2.6. Calcium transport studiesThe C

2.6. Calcium transport studies

The Caco-2 cell monolayers with TEERs exceeding 500 Ω·cm−2 were used for the calcium transport experiments. The monolayers were set in a 12-well plate and washed twice with warm (37 °C) balanced salt solution without calcium and magnesium (HBS) (125 mM NaCl, 4 mM KCl, 4 mM l-Glu, 10 mM Glucose, 30 mM HEPES, adjusted to pH 7.4) and incubated at 37 °C for 20 min. The wells were then transferred to a new cluster plate containing 1.95 ml HBS buffer. Subsequently, 5 mmol/L dietary factors (phosphate, oxalate, zinc ions) and DPs-calcium chelate and DPs-calcium mixtures were added to the apical side of the insert and the calcium transport rates across Caco-2 cell monolayers were measured after 2 h. The TEERs were monitored before and after the addition of the calcium and DPs samples. Finally, the calcium contents were measured with an atomic absorption spectrophotometer (AA6300C, Shimadzu, Kyoto, Japan).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6. แคลเซียมขนส่งศึกษาMonolayers การเซลล์ Caco-2 กับ TEERs เกิน 500 Ω·cm−2 ถูกใช้สำหรับการทดลองขนส่งแคลเซียม Monolayers การตั้งในจานหลุม 12 และล้างสองครั้ง ด้วยความอบอุ่น (37 ° C) ละลายเกลือแคลเซียมและแมกนีเซียม (ดังนั้น) ที่สมดุล (125 มม. NaCl, KCl, 4 มม. 4 มม. l Glu, 10 มม.กลูโคส 30 มม. HEPES ปรับค่า pH 7.4) และรับการกกที่ 37 ° C เป็นเวลา 20 นาที หลุมได้ถูกโอนไปจานคลัสเตอร์ใหม่ประกอบด้วยบัฟเฟอร์ 1.95 ml ดังนั้น ต่อมา mmol/L อาหารปัจจัย 5 (ไอออนสังกะสี ฟอสเฟต ออกซาเลต) และ chelate DPs-แคลเซียม และผสม DPs แคลเซียมเพิ่มแทรกข้าง apical และราคาขนส่งแคลเซียมทั่ว monolayers Caco 2 เซลล์ที่วัดหลังจาก 2 ชม TEERs ที่ถูกตรวจสอบก่อน และ หลังการเพิ่มแคลเซียมและตัวอย่าง DPs ในที่สุด เนื้อหาแคลเซียมถูกวัด ด้วยสเปคการดูดกลืนโดยอะตอม (AA6300C, Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การขนส่งแคลเซียมศึกษา

Caco-2 monolayers มือถือที่มีอาสาเกิน 500 ซม. Ω·-2 ที่ใช้ในการทดลองการขนส่งแคลเซียม monolayers ที่ตั้งอยู่ในแผ่น 12 ดีและล้างครั้งที่สองกับสารละลายเกลือสมดุลอุ่น (37 องศาเซลเซียส) โดยไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (HBS) (125 มิลลิเมตรโซเดียมคลอไรด์ 4 มิ KCl 4 mm L-Glu 10 มิลลิกลูโคส 30 มิลลิ HEPES ปรับค่าพีเอช 7.4) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที หลุมถูกโอนไปแล้วจานคลัสเตอร์ใหม่ที่มี 1.95 มล. HBS บัฟเฟอร์ ต่อมา 5 มิลลิโมล / ลิตรปัจจัยอาหาร (ฟอสเฟตออกซาเลตสังกะสีไอออน) และ DPs แคลเซียมคีเลตและ DPs แคลเซียมผสมถูกเพิ่มไปทางด้านปลายของการแทรกและอัตราการขนส่งแคลเซียมทั่ว Caco-2 monolayers เซลล์ถูกวัดหลังจาก 2 H อาสาถูกตรวจสอบก่อนและหลังการเพิ่มของแคลเซียมและตัวอย่าง DPs สุดท้ายเนื้อหาแคลเซียมถูกวัดกับเครื่อง Atomic Absorption Spectrophotometer (AA6300C, Shimadzu เกียวโตญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การศึกษาการขนส่งแคลเซียมการ caco-2 เซลล์ monolayers กับ teers เกิน 500 Ω· cm − 2 ถูกใช้สำหรับการขนส่งแคลเซียมการทดลอง การ monolayers ถูกตั้ง 12 แผ่น และล้างสองครั้งด้วยอุ่นดี ( 37 ° C ) สารละลายเกลือที่สมดุล โดยแคลเซียมและแมกนีเซียม ( HBS ) ( 125 mm ขนาด 4 mm . 4 มม. l-glu 10 มม. กลูโคส 30 มิลฮีเปสที่ปรับ pH 7.4 ) บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 20 นาที บ่อแล้วส่งไปใหม่ กลุ่มจานที่มี 1.95 ml HBS บัฟเฟอร์ ต่อมา 5 mmol / L ระดับปัจจัย ( ฟอสเฟตออกซาเลต สังกะสีและแคลเซียมไอออน ) DPS และผสมแคลเซียมคีเลต DPS ถูกเพิ่มไปยังด้านปลายของแทรกและอัตราการขนส่งแคลเซียมในเซลล์ caco-2 monolayers วัดหลังจาก 2 ชั่วโมง teers ถูกตรวจสอบก่อนและหลังการเพิ่มแคลเซียมและอัตราตัวอย่าง สุดท้าย เนื้อหาแคลเซียมเป็นวัดที่มี atomic absorption spectrophotometer ( aa6300c Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น )