่าวยีน Assay (Promega, สหรัฐอเมริกา) L1
เป็นตัวแทนของความเข้ม luciferase chemiluminescence หิ่งห้อย
ขณะ L2 เป็นตัวแทนของค่า L ของการอ้างอิงภายใน
อัตราการกระตุ้น (ER) ที่คำนวณได้ใช้ต่อไปนี้
สม:
ตัวอย่างว่างเปล่าเชิงลบว่างเปล่า
ตัวอย่างว่างเปล่าเชิงลบว่างเปล่า
(L1 L1) / (L1 L1)
100%
(L2 L2) / (L2 L2)
ΕR



ต่อต้าน กิจกรรม -diabetic ได้รับการพิจารณาเป็นอย่างยิ่งที่
สูงเมื่อค่าการกระตุ้นอัตราสูงกว่า 100% ทั้งหมด
ตัวอย่างมาวิเคราะห์เป็นครั้งที่สองที่ความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม· ML-1