3.1. ACE inhibitory peptides from in silico digestion
Major egg proteins, such as ovalbumin, ovotransferrin, ovomucin,
lysozyme, low-density lipoprotein, high-density lipoprotein
and phosvitin, were subjected to various in silico digestions. More
than 20,000 peptides were generated from a total of 75 in silico
hydrolysates (Table 1). The IC50 value of the peptides was predicted
by the QSAR models; of three most potent peptides, Ile-Arg-Try
(f7–9), Leu-Lys-Pro (f74–76) and Ile-Gln-Try (f345–347) with predicted
IC50 values of 0.59 lM, 1.4 lM and 2.8 lM, respectively,
were identified in the thermolysin-pepsin hydrolysate of ovotransferrin.
The activities of the synthetic peptides expressed in IC50
were 0.6, 1.6, and 2.9 lM for Ile-Arg-Try, Leu-Lys-Pro and Ile-
Gln-Try, respectively. Therefore, ovotransferrin was decided as
the most suitable protein substrate and thermolysin-pepsin was
the appropriate enzyme combination for the production of the potent
peptides. The following procedure was to demonstrate if the
predicted peptides could be released from the predicted condition
established above.
3.2. Identification of the predicted potent peptides in the
ovotransferrin hydrolysate
Ovotransferrin hydrolysate was prepared by thermolysin followed
by pepsin; thermolysin and pepsin ovotransferrin hydrolysates
were also prepared individually for comparison. As shown
in Table 2, ACE-inhibitory activity of the pepsin hydrolysate
showed the weakest activity among the three hydrolysates, but
there was no significant difference between the thermolysin
hydrolysate and the thermolysin-pepsin hydrolysate. The thermolysin-
pepsin hydrolysate was then subjected to LC–MS/MS analysis
to identify the potent peptide as found in the in silico digestion. As
shown in Fig. 1, two pentapeptides (Ile-Arg-Try-Cys-Thr and Ile-
Gln-Try-Cys-Ala) and one quatrapeptide (Leu-Lys-Pro-Ile), containing
the sequences of the predicted peptides, were identified in the
thermolysin-pepsin hydrolysate.
3.1. เอไทด์ยับยั้งจากในการย่อยอาหารรูปดอกไม้โปรตีนไข่ที่สำคัญ เช่น ovalbumin, ovotransferrin, ovomucinlysozyme ไลโปโปรตีนชนิดความหนาแน่นต่ำ ไลโปโปรตีนชนิดความหนาแน่นสูงและ phosvitin, digestions รูปดอกไม้ต่าง ๆ ถูก เพิ่มเติมกว่า 20,000 เปปไทด์ถูกสร้างจากทั้งหมด 75 ในรูปดอกไม้hydrolysates (ตาราง 1) ค่า IC50 ของเปปไทด์ก็คาดว่าโดยโมเดล QSAR ของเปปไทด์มีศักยภาพมากที่สุดสาม Ile อาร์กิวเมนต์ของค่าลอง(f7-9), ลิว Lys Pro (f74 – 76) และอิล Gln-ลอง (f345 – 347) กับที่คาดการณ์ไว้ค่า IC50 ของ 0.59 lM, 1.4 lM และ 2.8 lM ตาม ลำดับระบุในการฉีดด้วยเพพซิน thermolysin ของ ovotransferrinกิจกรรมของเปปไทด์สังเคราะห์ที่แสดงใน IC500.6, 1.6 และ 2.9 lM สำหรับ Ile อาร์กิวเมนต์ของค่าลอง ลิว-Lys-Pro และเมาลอง Gln ตามลำดับ ดังนั้น ovotransferrin ตัดสินใจเป็นพื้นผิวของโปรตีนที่เหมาะสมที่สุดและ thermolysin เพพซินผสมเอนไซม์ที่เหมาะสมสำหรับการผลิตมีศักยภาพเปปไทด์ ขั้นตอนต่อไปคือการ แสดงให้เห็นว่าการเปปไทด์คาดการณ์สามารถออกจากสภาพคาดการณ์ก่อตั้งขึ้นข้างบน3.2. การระบุคาดการณ์เปปไทด์มีศักยภาพในการovotransferrin ฉีดด้วยจัดทำ โดย thermolysin ตาม Ovotransferrin ด้วยโดยเพพซิน hydrolysates ovotransferrin thermolysin และเพพซินนอกจากนี้ยังจัดทำเป็นรายบุคคลสำหรับการเปรียบเทียบขึ้น ดังแสดงตารางที่ 2 กิจกรรมที่ยับยั้ง ACE ของการฉีดด้วยธาตุเพพซินแสดงให้เห็นว่ากิจกรรมที่อ่อนแอที่สุดในหมู่ hydrolysates สาม แต่ก็ไม่มีความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการ thermolysinฉีดและฉีด thermolysin เพพซิน Thermolysin-เพพซินฉีดได้แล้วภายใต้การวิเคราะห์ LC – MS/MSระบุเปปไทด์มีศักยภาพเป็นพบในรูปดอกไม้ในย่อยอาหาร เป็นแสดงในรูปที่ 1 สองสำคัญ (Ile-อาร์กิวเมนต์ของค่าลอง-Cys-พฤหัสบดีราคาและอิล-Gln-Try-Cys-Ala) และ quatrapeptide หนึ่ง (ลิว-Lys-Pro-Ile), ที่ประกอบด้วยลำดับของเปปไทด์ที่คาดการณ์ มีระบุในการการฉีดด้วยเพพซิน thermolysin
การแปล กรุณารอสักครู่..