performed using a Waters Alliance 2695 HPLC in tandem
with a Waters Acquity TQ detector mass spectrometer, on
a C18 RP column using a water/acetonitrile linear gradient.
Glucosinolates were monitored by a UV detector at
229 nm and quantified using an internal standard (sinalbin)
added prior to extraction. Our HPLC analyses allowed
us to quantify the molar concentrations of ten individual
glucosinolate compounds, including seven aliphatic glucosinolates
[3-methylsulfinylpropyl (3 MSOP), 4-methylsulfinylbutyl
(4MSOB), 5-methylsulfinylpentyl (5MSOP),
6-methylsulfinylhexyl (6MSOH), 7-methylsulfinylheptyl
(7MSOH), 4-methylthiobutyl (4MTB), and 8-methylsulfinyloctyl
(8MSOO)] and 3-indolyl glucosinolates [3-indoylmethyl-(
I3 M), 4-methoxy-3-indolylmethyl-(4MOI3 M),
and 1-methoxy-3-indolylmethyl-(1MOI3 M)].
Polyphenols, including anthocyanins, were extracted
and quantified as described previously (Ferrieri et al.
2013). Individual leaves were freeze-dried (4–6 mg DW),
ground as described above, and extracted and quantified.
Phenolics were extracted overnight in 200 μl of 1 % (v/v)
HCl in methanol at 4 °C. An additional extraction with
250 μl distilled water and 500 μl chloroform was used to
remove chlorophyll. Samples were vortexed and centrifuged
for 3 min at 3,000×g. Relative anthocyanin levels in
the aqueous phase were determined spectrophotometrically
by measuring absorbance at 530 nm. Total flavonoid compounds
were also estimated in the same extracts at absorbance
320 nm (Fukumoto and Mazza 2000; Shao et al.
2008). The concentration of total redox-reactive phenolics
present in leaf extracts was determined using the Folin-
Denis assay, with standard curves developed using chlorogenic
and gallic acids, and standards purified from each
ดำเนินการโดยใช้ HPLC 2695 น้ำพันธมิตรตัวตามกันไปด้วยการน้ำ Acquity TQ จับโดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ บนคอลัมน์ C18 RP ที่ใช้ไล่ น้ำ/acetonitrile เชิงเส้นGlucosinolates ถูกตรวจสอบ โดยเครื่องตรวจจับ UV ที่nm 229 และ quantified โดยใช้มาตรฐานการภายใน (sinalbin)เพิ่มก่อนที่จะแยก วิเคราะห์ HPLC ของเราได้เราวัดปริมาณความเข้มข้นสบของบุคคล 10glucosinolate สาร รวม glucosinolates aliphatic เจ็ด[3-methylsulfinylpropyl (3 MSOP) 4-methylsulfinylbutyl(4MSOB), 5-methylsulfinylpentyl (5MSOP),7-methylsulfinylheptyl, 6-methylsulfinylhexyl (6MSOH)(7MSOH), 4-methylthiobutyl (4MTB), และ 8-methylsulfinyloctyl(8MSOO)] และ glucosinolates 3-indolyl [3-indoylmethyl-(I3 M), 4-methoxy-3 - indolylmethyl- (4MOI3 M),และ 1-methoxy-3 - indolylmethyl- (1MOI3 M)]โพลีฟีน anthocyanins รวมถึงถูกแยกและ quantified ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Ferrieri et al2013) นั้นแต่ละใบมีกรอบ (4-6 mg DW) ,พื้นดินเป็นอธิบายไว้ข้างต้น และแยก และ quantifiedPhenolics ได้สกัดค้างคืนใน μl 200 1% (v/v)HCl ในเมทานอลที่ 4 องศาเซลเซียส การสกัดเพิ่มเติมด้วย250 μl กลั่นน้ำ และคลอโรฟอร์ม μl 500 ใช้เอาคลอโรฟิลล์ ตัวอย่าง vortexed และ centrifugedสำหรับ 3 นาที 3, 000 ซื้อกรัมญาติมีโฟเลทสูงระดับในมีกำหนดระยะอควี spectrophotometricallyโดยการวัด absorbance ที่ 530 nm สารประกอบ flavonoid รวมได้ประเมินในสารสกัดเดียวที่ absorbance320 nm (Fukumoto และ Mazza 2000 เสียว et al2008) ความเข้มข้นของ phenolics รวมปฏิกิริยา redoxกำหนดปัจจุบันในสารสกัดจากใบใช้ Folin-ทดสอบ Denis กับเส้นโค้งมาตรฐานที่พัฒนาโดยใช้ chlorogenicและกรด gallic และบริสุทธิ์จากแต่ละมาตรฐาน
การแปล กรุณารอสักครู่..