Measurement of the cell viabilityEf

Measurement of the cell viability
Effect of extracts/compounds on cell viability was carried out in
peritoneal macrophage cells using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-
2,5-diphenyltetrazolium (MTT) assay (Sharma et al., 2012). Peritoneal
macrophage cells (0.5  106 cells/well) isolated from mice
were suspended in RPMI 1640 medium (Sigma, USA) containing
10% heat-inactivated fetal bovine serum (Gibco, USA) and incubated
in a culture 96 well plate at 37 C in 5% CO2 in an incubator
and left overnight to attach. Cells treated with 1% DMSO served as
a vehicle control for cell cytotoxicity study. Compounds were dissolved
in DMSO. Cells were treated (110 lg/mL and 10 lg/mL) and
incubated for 24 h at 37 C in 5% CO2. After incubation, cells with
treatment, 20 lL aliquots of MTT solution (5 mg/mL in PBS) were
added to each well and left for 4 h. Then, the MTT containing medium
was carefully removed and the cells were solubilised in DMSO
(100 lL) for 10 min. The culture plate was placed on a micro-plate
reader (Spectramax; Molecular Devices, USA) and the absorbance
was measured at 550 nm. The amount of colour produced is directly
proportional to the number of viable cells. Cell cytotoxicity
was calculated as the percentage of MTT absorption as follows:
Percentage (%) of survival = (mean experimental absorbance/mean
control absorbance  100).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัดชีวิตเซลล์
ผลของสารสกัด/สารเซลล์ชีวิตถูกดำเนินใน
เซลล์ peritoneal macrophage ใช้วิเคราะห์ (MTT) 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-
2,5-diphenyltetrazolium (Sharma et al., 2012) Peritoneal
เซลล์ macrophage (เซลล์ 0.5 106 ดี) แยกต่างหากจากหนู
ถูกหยุดชั่วคราวใน RPMI 1640 ปานกลาง (ซิก สหรัฐอเมริกา) ประกอบด้วย
10% ยกเลิกร้อนครรภ์วัวซีรั่ม (Gibco สหรัฐอเมริกา) และ incubated
ในวัฒนธรรม 96 ดีแผ่นที่ 37 C 5% CO2 ในการบ่มเพาะวิสาหกิจ
และค้างคืนที่แนบ เซลล์รักษา ด้วย 1% DMSO เสิร์ฟ
ควบคุมรถศึกษา cytotoxicity เซลล์ สารประกอบมีส่วนยุบ
ใน DMSO เซลล์ได้รับการรักษา (lg 110 มล.และ lg 10 mL) และ
incubated ใน 24 ชมที่ 37 C 5% CO2 หลังจากบ่ม เซลล์ด้วย
รักษา 20 จะ aliquots ของ MTT (5 mg/mL ใน PBS) ถูก
เพิ่มในแต่ละดี และซ้ายสำหรับ 4 h แล้ว MTT ประกอบด้วยสื่อ
อย่างถูกเอาออก และเซลล์ถูก solubilised ใน
(100 lL) DMSO ใน 10 นาที วัฒนธรรมจานวางอยู่บนแผ่นไมโคร
อ่าน (Spectramax อุปกรณ์โมเลกุล สหรัฐอเมริกา) และ absorbance ที่
ถูกวัดที่ 550 nm จำนวนสีที่ผลิตโดยตรงเป็น
สัดส่วนกับจำนวนของเซลล์ทำงานได้ เซลล์ cytotoxicity
ถูกคำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์ของการดูดซึมของ MTT ดัง:
เปอร์เซ็นต์ (%) ของการอยู่รอด = (หมายถึง ช่วงทดลอง absorbance
ควบคุม absorbance 100)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวัดความมีชีวิตเซลล์
ผลของสารสกัด / สารในเซลล์ที่มีชีวิตได้รับการดำเนินการใน
เซลล์ macrophage ทางช่องท้องโดยใช้ 3 - (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -
. 2,5-diphenyltetrazolium (MTT) ทดสอบ (ชาร์ตอัล, 2012) ทางช่องท้อง
เซลล์ macrophage (0.5? 106 เซลล์ / ดี) ที่แยกได้จากหนู
ที่ถูกระงับใน RPMI 1640 กลาง (Sigma, USA) ที่มี
10% ความร้อนใช้งานในซีรั่มของทารกในครรภ์วัว (Gibco, สหรัฐอเมริกา) และบ่ม
ในวัฒนธรรมที่ 96 แผ่นดีที่ 37? C ใน 5% CO2 ในตู้อบ
และทิ้งค้างคืนที่จะแนบ เซลล์ที่รับการรักษาด้วย 1% DMSO ทำหน้าที่เป็นผู้
ควบคุมยานพาหนะสำหรับการศึกษาความเป็นพิษของเซลล์ สารที่ละลายได้
ใน DMSO เซลล์ที่ได้รับการรักษา (110 แอลจี / มิลลิลิตรและ 10 แอลจี / มิลลิลิตร) และ
บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียสใน 5% CO2 หลังจากการบ่มเซลล์ที่มี
การรักษา, 20 aliquots lL ของการแก้ปัญหา MTT (5 mg / ml ในพีบีเอส) มี
การเพิ่มในแต่ละดีและที่เหลือเป็นเวลา 4 ชั่วโมง จากนั้น MTT ที่มีขนาด
ถูกลบออกอย่างระมัดระวังและเซลล์ถูก solubilised ใน DMSO
(100 LL) เป็นเวลา 10 นาที จานวัฒนธรรมถูกวางลงบนแผ่นไมโคร
จำนวนผู้อ่าน (Spectramax; อุปกรณ์โมเลกุล, สหรัฐอเมริกา) และการดูดกลืนแสง
ได้รับการวัดที่ 550 นาโนเมตร ปริมาณของสีที่ผลิตโดยตรง
สัดส่วนกับจำนวนของเซลล์ที่ทำงานได้ พิษเซลล์
ที่คำนวณได้เป็นร้อยละของการดูดซึม MTT ดังนี้
ร้อยละ (%) ของการอยู่รอด = (หมายถึงการดูดกลืนแสงทดลอง / หมายถึง
การดูดกลืนแสงควบคุม 100?)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ของการวัดผลของสารสกัดเซลล์สารประกอบในเซลล์ข้อมูลในเซลล์แมคโครฟาจก
ใช้ 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) -
2,5-diphenyltetrazolium ( MTT ) assay ( Sharma et al . , 2012 ) เยื่อบุช่องท้องอักเสบ
แมโครเฟจเซลล์ ( 0.5  106 เซลล์ / ดี ) ที่แยกจากหนู
หยุดชั่วคราวใน RPMI 1640 ขนาดกลาง ( Sigma , USA ) ประกอบด้วย
10% ซึ่งครรภ์วัว เซรั่ม ( gibco ความร้อน ,สหรัฐอเมริกา ) และบ่ม
ในวัฒนธรรม 96 ดีจานที่ 37  C 5% CO2 ในตู้อบ
แล้วค้างคืนที่แนบ เซลล์ที่ได้รับ DMSO 1% ให้
รถควบคุมเซลล์มะเร็งที่ศึกษา สารที่ละลายใน DMSO
. เซลล์จะถูก ( 110 ) / ml และ 10 LG / มิลลิลิตร )
) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ใน  คาร์บอนไดออกไซด์ 5% หลังจากบ่มเซลล์กับ
รักษา20 จะเฉยๆของ MTT โซลูชั่น ( 5 mg / ml ใน PBS )
เพิ่มแต่ละอย่างดีและทิ้งไว้ 4 ชั่วโมง แล้ว ยาที่มีขนาดกลาง
ถูกลบออกอย่างระมัดระวังและเซลล์มี solubilised ใน DMSO
( 100 จะ ) นาน 10 นาที วัฒนธรรมจานถูกวางลงบนเครื่องอ่านแผ่นไมโคร ( spectramax
; อุปกรณ์โมเลกุล , สหรัฐอเมริกา ) และทำการวัดค่าการดูดกลืนแสง
550 นาโนเมตร ปริมาณของสีที่ผลิตโดยตรง
ได้สัดส่วนกับจำนวนของใช้เซลล์ เซลล์มะเร็ง
คำนวณเป็นร้อยละของการดูดซึมยาได้ดังนี้
ค่าร้อยละ ( % ) = ( หมายถึงการอยู่รอดของทดลองการดูดกลืนแสง / หมายถึง
ค่าควบคุม  100 )