AbstractThe technique of gene targe

Abstract
The technique of gene targeting allows for the introduction of engineered genetic mutations into a mouse at a determined genomic locus. The process of generating mouse models with targeted mutations was developed through both the discovery of homologous recombination and the isolation of murine embryonic stem cells (ES cells). Homologous recombination is a DNA repair mechanism that is employed in gene targeting to insert a designed mutation into the homologous genetic locus. Targeted homologous recombination can be performed in murine ES cells through electroporation of a targeting construct. These ES cells are totipotent and, when injected into a mouse blastocyst, they can diffentiate into all cell types of a chimeric mouse. A chimeric mouse harboring cells derived from the targeted ES cell clone can then generate a whole mouse containing the desired targeted mutation. The initial step for the generation of a mouse with a targeted mutation is the construction of an efficient targeting vector that will be introduced into the ES cells.

Keywords: gene targeting, homologous recombination, gene knockout

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อเทคนิคของยีนเป้าหมายสำหรับการแนะนำออกแบบกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมเป็นเมาส์ที่โลกัสโพล genomic ที่กำหนดได้ กระบวนการของเมาส์แบบจำลองที่สร้างด้วยกลายพันธุ์เป้าหมายได้รับการพัฒนาผ่านการค้นพบของ homologous recombination และแยก murine ตัวอ่อนเซลล์ต้นกำเนิด (ES เซลล์) Homologous recombination เป็นกลไกในการกำหนดเป้าหมายการกลายพันธุ์มาใส่โลกัสโพลทางพันธุกรรมที่ homologous ยีนซ่อมแซมดีเอ็นเอ สามารถทำเป้าหมาย homologous recombination murine ES เซลล์ผ่าน electroporation สร้าง targeting เซลล์เหล่านี้ ES เป็น totipotent และ เมื่อฉีดเข้าไปในอดีตเมาส์ พวกเขาสามารถ diffentiate ในทุกเซลล์ของเมาส์ chimeric เมาส์ chimeric harboring เซลล์ที่มาจากการโคลนเซลล์ ES เป้าหมายแล้วสามารถสร้างเมาส์ทั้งหมดที่ประกอบด้วยการกลายพันธุ์ที่เป้าหมายระบุ ขั้นตอนแรกสำหรับการสร้างเมาส์มีการกลายพันธุ์เป้าหมายคือ สร้างเวกเตอร์ targeting การมีประสิทธิภาพที่จะถูกนำเข้าสู่เซลล์ ESคำสำคัญ: ยีนเป้าหมาย homologous recombination ยีนน่าพิศวง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อเทคนิคการกำหนดเป้าหมายของยีนที่ช่วยให้การแนะนำของวิศวกรรมกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมเข้าไปในเมาส์ที่สถานทีจีโนมที่กำหนด
กระบวนการของการสร้างรูปแบบเมาส์ที่มีการกำหนดเป้าหมายการกลายพันธุ์ที่ได้รับการพัฒนาทั้งการค้นพบรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกันและการแยกเซลล์ต้นกำเนิดจากตัวอ่อนหนูที่ (เซลล์ ES) ด้วย รวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกันเป็นกลไกซ่อมแซมดีเอ็นเอที่ใช้ในการกำหนดเป้าหมายของยีนที่จะแทรกเข้าไปในการกลายพันธุ์ได้รับการออกแบบทีพันธุกรรมคล้ายคลึงกัน การกำหนดเป้าหมายการรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกันสามารถดำเนินการในเซลล์หมา ES ผ่าน electroporation ของการสร้างกำหนดเป้าหมาย เซลล์เหล่านี้มี ES totipotent และเมื่อฉีดเข้าไปในตัวอ่อนเมาส์ที่พวกเขาสามารถ diffentiate เข้าไปในเซลล์ทุกชนิดของเมาส์ลูกผสม เมาส์ลูกผสมเก็บงำเซลล์ที่ได้มาจากเป้าหมายเซลล์โคลน ES แล้วสามารถสร้างเมาส์ทั้งการกลายพันธุ์ที่มีการกำหนดเป้าหมายที่ต้องการ ขั้นตอนแรกในการผลิตเมาส์ที่มีการกำหนดเป้าหมายการกลายพันธุ์คือการก่อสร้างของเวกเตอร์กำหนดเป้าหมายที่มีประสิทธิภาพที่จะถูกนำเข้าสู่เซลล์ ES. คำสำคัญ: กำหนดเป้าหมายยีนคล้ายคลึงกันรวมตัวกันอีกยีนที่น่าพิศวง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เทคนิคบทคัดย่อของยีนเป้าหมายช่วยแนะนํารุ่นการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมในเมาส์ที่มุ่งมั่นสร้างความเชื่อ . กระบวนการของการสร้างรูปแบบเมาส์มีการกลายพันธุ์ เป้าหมายคือพัฒนาทั้งการค้นพบของการเปรียบเทียบและการแยกเซลล์ต้นกําเนิดตัวอ่อน ( ES เซลล์ ~ )การเปรียบเทียบเป็นกลไกที่ใช้ในการซ่อมแซมดีเอ็นเอยีนเป้าหมายสอดออกแบบการกลายพันธุ์เป็นโฮโมโลกัส ปัจจัยทางพันธุกรรม การกำหนดเป้าหมายคล้ายคลึงกันสามารถกระทำได้ใน ~ ES เซลล์ผ่าน electroporation ของเป้าหมายทั้งหมด เหล่านี้เป็นเซลล์ ES โททิโพเทนต์และเมื่อฉีดเข้าไปในตัวอ่อนเมาส์ ,พวกเขาสามารถ diffentiate ในทุกเซลล์ของหนูที่ไม่เป็นจริง เมาส์ที่เซลล์ที่ได้มาจากเซลล์เป้าหมายและโคลนสามารถสร้างทั้งเมาส์ที่มีเป้าหมายที่ต้องการเปลี่ยนแปลง ขั้นตอนแรกสำหรับรุ่นของเมาส์ที่มีเป้าหมายคือการสร้างที่มีประสิทธิภาพการกำหนดเป้าหมายเวกเตอร์ที่จะนำเข้าสู่เซลล์ E .

คำสำคัญ :ยีนเป้าหมาย การเปรียบเทียบยีนที่น่าพิศวง