2.2. Recovery of STEC strains on se

2.2. Recovery of STEC strains on selective agar
Single colonies of the strains were individually inoculated into 10 ml
of modified tryptic soy broth (mTSB: tryptic soy broth [30 g/l; Difco],
bile salts no. 3 [1.5 g/l; Difco, BD], K2HPO4 [1.5 g/l; Sigma, St. Louis,
MO], pH 7.4), supplemented with 10 mg/l vancomycin (Sigma) and
3 mg/l cefsulodin (Sigma) after 4 h (mTSB-VC broth) as described in
Gill et al. (2012), and incubated for 18–24 h. at 42 °C.
The following selective agar media were evaluated for their ability
to support the growth of STEC strains. MacConkey Agar (MAC; Difco);
Rainbow® Agar O157 (RBA; Biolog Inc., Hayward, California); Rainbow®
Agar O157 supplemented, with 10 mg/l novobiocin (Sigma)
and 0.8 mg/l potassium tellurite (Sigma) (RBA-NT) as recommended
by the manufacturer for samples with high background flora; Rainbow®
Agar O157 supplemented with 5 mg/l novobiocin, 0.05 mg/l cefixime
trihydrate (Oxoid) and 0.15 mg/l potassium tellurite (RBA-USDA) as
recommended for the USDA STEC method MLG 5B.03 (USDA,
2012); CHROMagar STEC™ (CHROMagar Microbiology, Paris, France)
(CH STEC); Tryptone Bile agar (Oxoid, Basingstoke, Hampshire, UK)
containing 0.05 mg/l cefixime and 0.5 mg/l of potassium tellurite
(TBA-CT); Tryptone Bile agar containing 0.05 mg/l cefixime, 0.5 mg/l
of potassium tellurite, 0.4 g/l eosin Y (Sigma), 0.06 g/l methylene blue
(Fisher Scientific, Ottawa, Ontario) and 1 g/l lactose (TBA-EM); and
VTEC agar (Gill et al., 2012), 17.5 g/l vegetable special infusion powder
(Sigma), 2 g/l meat extract (Sigma), 10 g/l proteose peptone (Oxoid),
10 g/l D-sorbitol (Sigma), 5 g/l sodium chloride (Sigma), 2.5 g/l sodium
phosphate dibasic (Sigma), 30 mg/l neutral red (Sigma), 1 mg/l crystal
violet (Sigma), 1 g/l bile salts #3 and 15 g/l agar, supplemented with
10 mg/l vancomycin and 3 mg/l cefsulodin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. การกู้คืนของสายพันธุ์เอสบนอาหารที่เลือกอาณานิคมเดียวของสายพันธุ์แยก inoculated ใน 10 มล.ของน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic แก้ไข (mTSB: น้ำซุปถั่วเหลือง tryptic [30 บัญชี Difco],น้ำดีเกลือเลขที่ 3 [1.5 g/l Difco, BD], K2HPO4 [1.5 g/l ซิกม่า St. LouisMO], ค่า pH 7.4), เสริมกับ vancomycin 10 mg/l (Sigma) และcefsulodin 3 mg/l (ซิกมา) หลังจาก 4 ชั่วโมง (mTSB VC ซุป) ตามที่อธิบายไว้ในปลา et al. (2012), และได้รับการกก 18 – 24 h. ที่ 42 องศาเซลเซียสประเมินสื่อเลือกอาหารต่อไปนี้มีความสามารถเพื่อสนับสนุนการเติบโตของสายพันธุ์เอส MacConkey Agar (MAC Difco);Rainbow® Agar O157 (RBA Biolog Inc. เฮย์เวิร์ด แคลิฟอร์เนีย); Rainbow®O157 อาหารเสริม กับ novobiocin 10 mg/l (Sigma)และ 0.8 mg/l โพแทสเซียม tellurite (Sigma) (RBA-NT) แนะนำโดยผู้ผลิตสำหรับตัวอย่างพืชพื้นหลังสูง Rainbow®O157 อาหารเสริม ด้วย novobiocin 5 mg/l เซฟิกซิม 0.05 mg/ltrihydrate (Oxoid) และ tellurite โพแทสเซียม 0.15 mg/l (RBA USDA) เป็นแนะนำวิธีบำรุงเอส 5B.03 MLG (USDA2012); CHROMagar STEC™ (CHROMagar จุลชีววิทยา ปารีส ฝรั่งเศส)(CH เอส); น้ำดี Tryptone agar (Oxoid, Basingstoke แฮมไชร์ UK)เซฟิกซิม 0.05 mg/l และ 0.5 mg/l โพแทสเซียม tellurite(TBA-CT); น้ำดี Tryptone agar ที่ประกอบด้วยเซฟิกซิม 0.05 mg/l, 0.5 mg/lของโพแทสเซียม tellurite, 0.4 บัญชี eosin Y (Sigma), 0.06 แยกลีสีน้ำเงิน(Fisher วิทยาศาสตร์ ออตตาวา ออนตาริโอ) และแลคโตส 1 บัญชี (TBA-EM); และVTEC อาหาร (ปลาร้อยเอ็ด 2012), 17.5 แยกคอนกรีตพิเศษผักผง(Sigma), 2 แยกเนื้อแยก (Sigma), 10 บัญชี proteose peptone (Oxoid),10 บัญชี D-ซอร์บิทอล (Sigma), 5 แยกโซเดียมคลอไรด์ (Sigma), 2.5 แยกโซเดียมฟอสเฟต dibasic (Sigma), สีแดงกลาง 30 mg/l (Sigma), คริสตัล 1 mg/lม่วง (Sigma), เกลือน้ำดี 1 บัญชี #3 และ 15 บัญชี อาหาร เสริมด้วยcefsulodin vancomycin และ 3 mg/l 10 มิลลิกรัม/l

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การฟื้นตัวของสายพันธุ์ STEC ในการคัดเลือกวุ้น
อาณานิคมเดียวของสายพันธุ์ที่ได้รับเชื้อเป็นรายบุคคลเป็น 10 มล.
ของการแก้ไขน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (MTSB: น้ำซุปถั่วเหลือง tryptic [30 g / l; Difco]
. เกลือน้ำดีไม่มี 3 [1.5 g / l; Difco , BD] K2HPO4 [1.5 g / l; Sigma, เซนต์หลุยส์,
MO] ค่า pH 7.4) เสริมด้วย 10 mg / l vancomycin (ซิกม่า) และ
3 mg / l cefsulodin (ซิกม่า) หลังจาก 4 h (MTSB-VC น้ำซุป) ตามที่อธิบายใน
กิลล์, et al (2012) และบ่มเป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง ที่ 42 ° C.
ต่อไปนี้สื่อวุ้นเลือกได้รับการประเมินความสามารถใน
การรองรับการเติบโตของสายพันธุ์ STEC MacConkey วุ้น (MAC; Difco);
Rainbow®วุ้น O157 (RBA; Biolog อิงค์เฮย์เวิร์ดแคลิฟอร์เนีย); Rainbow®
วุ้น O157 เสริมกับ 10 mg / l Novobiocin (ซิกม่า)
และ 0.8 mg / l โพแทสเซียม tellurite (ซิกม่า) (RBA-NT) ตามคำแนะนำ
จากผู้ผลิตสำหรับกลุ่มตัวอย่างที่มีพืชพื้นหลังสูง Rainbow®
วุ้น O157 เสริมด้วย 5 mg / l Novobiocin, 0.05 mg / l เซฟิกซิม
trihydrate (Oxoid) และ 0.15 mg / l โพแทสเซียม tellurite (RBA-USDA) เป็น
ที่แนะนำสำหรับการกระทรวงเกษตรของสหรัฐอเมริกา STEC วิธี MLG 5B.03 (USDA,
2012); CHROMagar STEC ™ (CHROMagar วิทยา, Paris, ฝรั่งเศส)
(CH STEC); Tryptone น้ำดีวุ้น (Oxoid เบซิง, Hampshire, UK)
มี 0.05 มิลลิกรัม / ลิตรเซฟิกซิมและ 0.5 mg / l ของโพแทสเซียม tellurite
(TBA-CT); Tryptone น้ำดีวุ้นที่มี 0.05 มิลลิกรัม / ลิตรเซฟิกซิม, 0.5 mg / l
ของโพแทสเซียม tellurite 0.4 g / l Eosin Y (ซิกม่า) 0.06 กรัม / ลิตรเมทิลีนสีฟ้า
(Fisher Scientific, ออตตาวา) และ 1 กรัม / ลิตรแลคโตส (TBA -EM); และ
VTEC วุ้น (กิ et al., 2012) 17.5 กรัม / ลิตรแช่ผักผงพิเศษ
(ซิกม่า) 2 กรัม / ลิตรสารสกัดจากเนื้อสัตว์ (ซิกม่า), 10 g / l proteose เปปโตน (Oxoid)
10 g / l D- ซอร์บิทอ (ซิกม่า) 5 g / l โซเดียมคลอไรด์ (ซิกม่า) 2.5 g / l โซเดียม
ฟอสเฟต dibasic (ซิกม่า) 30 mg / l สีแดงที่เป็นกลาง (ซิกม่า) 1 mg / l คริสตัล
สีม่วง (ซิกม่า) 1 กรัม / ลิตร เกลือน้ำดี # 3 และ 15 g / l วุ้นเสริมด้วย
10 mg / l vancomycin และ 3 mg / l cefsulodin

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การกู้คืนของ STEC สายพันธุ์ที่เลือกวุ้นเดี่ยวอาณานิคมของสายพันธุ์จากเชื้อ 10 มล.น้ำซุปถั่วเหลืองดัดแปลงอาหาร ( mtsb : อาหารซุปถั่วเหลือง [ 30 g / l ; difco ]เกลือน้ำดี หมายเลข 3 [ 1.5 กรัม / ลิตร difco BD ] , k2hpo4 [ 1.5 กรัม / ลิตร ; Sigma , เซนต์ หลุยส์โม ] pH 7.4 ) เติมได้ 10 mg / l ( Sigma ) และ3 มก. / ล. เซฟซูโลดิน ( Sigma ) หลังจาก 4 H ( mtsb ซุป VC ) ตามที่อธิบายไว้ในกิลล์ et al . ( 2012 ) และบ่ม 18 – 24 ชั่วโมง ที่ 42 องศาต่อไปนี้การเลือกสื่อต่างๆ ได้รับการประเมินความสามารถเพื่อรองรับการเติบโตของ STEC สายพันธุ์ Lynx ( Mac difco )วุ้นสายรุ้ง®เป็นสมาชิก ( RBA ; biolog อิงค์ , เฮย์เวิร์ด , แคลิฟอร์เนีย ) ®สายรุ้งวุ้นเป็นสมาชิกเสริม กับ 10 mg / l ( Sigma ) โนโวไบโอซินและ 0.8 มิลลิกรัมต่อลิตรโพแทสเซียม tellurite ( ซิกม่า ) ( rba-nt ) ตามที่แนะนำโดยผู้ผลิตสำหรับตัวอย่างที่มีพื้นหลังสีรุ้ง®พืชสูงวุ้นเป็นสมาชิกเสริม 5 มก. / ล. โนโวไบโอซิน 0.05 มก. / ล. แรงยกตัวต่างๆ ( oxoid ) และ 0.15 mg / l ( โพแทสเซียม tellurite rba-usda ) เป็นแนะนำสำหรับ USDA คาดว่าวิธี mlg 5b.03 ( USDA ,2012 ) ; chromagar STEC ™ ( chromagar จุลชีววิทยา , ปารีส , ฝรั่งเศส )( ตอนที่ 37 ) ; ทริพโทนน้ำดี ( oxoid Basingstoke Hampshire , UK )ที่ 0.05 มก. / ล. แรงยกตัวและ 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร tellurite โพแทสเซียม( tba-ct ) ; ทริพโทนน้ำดีวุ้นที่ 0.05 มก. / ล. แรงยกตัว , 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตรโพแทสเซียม tellurite 0.4 กรัม / ลิตร eosin y ( Sigma ) 0.06 กรัม / ลิตรสีฟ้า( ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ , ออตตาวา , Ontario ) และ 1 กรัมต่อลิตร แลคโตส ( tba-em ) ; และวีเทค ( เหงือก et al . , 2012 ) , 17.5 กรัม / ลิตร แช่ผัก ผงพิเศษ( Sigma ) 2 กรัมต่อลิตรและสารสกัดจากเนื้อ ( Sigma ) 10 กรัมต่อลิตรโปรตีนโอสเปปโตน ( oxoid )10 กรัม / ลิตร d-sorbitol ( Sigma ) 5 กรัมต่อลิตรโซเดียมคลอไรด์ ( Sigma ) 2.5 กรัม / ลิตรโซเดียมฟอสเฟต dibasic ( Sigma ) 30 มก. / ล. ที่เป็นกลางสีแดง ( Sigma ) 1 มิลลิกรัมต่อลิตร คริสตัลม่วง ( Sigma ) 1 กรัมต่อลิตร เกลือน้ำดี # 3 และ 15 กรัม / ลิตร เติมวุ้น10 มก. / ล. ได้และ 3 มก. / ล. กลอนด้น .