3.1. Selection of RT–PCR primersTo

3.1. Selection of RT–PCR primers
To obtain a sufficient amount of viral RNA and to facilitate
successful amplification of all gene segments, the viruses
were passaged for at least for two generations until an obvious
cytopathic effect appeared (data not shown). To synthesize
cDNA from all genes of the influenza A virus, the first twelve
nucleotide sequence was chosen based on the 3-termini of all
segments of the virus. The BLAST system was used to compare
the sequence of synthesized cDNA with that of the expected
sequence in GenBank, which showed that the 3-termini of all
segments was highly conserved among all vRNA segments with
the exception that the fourth base may be “A” or “G” in the
cDNA of different influenza viruses. Therefore, to improve the
complementarity of this primer, the fourth base of this primer
was designed by using “R” instead of “A”. To distinguish this
primer from that of described previously, this primer was named
Uni12(M).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.1. การเลือกไพรเมอร์ RT – PCRรับจำนวนเงินเพียงพอของอาร์เอ็นเอไวรัส และ เพื่ออำนวยความสะดวกขยายความสำเร็จของกลุ่มยีนทั้งหมด ไวรัสมี passaged สำหรับน้อยสำหรับรุ่นสองถึงความชัดเจนcytopathic ผลปรากฏ (ข้อมูลไม่แสดง) สังเคราะห์cDNA จากยีนทั้งหมดของไวรัสไข้หวัดใหญ่ A สิบสองครั้งแรกลำดับนิวคลีโอไทด์ถูกเลือกตามเทอร์มินิ 3 - ทั้งหมดส่วนของไวรัส ระบบระเบิดถูกใช้เพื่อเปรียบเทียบลำดับของการสังเคราะห์ cDNA กับของที่คาดลำดับใน GenBank ซึ่งชี้ให้เห็นว่าเทอร์มินิ 3 - ทั้งหมดเซ็กเมนต์สูงอยู่ในเซ็กเมนต์ vRNA ทั้งหมดด้วยข้อยกเว้นที่ฐานสี่อาจจะ "เป็น" หรือ "G" ใน การcDNA ของไวรัสไข้หวัดใหญ่แตกต่างกัน ดังนั้น การปรับปรุงการcomplementarity นี้พื้น ฐานสี่พื้นนี้ถูกออกแบบ โดยใช้ "R" แทน "A" แยกความแตกต่างนี้รองพื้นจากที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ รองพื้นนี้ชื่อว่าUni12(M)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.1 การเลือกไพร RT-PCR
เพื่อให้ได้ปริมาณที่เพียงพอของอาร์เอ็นเอไวรัสและเพื่ออำนวยความสะดวก
การขยายประสบความสำเร็จของทุกกลุ่มยีนไวรัส
ถูก passaged อย่างน้อยสองรุ่นจนเห็นได้ชัด
มีผล cytopathic ปรากฏตัว (ไม่ได้แสดงข้อมูล) การสังเคราะห์
cDNA จากยีนของไวรัสไข้หวัดใหญ่, สิบสองครั้งแรก
ลำดับนิวคลีโอที่ได้รับเลือกขึ้นอยู่กับ 3? -termini ของทุก
ส่วนของไวรัส ระบบระเบิดถูกใช้ในการเปรียบเทียบ
ลำดับของยีนสังเคราะห์กับที่คาดว่าจะได้
ลำดับใน GenBank ซึ่งแสดงให้เห็นว่า 3? -termini ของทุก
กลุ่มที่ได้รับการอนุรักษ์อย่างมากในทุกกลุ่ม vRNA ที่มี
ข้อยกเว้นที่ฐานที่สี่อาจจะเป็น " "หรือ" G "ใน
ยีนของไวรัสไข้หวัดใหญ่ที่แตกต่างกัน ดังนั้นเพื่อปรับปรุง
complementarity ของไพรนี้ฐานที่สี่ของไพรเมอร์นี้
ได้รับการออกแบบโดยใช้ "R" แทน "" เพื่อให้เห็นความแตกต่างนี้
ไพรเมอร์จากที่อธิบายไว้ก่อนหน้าไพรนี้เป็นชื่อ
Uni12 (M)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.1 . RT PCR Primers
–เลือกเพื่อให้ได้ปริมาณที่เพียงพอของไวรัส RNA และเพื่อความสะดวก
( ประสบความสําเร็จของทุกกลุ่มยีนไวรัส
ถูก passaged อย่างน้อยสองรุ่นจนกว่าผล cytopathic ชัดเจน
ปรากฏ ( ข้อมูลไม่แสดง ) สังเคราะห์ cDNA จาก
ยีนของไวรัสไข้หวัดใหญ่ ,
12 ก่อนลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ถูกเลือกขึ้นอยู่กับ 3  - แทร์มินี่ทั้งหมด
ส่วนของไวรัส ระบบระเบิดถูกใช้เพื่อเปรียบเทียบลำดับของยีนที่สังเคราะห์ด้วย

ลำดับที่คาดว่าบริเวณที่พบว่า 3  - แทร์มินี่ทั้งหมด
ส่วนสูงในบรรดากลุ่มอนุรักษ์ vrna กับ
ข้อยกเว้นที่ฐานที่สี่อาจจะ " มี " หรือ " G "
สายพันธุ์ไวรัสไข้หวัดใหญ่ที่แตกต่างกัน ดังนั้น เพื่อปรับปรุง
complementarity ไพรเมอร์ , ฐานที่สี่นี้ถูกออกแบบโดยการใช้ไพรเมอร์
" r " แทน " เป็น " แยกแยะสีรองพื้นนี้
จากที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ รองพื้นนี้ชื่อว่า
uni12 ( M )