2.2 Genetic transformationGenetic t

2.2 Genetic transformation
Genetic transformation was conducted by using A. tumefaciens which already cloned with pCAMBIA 1303
plasmid. Inside pCAMBIA 1303, a repoter gene called gus gene with CAMV35s promoter has already inserted in
order to detect J. curcas genotype Jatromas explants susceptibility.
A. tumefaciens containing pCAMBIA 1303 were grown in LA liquid medium on room temperature overnight
with 200 rpm agitation. For transformation, the culture was pelleted and its optical density was adjusted to 0.4-0.5
with modified liquid MS medium. The explants then soaked in MS medium containing A. tumefaciens for 20
minutes. The explants were co-cultivated on modified MS medium for three days. Decontamination was done by
soaking transformed explants in liquid MS containing 100 mg l-1 timentin and 0.2% plant preservative mixture with
agitation. The explants then rinsed three times with sterilized water and will be regenerated to new plantlet by using
tissue culture technique.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมถูกดำเนิน โดย A. tumefaciens ซึ่งโคลนแล้วมี pCAMBIA 1303plasmid ภายใน pCAMBIA 1303 ยีน repoter ที่เรียกว่ายีน gus กับโปรโมเตอร์ CAMV35s มีแทรกในสั่งตรวจ J. curcas ลักษณะทางพันธุกรรม Jatromas explants ภูมิไวรับA. tumefaciens ประกอบด้วย pCAMBIA 1303 ถูกปลูกใน LA ของเหลวในอุณหภูมิห้องค้างคืนมีอาการกังวลต่อ 200 rpm สำหรับการเปลี่ยนแปลง วัฒนธรรมได้ pelleted และความหนาแน่นของแสงถูกปรับให้ 0.4-0.5มีปรับเปลี่ยนของเหลว MS ปานกลาง ใน explants งแล้วใน MS ปานกลางมี A. tumefaciens สำหรับ 20นาที ร่วม explants ถูก cultivated บนแก้ไข MS กลางวันสาม Decontamination ทำโดยชม explants แปรของเหลว MS ประกอบด้วย 100 mg l 1 timentin และ 0.2% preservative ผสมกับพืชอาการกังวลต่อการ ใน explants rinsed สามครั้งน้ำ sterilized แล้วจะสร้างให้ใหม่ plantlet โดยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม
การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมได้ดำเนินการโดยใช้ tumefaciens A. ซึ่งโคลนแล้วกับ pCAMBIA 1303
พลาสมิด ภายใน pCAMBIA 1303, ยีน Repoter เรียกว่ายีน gus กับ CaMV35S โปรโมเตอร์ได้แทรกอยู่ใน
เพื่อตรวจสอบเจดำจีโนไทป์ Jatromas ชิ้นอ่อนแอ.
A. tumefaciens มี pCAMBIA 1303 ได้รับการปลูกในอาหารเหลว LA ในอุณหภูมิห้องในชั่วข้ามคืน
ด้วยการกวน 200 รอบต่อนาที สำหรับการเปลี่ยนแปลงวัฒนธรรมได้รับเม็ดและความหนาแน่นของแสงได้รับการปรับให้ 0.4-0.5
กับอาหารเหลว MS ดัดแปลง ชิ้นส่วนแล้วนำไปแช่ในอาหารสูตร MS ที่มี A. tumefaciens เป็นเวลา 20
นาที ชิ้นส่วนที่ได้รับการปลูกฝังมาร่วมในสูตร MS ดัดแปลงเป็นเวลาสามวัน ปนเปื้อนได้กระทำโดย
การแช่ชิ้นส่วนเปลี่ยนใน MS ของเหลวที่มี 100 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 timentin และผสมสารกันบูดพืช 0.2% และมี
การกวน ชิ้นส่วนล้างแล้วสามครั้งด้วยน้ำฆ่าเชื้อและจะถูกสร้างใหม่เพื่อต้นใหม่โดยใช้
เทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 การถ่ายยีน
ถ่ายยีนดำเนินการโดยใช้ A . tumefaciens ที่โคลนด้วยสิ
pcambia พลาสมิด ภายใน pcambia 1331 , repoter ยีนที่เรียกว่า gus ยีนกับโปรโมเตอร์ camv35s ได้แทรก
เพื่อตรวจจับเจ curcas พันธุกรรม jatromas เลี้ยงไว .
Aซีที่มี pcambia 1331 เติบโตในกลางลา ของเหลวอุณหภูมิห้องค้างคืน
200 รอบต่อนาทีเขย่า สำหรับการเปลี่ยนแปลง , วัฒนธรรมและความหนาแน่นของเม็ดแสงปรับ 0.4-0.5
ด้วยของเหลวอาหารสูตร MS ดัดแปลง เนื้อเยื่อที่แช่แล้วในอาหาร MS ที่มี A . tumefaciens 20
นาที เนื้อเยื่อที่ถูกจำกัดบนอาหาร MS ดัดแปลงมา 3 วันแล้วสารพิษทำได้โดยแช่อาหารในน้ำ
แปลง MS ( 100 มก. L-1 timentin และพืช 0.2% สารกันบูดผสมกับ
เขย่า เนื้อเยื่อ จากนั้นล้างด้วยน้ำ 3 ครั้งฆ่าเชื้อและจะถูกสร้างใหม่ใหม่ ที่ปลูกโดยใช้
เทคนิคเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ