Western blot analysis of microneme

Western blot analysis of microneme protein binding to HFF cells. Microneme proteins were added to HFF cells at 128C for 1h. Proteins remaining in the supernatant (SUP) were removed, and the monolayers were washed (W1 and W4 correspond to the ®rst and fourth washes respectively). MIC2 bound to HFF cells and was recovered in the cell-bound fraction (CBF) from the puri®ed microneme preparation (microneme prep.) but not from ESA (excretory secretory antigens). In contrast, the dense granule protein GRA1 did not bind to HFF cells, as shown by its absence in the CBF fractions. Dilution standards representing 1%, 5% and 10% of the ESA input material were loaded in parallel (input). Loading of the CBF lane represents 20% of the total recovered material. Blots were probed with a mixture of monoclonal antibody Tg17-43 to detect GRA1 and monoclonal antibody 6D10 to detect MIC2, followed by secondary antibodies conjugated to HRP.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตะวันตกทำลายของ microneme โปรตีนรวมเซลล์ HFF มีเพิ่มโปรตีน Microneme HFF เซลล์ที่ C 128 สำหรับ 1h ออกโปรตีนที่เหลืออยู่ใน supernatant (ดื่ม) และ monolayers ถูกล้าง (W1 และ W4 สอดคล้องกับ ® rst และสี่ต่อผิวหน้าตามลำดับ) MIC2 กับ HFF เซลล์ และถูกกู้คืนในเศษเซลล์ที่ถูกผูกไว้ (CBF) จากปู ® ed microneme เตรียม (microneme เตรียมอาหาร) แต่ไม่ใช่ จากประเทศ (ขับถ่าย secretory antigens) ตรงกันข้าม โปรตีนเม็ดหนาแน่น GRA1 ได้ไม่ผูกกับเซลล์ HFF เป็นที่แสดงของการขาดงานแบบแยกส่วน CBF มาตรฐานเจือจางแทน 1%, 5% และ 10% ของวัสดุที่นำเข้าประเทศถูกโหลดพร้อมกัน (ป้อนข้อมูล) โหลดแบบ CBF เลนแทน 20% คืนวัสดุรวม มีพิสูจน์กันบล็อทสง monoclonal antibody Tg17-43 การตรวจ GRA1 และแอนติบอดี monoclonal 6D 10 สืบ MIC2 ตามแอนตี้รองกลวงการ HRP

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์ดวงตะวันของโปรตีน microneme ผูกพันกับเซลล์ HFF โปรตีน Microneme ถูกเพิ่มเข้าไปในเซลล์ HFF ที่ 128C สำหรับ 1 ชั่วโมง โปรตีนที่เหลืออยู่ในใส (SUP) ถูกถอดออกและ monolayers ถูกล้าง (W1 และ W4 สอดคล้องกับการล้าง®rstและสี่ตามลำดับ) MIC2 ผูกไว้กับเซลล์ HFF และได้รับการกู้คืนในส่วนของเซลล์ที่ถูกผูกไว้ (CBF) จากการเตรียมpuri®ed microneme (การเตรียม microneme.) แต่ไม่ได้มาจากอีเอสเอ (แอนติเจนหลั่งขับถ่าย) ในทางตรงกันข้าม GRA1 โปรตีนเม็ดหนาแน่นไม่ได้ผูกกับเซลล์ HFF ที่แสดงโดยไม่มีตัวตนในเศษส่วน CBF มาตรฐาน Dilution ตัวแทน 1%, 5% และ 10% ของวัตถุดิบนำเข้าอีเอสเอถูกโหลดในแบบคู่ขนาน (เข้า) โหลดเลน CBF แสดงให้เห็นถึง 20% ของยอดรวมการกู้คืนวัสดุ blots ถูกตรวจสอบที่มีส่วนผสมของแอนติบอดี Tg17-43 ในการตรวจสอบและ GRA1 แอนติบอดี 6D10 ในการตรวจสอบ MIC2 ตามด้วยแอนติบอดี้ที่สองที่จะผัน HRP

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ Western blot ของ microneme โปรตีนเพื่อ hff เซลล์ โปรตีน microneme ถูกเพิ่มไปยังเซลล์ที่ hff 128c สำหรับ 1 . โปรตีน ที่เหลือในน่าน ( sup ) ถูกถอดออก และ monolayers ถูกล้าง ( W1 W4 สอดคล้องกับ®และ RST และล้างที่สี่ตามลำดับ )mic2 ผูก hff เซลล์และถูกพบในเซลล์ผูกพันเศษส่วน ( มูลนิธิสายธารพระพร ) จากปุริ®เอ็ด microneme เตรียมตัว ( เตรียม microneme ) แต่ไม่ใช่จาก ESA ( ระบบขับถ่ายพบแอนติเจน ) ในทางตรงกันข้าม จะมีเม็ดโปรตีน gra1 ไม่ได้ผูกกับ hff เซลล์ ดังจะเห็นได้จากการขาดของ บริษัท ในมูลนิธิสายธารพระพร เศษส่วน มาตรฐานการคิด 1 %5% และ 10% ของ ESA ใส่วัสดุถูกโหลดในแบบคู่ขนาน ( นำเข้า ) โหลดของมูลนิธิสายธารพระพร เลนเป็น 20 % ของทั้งหมดกู้คืนวัสดุ ไม้ถูกตรวจสอบส่วนผสมของโมโนโคลนอลแอนติบอดีเพื่อตรวจหาและ tg17-43 gra1 โมโนโคลนอลแอนติบอดี 6d10 เพื่อตรวจหาแอนติบอดี mic2 ตามระดับและเพื่อช .