In the present study, a new lipase SL-4 from Burkholderia ubonensis SL-4, was purified by 80% ammonium
sulphate precipitation, Q Sepharose FF anion exchange and Superdex 75 gel filtration chromatography
finally leading to 68.5-fold purification and 13.34% recovery. It had a molecular mass of ca. 33 kDa and the
whole gene (1095-bp) was cloned by using degenerate primers. Amino acid sequence analysis revealed
that lipase SL-4 is a new member of subfamily I.2 lipases. Lipase SL-4 exhibited optimum activity toward
p-NP myristate (C14) at pH 8.5 and 65 ◦C with a Km of 0.72 mM, a kcat of 391.63 s−1 and a kcat/Km of
543.93 s−1 mM−1. It had good thermostability at 50 ◦C and pH 8.5, and could be activated strongly by Ca2+
and Mn2+, butinhibited by some transition metal ions and EDTA, PMSF, DTT and -
-ME.Additionally, lipase
SL-4 possessed non-ionic detergent stability and organic solvent stability. When preliminarily employed
to catalyze soybean oil for biodiesel production, the liquid lipase SL-4 could attain a conversion ratio of
92.24% in a solvent-free system. These results demonstrate that the new thermo-solvent-stable lipase
possesses an attractive potential for biotechnological applications as biocatalyst, especially for biodiesel
production.
ในการศึกษาใหม่ , ไลเปส sl-4 จาก Burkholderia ubonensis sl-4 , บริสุทธิ์ โดย 80% แอมโมเนียการตกตะกอนขุ่น , Q เกี่ยวข้อง FF แลกเปลี่ยนไอออน superdex 75 และ gel filtration chromatographyในที่สุดก็นำไปสู่ 68.5-fold 13.34 % บริสุทธิ์และการกู้คืน มันมีมวลโมเลกุลประมาณ 33 kDa และทั้งยีน ( 1095 BP ) ถูกโคลนโดยใช้ degenerate primers . การวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโนพบว่ามี sl-4 เป็นสมาชิกใหม่ของ subfamily i.2 ไลเปส . มีกิจกรรมที่เหมาะสมต่อ sl-4 ไลเปสp-np 30 องศาเซล ( C14 ) ที่ pH 8.5 และ 65 ◦ C กับ km ) อืมม kcat ของ 391.63 s − 1 และ kcat / km จาก543.93 s − 1 มม. − 1 มันมี 50 ◦ทดลพีเอช 8.5 , และสามารถใช้งานได้มีแคลเซียม + โดยและ mn2 + butinhibited โดยการเปลี่ยนแปลงบางโลหะและไอออน PMSF และ EDTA , DTT ,-me.additionally ไลเปสมีเสถียรภาพและความมั่นคง sl-4 ผงซักฟอกไม่ละลายอินทรีย์ เมื่อใช้เบื้องต้นเร่งน้ำมันถั่วเหลืองสำหรับผลิตไบโอดีเซล เอนไซม์น้ำ sl-4 สามารถบรรลุอัตราส่วนการแปลงของ92.24 ในงานวิจัยนี้ได้ศึกษาระบบ . ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าใหม่ร้อนละลายมั่นคงไลเปสมีศักยภาพที่น่าสนใจสำหรับการใช้งานด้านเทคโนโลยีชีวภาพเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพ โดยเฉพาะไบโอดีเซลการผลิต
การแปล กรุณารอสักครู่..