2.4. Elicitor preparation
CAH was prepared by culturing C.albicans in conical flasks containing 250 ml Saboraud dextrose broth at 37 ℃ for 3 days as described previously by Rajendran et al. (1992). The turbidity of the suspension broth was adjusted with 0.85% NaCl solution to obtain an absorbance reading of 1.8–2.0 at 530 nm. The culture was homogenized in an ultrasonic bath (550 W, S 100H, Crest Ultrasonic Corporation, USA) for 1 h, and centrifuged at 8000 x g for 30 min. The supernatant was autoclaved at 121 ℃ for 15 min and diluted with distilled water to various concentrations as shown in Table 1.
TRH was prepared by culturing T. rubrum in Saboroud dextrose agar for 10–14 days. Fungal mycelia were collected and dried at 50 ℃ overnight. Dried mycelia (150 mg) were then finely pulverized, and suspended in 20 ml of B5 medium. The suspension of the pulverized mycelia was autoclaved at 121 ℃ for 15 min and diluted with distilled water to various concentrations (Table 1) prior to use (Al-Gendy and Lockwood, 2005).
YE was suspended in B5 medium at pH 5.5 ± 0.1, to afford a stock solution of 0.3 g/ml and sterilized by autoclaving at 121 ℃ for 15 min and adjusted to various elicitor concentrations (Table1) prior to use (Al-Gendy and Lockwood, 2005).
CHI was dissolved in distilled water. The solution was adjusted to pH 5.5 with 1 N NaOH, and the final concentration, adjusted to 10 mg/ml. Aliquot was autoclaved for 15 min at 121 ℃ prior to use. MJ was dissolved in 95% (v/v) ethanol. The solution (30 mM) was filtered through a microfilter (0.22 lm) prior to use (Hwa-Young et al., 2008).
2.4 . การเตรียม elicitorอเมริกาเตรียมโดยการเพาะเลี้ยง c.albicans ในขวดรูปกรวยที่มี 250 ml saboraud Dextrose Broth ที่ 37 ℃ 3 วันตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดยสร้าง et al . ( 1992 ) ความขุ่นของน้ำปรับช่วงล่างด้วยสารละลาย NaCl 0.85 % ขอรับค่าอ่าน 1.8 และ 2.0 ที่ 530 nm . วัฒนธรรมถูกบดในอ่างอัลตราโซนิก ( 550 W , S 100h , ยอดอัลตราโซนิก Corporation , USA ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง และระดับที่ 5 , 000 x g เป็นเวลา 30 นาที และน่านเป็นสังเคราะห์ที่ 121 ℃ 15 นาที และเจือจางด้วยน้ำกลั่นเพื่อความเข้มข้นต่าง ๆ ดังแสดงในตารางที่ 1เจ้าชายถูกเตรียมโดยการเพาะเลี้ยง ต. rubrum ใน saboroud dextrose agar 10 - 14 วัน รา าร ศึกษาและอบแห้งที่ 50 ℃ค้างคืน เส้นใยแห้ง ( 150 มก. ) แล้วนำมาบด และพักงานใน 20 ml ของ B5 ) ระบบกันสะเทือนของเส้นใยสังเคราะห์ที่ถูกบด 121 ℃ 15 นาทีและเจือจางด้วยน้ำกลั่นเพื่อความเข้มข้นต่าง ๆ ( ตารางที่ 1 ) ก่อนใช้ ( อัล gendy และล็อควู้ด , 2005 )ท่านถูกระงับใน B5 ขนาดกลางที่ pH 5.5 ± 0.1 , ซื้อหุ้นโซลูชั่น 0.3 g / ml และฆ่าเชื้อโดยอัตราส่วนโฟกัสที่ 121 ℃ 15 นาทีและปรับปริมาณ elicitor ต่างๆ ( table1 ) ก่อนที่จะใช้ ( อัล gendy และล็อควู้ด , 2005 )ชิ ละลายในน้ำกลั่น สารละลายที่มีค่า pH 5.5 1 N NaOH ที่ความเข้มข้นสุดท้ายและปรับถึง 10 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร การเทศนาเป็นสังเคราะห์สำหรับ 15 นาทีที่ 121 ℃ก่อนที่จะใช้ MJ ละลายใน 95 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) เอทานอล โซลูชั่น ( 30 มม. ) ถูกกรองผ่านค่า ( 0.22 LM ) ก่อนที่จะใช้ ( ฮวายอง et al . , 2008 )
การแปล กรุณารอสักครู่..