LAB were isolated from kimchi. Kimc

LAB were isolated from kimchi. Kimchi samples (cabbage kimchi) were purchased at local markets at Jinju, Gyeongnam, Republic of Korea during the summer season in 2014. Kimchi samples (20 g) were mixed with 80 ml of 0.1% peptone water and homogenized with Stomacher 80 (Seward, Worthing, UK). Serially diluted kimchi samples were spread on deMan Rogosa Sharpe (MRS, Difco, Becton Dickinson Co., Sparks, MD, USA) agar plates and incubated at 30 C statically. Isolated strains were examined for their acid tolerance, bile salts tolerance, and activities of bile salt hydrolase and other useful enzymes. For tolerance against acid and bile salts, the overnight cultures of isolates were spotted on MRS agar plates adjusted to pH 2.0 or MRS agar plates supplemented with 0.3% bile salts (cholic acid sodium salt 50% and deoxycholic acid sodium salt 50%, SigmaeAldrich, 48305). For enzyme activities, the overnight cultures were spotted on MRS agar plates supplemented with 0.5% (w/v) taurodeoxycholic acid (Sigma) or 5-bromo-4-chloro-3indolyl-b-D-galactopyranoside (X-Gal) or 5-bromo-4-chloro-3indolyl-a-D-galactopyranoside (X-a-Gal). The plates were incubated for 24 h at 30 C. The presence of each enzyme activity was visualized as an altered colony morphology (clear zone around the colony and color of the colony) as compared with the negative control (Lactococcus lactis MG1363). Identification of selected strains was done by using API 50CHL kit (BioMerieux, Marcy L'Etoile, France) and 16S rRNA gene sequencing. The universal primers, 27F and 1492R, were used to amplify 16S rRNA genes: 27F
(50-AGAGTTTGAT CMTGGCTCAG-30) and 1492R
(50eTACGGYTACCTTGTTAC GACTT-30) (Lee et al., 2012). Amplified fragments were examined by agarose gel electrophoresis and purified using a PCR purification kit (FavorPrep PCR purification mini kit, Favorgen, Ping-Tung, Taiwan). The sequences were determined at Cosmogenetech (Seoul, Korea) and BLAST program was used to find homologous sequences in the database (http://www.ncbi.nlm. nih.gov/BLAST).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ห้องปฏิบัติได้แยกต่างหากจากกิมจิ ตัวอย่างกิมจิ (กิมจิกะหล่ำปลี) ถูกซื้อในตลาดท้องถิ่นที่จินจู Gyeongnam สาธารณรัฐเกาหลีในช่วงฤดูร้อนในปี 2557 ตัวอย่างกิมจิ (20 กรัม) ผสมกับ 0.1% peptone น้ำ 80 มิลลิลิตร และ homogenized มีแผงประดับหน้าอก 80 (เซวาร์ด บางซื่อ สหราชอาณาจักร) กิมจิ serially เจือจางตัวอย่างที่กระจายอยู่บน deMan แผ่นวุ้น Rogosa Sharpe (MRS, Difco, Becton ดิกคินสัน จำกัด ประกายไฟ MD สหรัฐอเมริกา) และได้รับการกกที่ 30 C statically แยกสายพันธุ์ถูก examined กรดความอดทน ความอดทนเกลือน้ำดี และกิจกรรมของ hydrolase เกลือน้ำดีและเอนไซม์ที่มีประโยชน์อื่น ๆ สำหรับค่าเผื่อต่อกรดและน้ำดีเกลือ วัฒนธรรมข้ามแยกถูกด่างบนแผ่นวุ้นนางปรับ pH 2.0 หรือ MRS แผ่นวุ้นที่เสริม ด้วยเกลือน้ำดี 0.3% (cholic กรดโซเดียมเกลือ 50% และ deoxycholic โซเดียมกรดเกลือ 50%, SigmaeAldrich, 48305) สำหรับกิจกรรมของเอนไซม์ วัฒนธรรมข้ามคืนถูกด่างบนแผ่นวุ้น MRS ที่เสริม ด้วยกรด taurodeoxycholic 0.5% (w/v) (Sigma) หรือ 5-bromo-4-chloro-3indolyl-b-D-galactopyranoside (X-Gal) หรือ 5-bromo-4-chloro-3indolyl-a-D-galactopyranoside (X เป็น Gal) แผ่นได้รับการกก 24 ชม.ที่ 30 c การปรากฏตัวของแต่ละกิจกรรมเอนไซม์ถูกแสดงเป็นภาพเป็นอาณานิคมมีการเปลี่ยนแปลงสัณฐาน (ชัดเจนโซนทั่วอาณานิคมและสีของอาณานิคม) เมื่อเทียบกับการควบคุมเชิงลบ (Lactococcus lactis MG1363) การระบุของสายพันธุ์ที่เลือกทำ โดยใช้ API 50CHL kit (BioMerieux มาร์ซี่ L'Etoile ฝรั่งเศส) และ 16S rRNA ยีนลำดับ ไพรเมอร์สากล 27F และ 1492R ใช้ในการขยายยีน 16S rRNA: 27F(50-AGAGTTTGAT CMTGGCTCAG-30) และ 1492R(50eTACGGYTACCTTGTTAC GACTT-30) (Lee et al. 2012) ส่วนขยายถูก examined โดยอิเจ agarose และบริสุทธิ์โดยใช้ชุดฟอก PCR (FavorPrep PCR ฟอกมินิชุด Favorgen ปิงตุง ไต้หวัน) ลำดับที่ได้กำหนดใน Cosmogenetech (โซล เกาหลี) และใช้โปรแกรมระเบิดเพื่อหาลำดับเซทจะมีในฐานข้อมูล (http://www.ncbi.nlm. nih.gov/BLAST)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

LAB ที่แยกได้จากกิมจิ ตัวอย่างกิมจิ (กิมจิกะหล่ำปลี) กำลังซื้อในตลาดท้องถิ่นที่ Jinju, Gyeongnam สาธารณรัฐเกาหลีในช่วงฤดูร้อนในปี 2014 ตัวอย่างกิมจิ (20 กรัม) ได้รับการผสมกับ 80 มิลลิลิตรของน้ำเปปโตน 0.1% และหดหายกับ Stomacher 80 (ซีเวิร์ด Worthing, สหราชอาณาจักร) ปรับลดลำดับตัวอย่างกิมจิถูกแพร่กระจายบน Deman Rogosa ชาร์ป (MRS, Difco, Becton ดิกคินสัน จำกัด , ประกายไฟ, MD, USA) วุ้นจานและบ่มที่ 30 C แบบคงที่ สายพันธุ์ที่แยกได้มีการตรวจสอบสำหรับความอดทนของพวกเขากรดอดทนเกลือน้ำดีและกิจกรรมของ hydrolase เกลือน้ำดีและเอนไซม์ที่มีประโยชน์อื่น ๆ สำหรับความอดทนกับกรดและน้ำดีเกลือวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของเชื้อเป็นด่างบนจาน MRS agar ปรับค่าพีเอช 2.0 หรือแผ่น MRS agar เสริมด้วยเกลือน้ำดี 0.3% (กรดโคลิเกลือโซเดียม 50% และเกลือโซเดียมกรด deoxycholic 50%, SigmaeAldrich, 48305) สำหรับกิจกรรมของเอนไซม์วัฒนธรรมค้างคืนเป็นด่างบนจาน MRS agar เสริมด้วย 0.5% (w / v) กรด taurodeoxycholic (ซิกม่า) หรือ 5 Bromo-4-chloro-3indolyl-BD-galactopyranoside (X-แกลลอน) หรือ 5 Bromo -4-chloro-3indolyl-aD-galactopyranoside (XA-แกลลอน) แผ่นถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงวันที่ 30 องศาเซลเซียสการปรากฏตัวของเอนไซม์แต่ละคนถูกมองเห็นเป็นลักษณะทางสัณฐานวิทยาอาณานิคมเปลี่ยนแปลง (โซนที่ชัดเจนรอบอาณานิคมและสีของอาณานิคม) เมื่อเทียบกับการควบคุมลบ (Lactococcus lactis MG1363) บัตรประจำตัวของสายพันธุ์ที่คัดได้กระทำโดยใช้ชุด API 50CHL (BIOMERIEUX ร์ซี่ L'Etoile, ฝรั่งเศส) และ 16S rRNA ยีนลำดับ ไพรเมอร์สากล 27 และ 1492R ถูกนำมาใช้ในการขยายยีน 16S rRNA: 27
(50 AGAGTTTGAT CMTGGCTCAG-30) และ 1492R
(50eTACGGYTACCTTGTTAC GACTT-30) (. Lee et al, 2012) ชิ้นส่วนขยายที่ถูกตรวจสอบโดยข่าวคราว agarose และบริสุทธิ์โดยใช้ชุดฟอก PCR (PCR FavorPrep บริสุทธิ์มินิชุด Favorgen ปิงตุงไต้หวัน) ลำดับที่ได้รับการพิจารณา Cosmogenetech (กรุงโซลประเทศเกาหลี) และโปรแกรมการระเบิดที่ถูกใช้ในการหาลำดับคล้ายคลึงกันในฐานข้อมูล (http:. //www.ncbi.nlm nih.gov/BLAST)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แล็บทดลองแยกจากกิมจิ ตัวอย่างกิมจิ ( กิมจิผักกาดขาว ) ซื้อในตลาดท้องถิ่นที่จินจู Gyeongnam สาธารณรัฐเกาหลี ในช่วงฤดูร้อนในปี 2014 ตัวอย่างกิมจิ ( 20 กรัม ) ผสมกับ 80 มิลลิลิตรของน้ำและ 0.1% ตามลำดับบดกับแผงประดับหน้าอก 80 ( ซีเวิร์ดเบอโร , สหราชอาณาจักร , ) กิมจิเป็นเจือจางจำนวนกระจายดีเมิน rogosa ชาร์ป ( นาง difco เบคตอนดิกคินสัน , บริษัท , ประกายไฟ , MD , USA ) แผ่นวุ้น และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสได้ด้วย . การแยกสายพันธุ์ของกรดน้ำดีเกลือความอดทน อดกลั้น และกิจกรรมของเอนไซม์ไฮโดรเลส เกลือน้ำดี และประโยชน์อื่น ๆ ทนกับกรดและเกลือน้ำดีในชั่วข้ามคืนของวัฒนธรรม เชื้ออยู่ในนางวุ้นแผ่นปรับ pH 2.0 หรือนางวุ้นแผ่นเสริม 0.3% เกลือน้ำดี ( กรดโคลิกเกลือโซเดียม 50% และหน้าปัดใหญ่เกลือโซเดียม 50% sigmaealdrich 48305 , ) สำหรับกิจกรรมเอนไซม์ วัฒนธรรมค้างคืนอยู่ในจานอาหาร MRS agar 0.5% ( w / v ) taurodeoxycholic acid ( Sigma ) หรือ 5-bromo-4-chloro-3indolyl-b-d-galactopyranoside ( x-gal ) หรือ 5-bromo-4-chloro-3indolyl-a-d-galactopyranoside ( x-a-gal ) จานถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส การปรากฏตัวของแต่ละกิจกรรมเอนไซม์มองเห็นเป็นการเปลี่ยนแปลงลักษณะของโคโลนี ( บริเวณใสรอบโคโลนีและสีของอาณานิคม ) เมื่อเทียบกับการควบคุมเชิงลบ ( แลคโตค คัส lactis mg1363 ) การเลือกสายพันธุ์ที่ถูกทำโดยการใช้ API 50chl Kit ( biomerieux มาร์ซี่ l"etoile , ฝรั่งเศส ) และลำดับเบส 16S rRNA ยีน . ไพรเมอร์ 27f 1492r สากล และมีการใช้อำนาจของ 16S rRNA ยีน : 27f( 50-agagtttgat cmtggctcag-30 ) และ 1492r( 50etacggytaccttgttac gactt-30 ) ( ลี et al . , 2012 ) ชิ้นส่วนของถูกตรวจสอบโดยเจลอิเลคโตรโฟรีซีสและบริสุทธิ์โดยใช้ PCR ฟอก Kit ( favorprep PCR บริสุทธิ์ขนาดเล็กชุด favorgen ปิงตุง ไต้หวัน ) ลําดับที่ cosmogenetech สารละลาย ( โซล เกาหลี ) และโปรแกรมที่ใช้ในการค้นหาระเบิดเปรียบเทียบลำดับในฐานข้อมูล ( http://www.ncbi.nlm . NIH . gov / ระเบิด )