2.3. Vascular reactivity experiments
The thoracic aorta was isolated and cut into rings (5–6 mm in length). The arteries were prepared for organ bath studies as described previously [5]. Endothelial integrity was assessed qualitatively by the degree of relaxation induced by acetylcholine (1 μM) in the presence of contractile tone induced by phenylephrine (0.1 μM). Cumulative concentration-response curves for acetylcholine (0.1 nM–10 μM) and sodium nitroprusside (SNP, 0.1 nM–0.1 μM) were obtained in endothelium-intact and endothelium-denuded aortas, respectively. In another set of experiments, concentration-response curves for acetylcholine were obtained after incubation for 30 min with tempol (100 μM, SOD mimetic), diethyldithiocarbamate (DETCA, 1 mM, SOD inhibitor) or Nω-Nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, 100 μM, non-selective NOS inhibitor). Agonist concentrations-response curves were fitted using a nonlinear interactive fitting program (Graph Pad Prism 3.0; GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). Agonist potencies and maximal responses were expressed as pD2 (− logEC50) and Emax (maximum effect elicited by the agonist), respectively.
2.3 การทดลองการเกิดปฏิกิริยาที่ของหลอดเลือดAorta ทรวงอกแยกต่างหาก และตัดเป็นวง (5-6 มม.ความยาว) หลอดเลือดแดงถูกเตรียมไว้สำหรับอวัยวะน้ำศึกษาอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [5] ความที่บุผนังหลอดเลือดถูกประเมิน qualitatively โดยระดับของการพักผ่อนที่เหนี่ยวนำ โดย acetylcholine (1 μM) ในต่อหน้าของเสียง contractile phenylephrine (0.1 μM) เกิดจาก เส้นโค้งตอบสมาธิสะสม acetylcholine (0.1 nM-10 μM) และโซเดียม nitroprusside (SNP, 0.1 nM – 0.1 μM) ได้รับใน endothelium เหมือนเดิม และ endothelium denuded aortas ตามลำดับ ในชุดการทดลองอื่น เส้นโค้งตอบสนองต่อความเข้มข้นสำหรับ acetylcholine ได้รับมาหลังจากฟักตัวใน 30 นาทีด้วย tempol (100 μM สด mimetic), diethyldithiocarbamate (DETCA, 1 mM ผลสด) หรือเอส methyl Nω-ไนโตร-L-อาร์จินีน (L-ชื่อ 100 μM ไม่เลือกหมายเลขผล) กล้ามเนื้อทำการตอบสนองต่อความเข้มข้นเส้นโค้งถูกติดตั้งโดยใช้โปรแกรมกระชับแบบไม่เชิงเส้น (กราฟแผ่นปริซึม 3.0 GraphPad ซอฟต์แวร์ Inc., San Diego, CA, USA) อะโกนิสต์ potencies และการตอบสนองสูงสุดถูกแสดงเป็น pD2 (− logEC50) และ Emax (สูงสุดผล elicited โดยที่อะโกนิสต์), ตามลำดับ
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 การทดลองการเกิดหลอดเลือด
เส้นเลือดทรวงอกถูกแยกและตัดเป็นวง ( 5 – 6 มม. ) หลอดเลือดแดงที่ถูกเตรียมไว้สำหรับอาบอวัยวะการศึกษาตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 5 ] ความสมบูรณ์ของเยื่อบุได้รับการประเมินเชิงคุณภาพ โดยระดับของการพักผ่อนที่กระตุ้นด้วย acetylcholine ( 1 μ M ) ในการแสดงตนของน้ำเสียงที่ชักนำด้วยนิล ( 0.1 μ M )การสะสมของเส้นโค้งสำหรับ acetylcholine ( 0.1 นาโนเมตร ( 10 μ M ) และโซเดียม nitroprusside ( SNP ) 0.1 0.1 นาโนเมตรμ M ) ที่ได้รับในการอภิปรายเหมือนเดิมและหลอดเลือด aortas พัฒนาตามลำดับ ในอีกชุดของการทดลองความเข้มข้นของการตอบสนองเส้นโค้งสำหรับ acetylcholine ที่ได้รับหลังจากบ่มเป็นเวลา 30 นาที tempol ( 100 μ M , SOD ซึ่งล้อเลียน ) , ( detca diethyldithiocarbamate ,1 มิลลิเมตร และ SOD ) หรือ N ω - nitro-l-arginine เมทิลเอสเทอร์ ( L-NAME 100 μ M ไม่ใช้ NOS inhibitor ) เวลาการตอบสนอง ( เส้นโค้งถูกติดตั้งโดยใช้โปรแกรมเชิงโต้ตอบที่เหมาะสม ( กราฟแผ่นปริซึม 3.0 ; graphpad ซอฟต์แวร์ Inc . , San Diego , CA , USA ) potencies กล้ามเนื้อลายและการตอบสนองสูงสุดที่ถูกแสดงเป็น pd2 ( − logec50 ) และ emax ( ผลสูงสุดโดยใช้ดิอะโกนิสต์ )
)
การแปล กรุณารอสักครู่..