supported by filter paper bridges,

supported by filter paper bridges, were incubated at 25 ± 2°C, for 16 hr. Photoperiod and light intensity of 50 μmoL S provided by cool florescent lamps (Philips, India Ltd.). Seeds germinated in 4-5 days and it attained 4- 5 cm height with 2-3 nodes. Thereafter, within 15-20 days these aseptically grown seedlings were used as source of explants.

Media and Explant Evaluation: For in vitro regeneration three different growth media viz., MS [18], B5 [19] and WPM [20] were tested and supplemented with BA (2.5 mg L 1) mesoinositol (100 mg L 1) and different concentrations of PVP (Polyvinylpyrrolidone 100-500 mg L 1). The pH of culture media was adjusted to 5.6-5.8
using (0.1N HCl and 0.1N NaOH) and solidified with 0.8% agar (Hi-media, Mumbai), 3% sucrose before autoclaved
under 1.06 kg/cm2 at 121°C for 15 min. Different seedling explants like cotyledonary node, hypocotyl, epicotyl and shoot tip explants were inoculated. All the cultures maintained in a growth room at 25 ± 2 °C under 16 hr light with a light intensity of 50 μmoL 2 S 1 provided by cool florescent lamps (Philips, India Ltd.,). Each treatment consisted of 10 cultures and all the experiment were repeated thrice.

Induction of Multiple Shoots: For direct induction of multiple shoots, three different cytokinins BAP, Kn and TDZ (1.0-4.0 mg L 1) individually and in combination of BAP (1.0-3.0 mg L 1) + Kn (1.0 mg L 1) and BAP (1.0-3.0 mg L 1) + TDZ (1.0 mg L 1). The explants were subcultured once in 15 days on basal medium supplemented with same concentrations of growth regulators to minimize the deleterious effect of dark exudates liberated during in vitro conditions.

Proliferation and Elongation: The 45 days old 1-2 cm microshoots obtained from cotyledonary node were further subcultured on MS basal medium containing different concentrations of BA (1.0-1.5 mg L 1) + Kn (0.5- 2.5 mg L 1) and BAP (1.0-1.5 mg L 1) + GA (1.0-2.5 mg 3L 1) were tested for proliferation and elongation purposes. After 45 days, percentages of response, number of shoots and shoot length per culture were recorded.

In vitro Rooting Acclimatization: Elongated shoots (4-5 cm) were transferred to half strength MS basal medium containing NAA ( -naphthaleneacetic acid), IBA (Indole-3-butyric acid) and IAA (indole-3-acetic acid) (1.0-6.0 mg L 1) individually tested for root induction. The frequency of rooting and average number and length of roots per
culture. Well rooted (6-8 cm) plantlets 2 1 were removed from culture tubes and transferred to plastic cups containing ashoots were determined and recorded after 30 days of mixture of sterilized sand, soil and manure (1:1:1) kept in
culture room covered with plastic bags. Gradually acclimatized plantlets were transferred to green house and then field conditions.

Statistical Analysis: The results were analyzed statistically for the number of shoots responded per explant and shoot length for their mean values and standard error (Mean ± SE)

RESULTS AND DISCUSSION
10-15 days old aseptically grown seedling of 3-4 cm length were selected. Hypocotyls, epicotyl, cotyledonary node and shoot tip explants were cultured on semi solid MS (Murashige and Skoog medium), B5 (Gamborg medium) and WPM (woody plant medium) medium supplemented with BA (2.5 mg L ) and Kn (1.0 mg L ). Both MS and WPM medium induced 6-8 shoot buds from cotyledonary node and shoot tip explants within 20 days culture. The highest frequency of shoot bud differentiation (80%) was observed in MS basal medium. However, shoot buds after elongation showed shoot tip necrosis and percent of necrosis was very high (50%) in WPM medium. Several reports have emphasized the medium dependent response and shoot tip necrosis [21,22]. MS medium has also been effectively used in other species of Bauhinia such as B. purpurea [17] and B. variegata [23]. In the present study MS medium has been proved best medium for shoot induction, proliferation, elongation and rooting.


MS medium supplemented with various concentrations of BA, Kn and TDZ (1.0-4.0 mg L ) individually and in combinations BA (1.0-3.0 mg L ) + Kn (1.0 mg L ) and BA (1.0-3.0 mg L ) + TDZ (1.0 mg L ). They induced the shoot buds within 10 days, which developed into green, healthy shoots in another 10 days from cotyledonary node and shoot tip explants buthypocotyls and epicotyl explant produced callus.

After 15 days the shoot segments exhibited browning of the explant and medium due to leaching of phenolics. To prevent the browning, PVP (Polyvinylpyrrolidone, mol. wt. 46,000 D) was added in different concentrations (100- 500 mg L 1) to MS medium containing BA + Kn addition of PVP (200 mg L 1) has given the best results in terms of
regeneration response. Similar, observations were earlier

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ได้รับการสนับสนุนโดยตัวกรองสะพานกระดาษถูกบ่มที่ 25 ± 2 ° C, 16 ชั่วโมง ช่วงแสงและความเข้มของแสงจาก 50 ไมโครโมล s โดยโคมไฟเรืองเย็น (ฟิลิปส์, อินเดีย, ltd.) เมล็ดงอกใน 4-5 วันและจะบรรลุ 4-5 ซม. ความสูง 2-3 โหนด หลังจากนั้นภายใน 15-20 วันต้นกล้าที่ปลูกเลี้ยงในขวดทดลองเหล่านี้ถูกนำมาใช้เป็นแหล่งที่มาของ explants

สื่อและการประเมินผลชิ้น.ในหลอดทดลองการฟื้นฟูสามสื่อการเจริญเติบโตที่แตกต่างกัน ได้แก่ . มิลลิวินาที [18], b5 [19] และคำต่อนาที [20] ได้มีการทดสอบและเสริมด้วย ba (2.5 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) mesoinositol (100 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) และความเข้มข้นที่แตกต่างกันของพีวีพี ( polyvinylpyrrolidone 100-500 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) ph ของสื่อวัฒนธรรมที่จะมีการปรับใช้ 5.6-5.8
(hcl 0.1N และ 0.1N NaOH) และผลึกที่มี 0.8% วุ้น (hi-สื่อมุมไบ)3% ซูโครสเบาก่อน
ภายใต้ 1.06 kg/cm2 ที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที explants ต้นกล้าแตกต่างกันเช่นโหนด cotyledonary, hypocotyl, epicotyl และยิง explants ปลายถูกเชื้อ ทุกวัฒนธรรมไว้ในห้องพักการเจริญเติบโตที่ 25 ± 2 องศาเซลเซียสภายใต้แสง 16 ชั่วโมงกับความเข้มของแสงจาก 50 ไมโครโมล 2 s 1 โดยโคมไฟเรืองเย็น (ฟิลิปส์, อินเดีย, ltd.)การรักษาประกอบด้วย 10 วัฒนธรรมและการทดลองซ้ำสามครั้ง

เหนี่ยวนำของหน่อหลาย. การชักนำโดยตรงของหน่อหลายสาม cytokinins bap ที่แตกต่างกันท้องแขนและ TDZ (1.0-4.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) บุคคลและในการรวมกันของ bap (1.0-3.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) kn (1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) และ bap (1.0-3.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) TDZ (1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1)explants ถูก subcultured ครั้งใน 15 วันในสื่อพื้นฐานเสริมด้วยความเข้มข้นเดียวกันของควบคุมการเจริญเติบโตที่จะลดผลกระทบที่เป็นอันตรายของสิ่งคัดหลั่งที่มืดที่มีอิสรเสรีในระหว่างอยู่ในสภาพหลอดทดลอง

การขยายและการยืดตัว. อายุ 45 วัน 1-2 ซม. microshoots ที่ได้รับจาก cotyledonary โหนดถูก subcultured เพิ่มเติมเกี่ยวกับมิลลิกลางฐานที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของบริติชแอร์เวย์ (10-1.5 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) kn (0.5-2.5 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) และ bap (1.0-1.5 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) ga (1.0-2.5 มิลลิกรัม 3l 1) ได้มีการทดสอบเพื่อวัตถุประสงค์ในการขยายและการยืดตัว หลังจาก 45 วันร้อยละของการตอบสนองจำนวนของหน่อและระยะเวลาในการถ่ายภาพต่อวัฒนธรรมที่ถูกบันทึกไว้

ในหลอดทดลองการขจัดเคยชินกับสภาพ:. ใบยาว (4-5 ซม. ) ถูกย้ายไปมิลลิวินาทีแรงครึ่งกลางฐานที่มี NAA (-naphthaleneacetic กรด)iba (indole-3-butyric กรด) และ IAA (indole-3-กรดอะซิติก) (1.0-6.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) การทดสอบเป็นรายบุคคลสำหรับการชักนำให้เกิดราก ความถี่ของจำนวนรากและค่าเฉลี่ยและความยาวของรากต่อ
วัฒนธรรม รากดี (6-8 ซม. ) 2 1 ต้นถูกถอดออกจากหลอดวัฒนธรรมและโอนไปยังถ้วยพลาสติกที่มี ashoots ได้รับการพิจารณาและบันทึกหลังจาก 30 วันของส่วนผสมของทรายฆ่าเชื้อดินและปุ๋ย (01:01:01) เก็บไว้ในห้องพัก
วัฒนธรรมปกคลุมด้วยถุงพลาสติก ต้นปรับสภาพค่อยๆถูกย้ายไปที่บ้านสีเขียวแล้วสภาพสนาม

การวิเคราะห์ทางสถิติ: ผลการวิเคราะห์ทางสถิติสำหรับจำนวนหน่อตอบสนองต่อชิ้นและยิงระยะเวลาสำหรับค่าเฉลี่ยของพวกเขาและข้อผิดพลาดมาตรฐาน (mean ± se)

ผลและการอภิปราย
10-15 วันต้นกล้าเติบโตเก่าเลี้ยงในขวดทดลอง 3-4 ซม. ยาวที่ไ​​ด้รับการแต่งตั้ง ส่วนใต้ใบเลี้ยง, epicotyl โหนด cotyledonary และยิง explants ปลายเพาะเลี้ยงในมิลลิวินาทีกึ่งของแข็ง (Murashige กลางและ skoog) b5 (Gamborg กลาง) และคำต่อนาที (ขนาดกลางพืชยืนต้น) สื่อเสริมด้วย ba (2.5 มิลลิกรัมต่อลิตร) และ kn (1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร )ทั้ง ms และขนาดกลางที่เกิดคำต่อนาที 6-8 ตายิงจากโหนด cotyledonary และยิง explants ปลายวัฒนธรรมภายใน 20 วัน ความถี่สูงสุดของการถ่ายภาพที่แตกต่างกันตา (80%) ได้รับการตั้งข้อสังเกตในกลางฐานมิลลิวินาที แต่ยิงตูมหลังจากการยืดตัวพบเนื้อร้ายเคล็ดลับการถ่ายภาพและร้อยละของเนื้อร้ายสูงมาก (50%) ในสื่อคำต่อนาทีรายงานหลายได้เน้นการตอบสนองขึ้นอยู่กับขนาดกลางและยิงปลายเนื้อร้าย [21,22] มิลลิกลางยังได้รับการใช้อย่างมีประสิทธิภาพในรูปแบบอื่น ๆ ของ Bauhinia เช่นข purpurea [17] และข variegata [23] ในสื่อมิลลิการศึกษาในปัจจุบันได้รับการพิสูจน์แล้วว่าสื่อที่ดีที่สุดในการเหนี่ยวนำการถ่ายขยายการยืดตัวและการขจัด


มิลลิเสริมกลางที่มีความเข้มข้นต่างๆของบริติชแอร์เวย์,ท้องแขนและ TDZ (1.0-4.0 มิลลิกรัมต่อลิตร) เป็นรายบุคคลและในชุด ba (1.0-3.0 มิลลิกรัมต่อลิตร) kn (1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร) และบริติชแอร์เวย์ (1.0-3.0 มิลลิกรัมต่อลิตร) TDZ (1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร) พวกเขาเกิดตายิงภายใน 10 วันซึ่งการพัฒนาให้เป็นสีเขียวใบมีสุขภาพดีในอีก 10 วันนับจากโหนด cotyledonary และยิง buthypocotyls explants ปลายและ epicotyl ชิ้นแคลลัสที่ผลิต

หลังจาก 15 วันส่วนการถ่ายภาพแสดงการเกิดสีน้ำตาลของชิ้นและขนาดกลางเนื่องจากการชะล้างของฟีนอล เพื่อป้องกันการเกิดสีน้ำตาล, พีวีพี (polyvinylpyrrolidone, น้ำหนักโมเลกุล 46,000 ง..) ถูกเพิ่มเข้ามาในระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกัน (100-500 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) สูตร MS ที่มีนอกจากนี้ ba kn ของพีวีพี (200 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) ได้ให้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุดใน แง่ของการตอบสนองต่อการฟื้นฟู
ที่คล้ายกันข้อสังเกตก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โดยสะพานกระดาษกรอง ถูก incubated ±° C 2 สำหรับ 16 ชั่วโมงช่วงแสงและความเข้มแสงของ μmoL 50 S โดยโคมไฟ florescent เย็น (ฟิลิปส์ อินเดีย จำกัด) 25 เมล็ด germinated ใน 4-5 วันและได้ 4 - 5 ซมสูง ด้วยโหนด 2-3 หลัง ภายใน 15-20 วัน aseptically ปลูกกล้าไม้เหล่านี้ถูกใช้เป็นแหล่งของ explants

Explant ประเมินและสื่อ: สำหรับการฟื้นฟูในสามได้แก่เจริญเติบโตแตกต่างสื่อ MS [18], B5 [19] และ WPM [20] ได้ทดสอบ และเสริม ด้วย BA (2.5 mg L 1) mesoinositol (100 mg L 1) และความเข้มข้นแตกต่างกันของ PVP (Polyvinylpyrrolidone 100-500 มิลลิกรัม L 1) ปรับ pH ของสื่อวัฒนธรรม 5.6-5.8
ใช้ (0.1N HCl และ 0.1N NaOH) และ solidified กับ agar 0.8% (Hi-สื่อ มุมไบ), 3% ซูโครสก่อน autoclaved
ใต้ 1.06 kg/cm2 ที่ 121° C สำหรับ 15 นาทีต่างไปจากเดิม แหล่ง explants เช่นโหน cotyledonary, hypocotyl, epicotyl และ explants แนะนำยิงได้ inoculated สำคัญเก็บรักษาไว้ในห้องพักเจริญเติบโตที่ 25 ± 2 ° C ไฟ 16 ชั่วโมง ด้วยความเข้มแสงของ μmoL 50 2 S 1 โดยโคมไฟ florescent เย็น (ฟิลิปส์ อินเดีย Ltd.,) ทรีตเมนท์ประกอบด้วยวัฒนธรรม 10 และทดลองทั้งหมดถูกซ้ำเลย.

การเหนี่ยวนำของหลายหน่อ: สำหรับการเหนี่ยวนำโดยตรงของหลาย หน่อ สามอื่น cytokinins BAP ช็อปปิ้ง และ TDZ (1.0-4.0 มิลลิกรัม L 1) แต่ละรายการ และร่วมช็อปปิ้ง BAP (1.0-3.0 มิลลิกรัม L 1) (1.0 มิลลิกรัม L 1) และ TDZ BAP (1.0-3.0 มิลลิกรัม L 1) (1.0 มิลลิกรัม L 1) Explants ถูก subcultured ครั้งเดียวในวันที่ 15 บนสื่อโรคเสริม ด้วยความเข้มข้นเดียวกันของหน่วยงานกำกับดูแลการเจริญเติบโตเพื่อลดผลร้ายของ exudates เข้ม liberated ระหว่างเงื่อนไขในการ

การงอกและ Elongation: subcultured 45 วัน microshoots 1-2 ซม.เก่าที่ได้รับจาก cotyledonary โหนขึ้นไปบนความเข้ม MS โรคปานกลางมีต่าง ๆ ข้นของ BA (10-1.5 มิลลิกรัม L 1) ช็อปปิ้ง (0.5-2.5 มิลลิกรัม L 1) และ BAP (1.0-1.5 mg L 1) GA (1.0-2.5 มิลลิกรัม 3 L 1) ทดสอบสำหรับการงอกและ elongation หลังจาก 45 วัน เปอร์เซ็นต์ของผลตอบรับ บันทึกถ่ายภาพและยิงยาวต่อวัฒนธรรม

Acclimatization Rooting ใน: ถ่ายภาพอีลองเกต (4-5 ซม.) ถูกโอนย้ายไปครึ่งแรง MS โรคปานกลางที่มี NAA (กรด - naphthaleneacetic), อิบา (กรดอินโดล-3-butyric) และ IAA (กรดอะซิอินโดล-3-ติก) (1.0-6.0 มิลลิกรัม L 1) แต่ละรายการทดสอบหลักการเหนี่ยวนำ ความถี่ของ rooting และค่าเฉลี่ยจำนวนและความยาวของรากต่อ
วัฒนธรรม Plantlets rooted ดี (6-8 เซนติเมตร) 2 1 ถูกเอาออกจากหลอดวัฒนธรรม และโอนย้ายไปพลาสติกถ้วยที่ประกอบด้วย ashoots ที่กำหนด และบันทึกหลังจาก 30 วันมีส่วนผสมของทราย sterilized ดินและมูล (1:1:1) เก็บ
วัฒนธรรมห้องที่ปกคลุม ด้วยถุงพลาสติก Plantlets acclimatized ค่อย ๆ ถูกโอนย้ายไปที่กรีนเฮ้าส์ และฟิลด์เงื่อนไข

วิเคราะห์ทางสถิติ: มีวิเคราะห์ผลทางสถิติสำหรับจำนวนยอดที่ตอบสนองต่อ explant และยิงยาวค่าเฉลี่ยและความคลาดเคลื่อนมาตรฐาน (เฉลี่ย± SE)

ผลและสนทนา
10-15 วันเก่า aseptically โตแหล่งความยาว 3-4 ซม.ได้เลือก Hypocotyls, epicotyl โหน cotyledonary และ explants แนะนำยิงมี cultured บนกึ่งแข็ง MS (Murashige และ Skoog ปานกลาง) B5 (Gamborg ปานกลาง) และ WPM (วู้ดดี้พืชปานกลาง) สื่อเสริม ด้วย BA (2.5 mg L) และช็อปปิ้ง (1.0 mg L) MS และ WPM ปานกลางอาจ 6-8 ถ่ายภาพอาหารจากโหน cotyledonary และยิง explants แนะนำภายใน 20 วันวัฒนธรรม ความถี่สูงสุดของการสร้างความแตกต่างดอกตูมการยิง (80%) ถูกตรวจสอบโรคใน MS อย่างไรก็ตาม ถ่ายภาพอาหารหลัง elongation พบการตายเฉพาะส่วนของคำแนะนำการถ่ายภาพและร้อยละของการตายเฉพาะส่วนสูงมาก (50%) ใน WPM หลายรายงานได้เน้นการตอบสนองขึ้นอยู่กับขนาด และการถ่ายภาพการตายเฉพาะส่วนของคำแนะนำ [21,22] MS กลางยังมีประสิทธิภาพใช้ในสายพันธุ์อื่น ๆ ของเนียเกิดชงโค [17] และเกิดลาย [23] ในการศึกษาปัจจุบัน MS ขนาดกลางได้รับการพิสูจน์ยิงเหนี่ยวนำ แพร่หลาย elongation และ rooting สุดปานกลาง


MS กลางเสริม ด้วยหลากหลายความเข้มข้นของ BA ช็อปปิ้งและ TDZ (1.0-4.0 มิลลิกรัม L) แต่ละรายการ และ ในชุด BA (1.0-3.0 มิลลิกรัม L) ช็อปปิ้ง (1.0 mg L) และ TDZ BA (1.0-3.0 มิลลิกรัม L) (1.0 mg L) จะทำให้เกิดอาหารยิงภายใน 10 วัน ซึ่งพัฒนาในอีก 10 วันจากโหน cotyledonary และยิงแนะนำ explants buthypocotyls และ epicotyl explant ที่ผลิตแคลลัสเป็นยอดสีเขียว สุขภาพ

หลังจาก 15 วัน ส่วนยิงจัดแสดง browning explant และกลางเนื่องจากการละลายของ phenolics เพื่อป้องกันการ browning, PVP (Polyvinylpyrrolidone, mol. น้ำหนัก D รางวัลละ 46000) ถูกเพิ่มใน (100 - 500 มิลลิกรัม L 1) ความเข้มข้นแตกต่างกันปานกลาง MS ที่ประกอบด้วย BA ช็อปปิ้งแห่ง PVP (200 mg L 1) ให้ผลดีสุดในแง่ของ
ตอบฟื้นฟู คล้าย สังเกตได้ก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสนับสนุนโดยสะพานกระดาษกรองมี incubated ที่ 25 ± 2 ° C สำหรับ 16 ความเข้มแสงและ photoperiod / hr . 50 μmol s จัดให้บริการด้วยโคมไฟ florescent เย็น( Philips อินเดียจำกัด) germinated 4-5 4-5 4-5 เมล็ดพันธุ์ในวันและมี 4 - 5 ซม.ความสูงด้วย 2-3 2-3 2-3 โหนด หลังจากนั้น ภายใน 15-20 15-20 15-20 วันต้นไม้แคระ aseptically เติบโตเหล่านี้ได้ถูกนำมาใช้เป็นแหล่งที่มาของ explants .ประเมินผล

สื่อและ explantสำหรับในการสร้างเองแตกต่างกันสามการเติบโตมีเดียกล่าวคือ, MS [ 18 ], B 5 [ 19 ]และ wpm [ 20 ]เป็นการทดสอบและเสริมด้วย BA ( 2.5 มก. L 1 ) mesoinositol ( 100 มก. L 1 )และแตกต่างกันความเข้มข้นของ_ PVP ( polyvinylpyrrolidone 100-500 100-500 100-500 มก. L 1 ) pH ของวัฒนธรรมสื่อเป็นการปรับเปลี่ยน 5.6-5.8
การใช้( 0.1 n HCL และ 0.1 n โซดาไฟ)และตอกย้ำด้วยสาหร่ายทะเล 0.8% ( Mumbai Hi - สื่อ)3% ซูโครสก่อน autoclaved
ตาม 1.06 กก./ cm 2 ที่ 121 ° C สำหรับ 15 นาทีงอกจากเมล็ด explants แตกต่างกันเช่น cotyledonary โหนด, hypocotyl , epicotyl และยิงประตูปลาย explants เป็น inoculated . ห้องพักทั้งหมดได้รับการดูแลรักษาเป็นอย่างดีที่ทางวัฒนธรรมในการขยายตัวที่ 25 ± 2 ° C ตาม 16 ชม.ไฟด้วยความเข้มของแสง: 50 μmol 2 S 1 จัดให้บริการโดยเย็น florescent หลอดไฟ( Philips ,อินเดียจำกัด,)แต่ละห้องประกอบไปด้วยการบำบัดของ 10 และวัฒนธรรมทั้งหมดที่มีการทดลองซ้ำสาม.

เตาแม่เหล็กไฟฟ้าของหลายคนยิงประตู:สำหรับตรงเตาแม่เหล็กไฟฟ้าของหลายคนยิงประตู,แตกต่างกันสาม cytokinins , BAP ,เซนต์คิตส์และเนวิสและ tdz ( 1.0-4.0 มก. L 1 )แบบเฉพาะตัวและในการผสมผสานของ, BAP ( 1.0-3.0 มก. L 1 ) kN ( 1.0 มก. L 1 )และ, BAP ( 1.0-3.0 มก. L 1 ) tdz ( 1.0 มก. L 1 )ที่ explants เป็น subcultured เมื่อใน 15 วันนับแต่วันที่ของฐานขนาดกลางและเสริมด้วยเหมือนกับความเข้มข้นของการขยายตัวควบคุมเพื่อลดพวงผลของสีเข้ม exudates หลุดพ้นในระหว่างใน Vitro เงื่อนไข.

การแพร่ขยายและ elongation : 45 วันนับจากวันเก่า 1-2 1-2 microshoots ซม.ได้รับจาก cotyledonary โหนดอีกทั้ง subcultured ใน MS ของฐานขนาดกลางที่มีแตกต่างกันความเข้มข้นของ BA ( 1 .0-1.5 มก. L 1 ) kN ( 0.5 - 2.5 มก. L 1 )และ, BAP ( 1.0-1.5 มก. L 1 ), GA ( 1.0-2.5 มก. 3 L 1 )ได้รับการทดสอบแล้วสำหรับวัตถุประสงค์ elongation และการขยายตัว หลังจากผ่านไป 45 วันนับแต่วันเปอร์เซ็นต์ของจำนวนการตอบสนองของความยาวยิงและยิงประตูต่อวัฒนธรรมมีการบันทึก.

ใน Vitro ไทยในระยะยาวนอกจากนี้ทำให้เคยชินกับอากาศยิงซอกซอนเข้าลึกถึงเนื้อผ้าทุก( 4-5 4-5 4-5 ซ.ม.)ได้โอนไปจนถึงขนาดกลางแบบครึ่งความแรงของมิลลิวินาทีของฐานประกอบด้วย NAA - กรด naphthaleneacetic )กลุ่มบริการด้าน( indole - 3 - กรด butyric )และ, iaa , iata , ide ,( indole - 3 - กรดอะซิติก)( 1.0-6.0 มก. L 1 )แบบได้รับการทดสอบแล้วสำหรับเตาแม่เหล็กไฟฟ้าราก ความถี่ของไทยในระยะยาวนอกจากนี้และความยาวและจำนวนเฉลี่ยของรากต่อ
วัฒนธรรม. plantlets รวมถึงมีรากหยั่งลึก( 6-8 6-8 6-8 ซ.ม.) 21 ได้ถูกลบออกจากท่อวัฒนธรรมและจะพาท่านไปส่งถึงยังถ้วยพลาสติกประกอบด้วย ashoots มีกำหนดและบันทึกหลังจาก 30 วันของการผสมผสานของหาดทรายไปฆ่าเชื้อได้ทั้งใบดินและปุ๋ยสด( 1 : 1 : 1 )ได้รับการดูแลรักษาในห้อง
วัฒนธรรมแบบมีหลังคาพร้อมด้วยถุงพลาสติก plantlets เคยชินอย่างค่อยเป็นค่อยไปก็จะพาท่านไปส่งถึงยังบ้านสีเขียวและฟิลด์ การวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติ

ผลการวิเคราะห์ทางสถิติที่มีจำนวนของยิงประตูได้ตอบต่อ explant และยิงประตู:ระดับความยาวของค่าหมายถึงของพวกเขาและความผิดพลาดมาตรฐาน(± SE )

ผลการประชุมและ
10-15 10-15 10-15 วันความยาวงอกจากเมล็ดของ 3-4 3-4 3-4 ซม. aseptically อายุมากแล้วคนที่เลือก hypocotyls , epicotyl , cotyledonary โหนดและยิงประตู:ระดับปลาย explants เป็นวัฒนธรรมในแบบกึ่งของแข็ง ms ( murashige และ skoog ขนาดกลาง), B 5 ( gamborg ขนาดกลาง)และ wpm (เป็นโรงงานขนาดกลาง)ขนาดกลางและเสริมด้วย BA ( 2.5 มก. L )และเซนต์คิตส์และเนวิส( 1.0 มก. L )มิลลิวินาทีและมีขนาดกลาง wpm ก่อขึ้น 6-8 6-8 6-8 ทั้งสองชิ้นใดถ่าย ภาพ จากโหนด cotyledonary และยิงประตู:ระดับ explants ปลาย ภายใน 20 วันนับแต่วันวัฒนธรรม ความถี่สูงสุดของยิงดอกตูมความแตกต่าง( 80% )พบว่าในขนาดกลางของฐาน MS แต่ถึงอย่างไรก็ตามยังยิงเอียร์บัดหลังจาก elongation แสดงให้เห็น ภาพ และเคล็ดลับ necrosis ร้อยละของ necrosis ก็อยู่ในระดับสูงเป็นอย่างมาก( 50% )ในขนาดกลาง wpmรายงานหลายแห่งได้เน้นย้ำถึงการตอบสนอง necrosis ขึ้นอยู่กับและคำแนะนำ:ยิงประตู:ระดับปานกลางที่[ 21,22 ] มีขนาดกลางได้รับการดูแลอย่างมี ประสิทธิภาพ MS ใช้งานในสายพันธุ์อื่นๆของกาหลงเช่นพ. purpurea [ 17 ]และบริเวณยอดดอยขุนห้วยเจดีย์พ.[ 23 ]ยัง ในการศึกษาในปัจจุบันมีขนาดกลางมิลลิวินาทีได้รับการพิสูจน์แล้วว่าสิ่งที่ดีที่สุดสำหรับถ่าย ภาพ :เตาแม่เหล็กไฟฟ้ามีขนาดกลาง elongation การแพร่พันธุ์และไทยในระยะยาวนอกจากนี้ มีขนาดกลาง


MS และเสริมด้วยความเข้มข้นต่างๆของ BAเซนต์คิตส์และเนวิสและ tdz ( 1.0-4.0 L มก.)แบบเฉพาะตัวและในการรวมตัวกัน BA ( 1.0-3.0 L มก.) kN ( 1.0 L มก.)และ BA ( 1.0-3.0 L มก.) tdz ( 1.0 L มก.). พวกเขาก่อขึ้นสำหรับถ่าย ภาพ ภายใน 10 วันนับแต่วันที่พัฒนาไปสู่ประตูเพื่อ สุขภาพ สีเขียวใน 10 วันนับแต่วันอื่นจาก cotyledonary โหนดและยิงประตู:ระดับปลาย explants buthypocotyls และ explant epicotyl ผลิต callus

หลังจากผ่านไป 15 วันนับแต่วันที่แสดงออกส่วนยิงประตู:ระดับความเหลืองกรอบและมีขนาดกลาง explant ได้เนื่องจากมีการปนเปื้อนของ phenolics ในการป้องกันไม่ให้ระดับความเหลืองกรอบที่_ PVP ( polyvinylpyrrolidone Website : www . mol .น้ำหนัก 46,000 D )ได้ถูกเพิ่มลงในความเข้มข้นแตกต่างกัน( 100 - 500 มก. L 1 )ไปจนถึงขนาดกลาง MS ที่มีวุฒิปริญญาตรีสาขาเซนต์คิตส์และเนวิสนอกจากนี้ยังมีลิงค์ pvp ( 200 มก. L 1 )มีให้ได้ผลดีที่สุดในเรื่องของการตอบสนอง
ซึ่งจะช่วยให้ชีวิตใหม่ ความเหมือนการสังเกตการณ์อยู่ก่อนหน้า
ตามมาตรฐาน