Reversed-phase chromatography (also

Reversed-phase chromatography (also called RPC, reverse-phase chromatography, or hydrophobic chromatography) includes any chromatographic method that uses a hydrophobic stationary phase.[1] RPC refers to liquid (rather than gas) chromatography.

The term "reversed-phase" has a historical background. In the 1970s, most liquid chromatography was performed using a solid support stationary phase (also called a "column") containing unmodified silica or alumina resins. This method is now called "normal phase chromatography". In normal phase chromatography, the stationary phase is hydrophilic and therefore has a strong affinity for hydrophilic molecules in the mobile phase. Thus, the hydrophilic molecules in the mobile phase tend to bind (or "adsorb") to the column, while the hydrophobic molecules pass through the column and are eluted first. In normal phase chromatography, hydrophilic molecules can be eluted from the column by increasing the polarity of the solution in the mobile phase.

The introduction of a technique using alkyl chains covalently bonded to the solid support created a hydrophobic stationary phase, which has a stronger affinity for hydrophobic compounds. The use of a hydrophobic stationary phase can be considered the opposite, or "reverse", of normal phase chromatography - hence the term "reversed-phase chromatography".[2][3] Reversed-phase chromatography employs a polar (aqueous) mobile phase. As a result, hydrophobic molecules in the polar mobile phase tend to adsorb to the hydrophobic stationary phase, and hydrophilic molecules in the mobile phase will pass through the column and are eluted first.[2][4] Hydrophobic molecules can be eluted from the column by decreasing the polarity of the mobile phase using an organic (non-polar) solvent, which reduces hydrophobic interactions. The more hydrophobic the molecule, the more strongly it will bind to the stationary phase, and the higher the concentration of organic solvent that will be required to elute the molecule.

Many of the mathematical and experimental considerations used in other chromatographic methods also apply to RPC (for example, the separation resolution is dependent on the length of the column). It can be used for the separation of a wide variety of molecules. It is not typically used for separation of proteins, because the organic solvents used in RPC can denature many proteins. For this reason, normal phase chromatography is more commonly used for separation of proteins.

Today, RPC is a frequently used analytical technique. There are a variety of stationary phases available for use in RPC, allowing great flexibility in the development of separation method

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลับเฟส chromatography (เรียกว่า RPC กลับเฟส chromatography หรือแบบ chromatography) รวมถึงวิธีการโครมาที่ใช้เป็นเฟสกับฝ่ามือ [1] RPC ถึง chromatography ของเหลว (ไม่ใช่ก๊าซ)คำว่า "ย้อนกลับของระยะ" มีพื้นหลังทางประวัติศาสตร์ ในปี 1970, chromatography ของเหลวส่วนใหญ่ดำเนินการโดยใช้ขั้นตอนสนับสนุนแข็งอยู่กับที่ (เรียกว่า "คอลัมน์") ที่ประกอบด้วยเรซิลิกาหรืออะลูมินาที่ยังไม่แปร วิธีนี้เรียก "ระยะปกติ chromatography" ว่าตอนนี้ ในระยะปกติ chromatography ขั้นตอนการนิ่งเป็นน้ำ และมีความสัมพันธ์แข็งแกร่งสำหรับโมเลกุลของน้ำในขั้นตอนการเคลื่อน ดังนั้น โมเลกุลน้ำในระยะการเคลื่อนที่มักจะ ผูก (หรือ "ชื้น") คอลัมน์ ในขณะที่โมเลกุลฝ่ามือผ่านคอลัมน์ และมี eluted ก่อน ในขั้นตอนปกติ chromatography น้ำโมเลกุลสามารถ eluted จากคอลัมน์ โดยเพิ่มขั้วของการแก้ปัญหาในขั้นตอนการเคลื่อนที่แนะนำเทคนิคการใช้โซ่ alkyl covalently ผูกมัดการสนับสนุนไม้สร้างเป็นแบบอยู่นิ่งเฟส ซึ่งมีความสัมพันธ์แข็งแกร่งสำหรับแบบสาร ใช้ขั้นตอนอยู่กับที่แบบถือได้ว่าตรงข้าม หรือ "ย้อนกลับ" ของระยะปกติ chromatography - ดังนั้นคำว่า "เฟสกลับ chromatography" [2] [3] ย้อนกลับเฟส chromatography ใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ (ละลาย) ขั้วโลก เป็นผล โมเลกุลแบบในเฟสเคลื่อนที่ขั้วโลกมีแนวโน้มที่ชื้นระยะกับฝ่ามือ และโมเลกุลน้ำในระยะการเคลื่อนที่จะผ่านคอลัมน์ และมี eluted ก่อน [2] [4] แบบโมเลกุลสามารถ eluted จากคอลัมน์ โดยการลดขั้วของระยะการเคลื่อนที่โดยใช้การ (ที่ไม่ใช่ขั้วโลก) ตัวทำละลายอินทรีย์ ซึ่งลดการโต้ตอบแบบ แบบเพิ่มเติมโมเลกุล ยิ่งอย่างยิ่งก็จะผูกระยะนิ่ง และสูงกว่าความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์ที่จำเป็นต้อง elute โมเลกุลข้อควรพิจารณาทางคณิตศาสตร์ และการทดลองใช้วิธีการโครมาอื่น ๆ มากมายใช้กับ RPC (เช่น ความละเอียดแยกจะขึ้นอยู่กับความยาวของคอลัมน์) สามารถใช้สำหรับการแยกโมเลกุลที่หลากหลาย ไม่โดยทั่วไปใช้สำหรับการแยกโปรตีน เนื่องจากตัวทำละลายอินทรีย์ที่ใช้ RPC สามารถ denature โปรตีนจำนวนมาก ด้วยเหตุนี้ chromatography เฟสปกติทั่วไปใช้สำหรับการแยกโปรตีนวันนี้ RPC เป็นเทคนิควิเคราะห์ที่ใช้บ่อย มีหลายขั้นตอนแบบที่ใช้ใน RPC ให้ความยืดหยุ่นในการพัฒนาวิธีการแยก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ย้อนกลับเฟสโครมาโต (ที่เรียกว่า RPC กลับเฟสโคหรือโครมาชอบน้ำ) รวมถึงวิธีโครมาใด ๆ ที่ใช้เฟสชอบน้ำ. [1] RPC หมายถึงของเหลว (แทนที่จะแก๊ส) โครมาโต. คำว่า "ย้อนกลับเฟส" มีภูมิหลังทางประวัติศาสตร์ ในปี 1970 ที่ของเหลวส่วนใหญ่ได้รับการดำเนินการโดยใช้การสนับสนุนที่เป็นของแข็งเฟส (เรียกว่ายังมี "คอลัมน์") ที่มียังไม่แปรซิลิกาหรืออลูมิเรซิ่น วิธีการนี้เรียกว่าตอนนี้ "เฟสโครมาปกติ" ในโครมาโตเฟสปกติ, เฟสเป็น hydrophilic และดังนั้นจึงมีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งสำหรับโมเลกุล hydrophilic ในเฟสเคลื่อนที่ ดังนั้นโมเลกุล hydrophilic ในเฟสเคลื่อนที่มีแนวโน้มที่จะผูก (หรือ "ดูดซับ") เพื่อคอลัมน์ในขณะที่ไม่ชอบน้ำโมเลกุลผ่านคอลัมน์และมีการชะแรก ในโครมาโตเฟสปกติโมเลกุล hydrophilic สามารถชะจากคอลัมน์โดยการเพิ่มขั้วของการแก้ปัญหาในขั้นตอนการมือถือ. แนะนำเทคนิคที่ใช้โซ่อัลคิลผูกมัด covalently การสนับสนุนที่มั่นคงสร้างเฟสชอบน้ำซึ่งมีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่ง สำหรับสารที่ไม่ชอบน้ำ การใช้งานของเฟสชอบน้ำได้รับการพิจารณาตรงข้ามหรือ "ย้อนกลับ" ของโครมาโตเฟสปกติ. - ด้วยเหตุนี้คำว่า "โครมาย้อนกลับเฟส" [2] [3] Reversed เฟสโคพนักงานขั้วโลก (น้ำ) โทรศัพท์มือถือ ระยะ เป็นผลให้โมเลกุลชอบน้ำในเฟสเคลื่อนที่ขั้วโลกมีแนวโน้มที่จะดูดซับไปเฟสชอบน้ำและโมเลกุล hydrophilic ในเฟสเคลื่อนที่จะผ่านคอลัมน์และมีการชะแรก. [2] [4] โมเลกุล Hydrophobic สามารถชะจาก คอลัมน์โดยการลดขั้วของเฟสเคลื่อนที่โดยใช้อินทรีย์ (ไม่มีขั้ว) เป็นตัวทำละลายซึ่งจะช่วยลดการมีปฏิสัมพันธ์กับน้ำ ไม่ชอบน้ำมากขึ้นโมเลกุลที่มากขึ้นอย่างมากก็จะผูกกับเฟสและความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์ที่จะต้องชะโมเลกุล. สูงหลายของการพิจารณาทางคณิตศาสตร์และการทดลองใช้ในวิธีโครมาอื่น ๆ นอกจากนี้ยังนำไปใช้กับ RPC (ตัวอย่างเช่นความละเอียดแยกจะขึ้นอยู่กับความยาวของคอลัมน์) มันสามารถใช้สำหรับการแยกความหลากหลายของโมเลกุล มันไม่ได้มักจะใช้สำหรับการแยกโปรตีนเพราะตัวทำละลายอินทรีย์ใช้ใน RPC สามารถลบล้างโปรตีนหลาย ด้วยเหตุนี้เฟสโครมาปกติอื่น ๆ ที่ใช้กันทั่วไปสำหรับการแยกโปรตีน. วันนี้ RPC เป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่ใช้บ่อย มีความหลากหลายของเฟสใช้ได้สำหรับการใช้งานใน RPC จะช่วยให้ความยืดหยุ่นที่ดีในการพัฒนาวิธีการแยก