2.5. Water potential measurements a

2.5. Water potential measurements and image analysis of
protoplasts
To perform the water permeability measurements, the DMF
bottom plate was encased in the chip holder for electrical connections
and a droplet of 4.5 L containing MMP-bound protoplasts
(−1.6 MPa, corresponding to the intrinsic osmotic pressure) was
manually dispensed on the bottom plate above the electrode
containing a visualization window. A second droplet containing
ultrapure water (3.2 or 6.5 L for a resulting osmotic pressure
change of −0.99 or −0.70 MPa, respectively) was also dispensed
on another electrode of the bottom plate. The top plate was
then placed on top of the bottom plate in the DMF holder
and a magnetic field was applied through an external magnet
(NeFeB, 5 mm diameter, 3 mm thickness, 6.86 N, Super magnete,
Germany) placed above the top plate and resulting in immobilization
of the magnetic particle-conjugated protoplasts (Fig. 1(d)).
Next, the hypo-osmotic droplet consisting of water was actuated
and merged with the protoplasts droplet and the subsequent
change in volume of the cells was recorded via the microscope
mounted camera (respectively CKX41-Olympus, Japan and VX-
5500-Microsoft, US). By means of DMF manipulations, an average
of 7 protoplasts were treated and analyzed in every field of
view.
Recorded movies were processed using one frame per second
with every protoplast serially a using a freeware image analysis
program (ImageJ, US National Institutes of Health, Bethesda, Maryland,
USA). For calculating the cell volume,the protoplast shape was
assumed to be a prolate spheroid [28] rather than a perfect sphere
as it was observed that during the hypo-osmotic treatment protoplasts
did not always maintain a perfectly spherical shape but often
grew in size in an ellipsoid way. By drawing an ellipse around individual
protoplasts, the volumes (1/6 D1 D2
2) at the different time
points were calculated by the measured major (D1) and minor axis
(D2) of the fitted ellipse.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. การวัดและวิเคราะห์ภาพของน้ำพลาสต์การวัดค่าการซึมผ่านน้ำ DMFแผ่นด้านล่างถูกมาพร้อมโดดเด่นใส่ชิสำหรับการเชื่อมต่อไฟฟ้าและหยดของ 4.5 L ประกอบด้วยพลาสต์ MMP ขอบถูก (−1.6 MPa ที่สอดคล้องกับแรงดันออสโมติกภาย)จ่ายด้วยตนเองในแผ่นด้านล่างด้านบนอิเล็กโทรดประกอบด้วยหน้าต่างแสดงภาพประกอบเพลง การที่ประกอบด้วยสองหยดน้ำบริสุทธิ์พิเศษ (3.2 หรือ 6.5 L สำหรับความดันออสโมติกได้เปลี่ยนแปลงของ −0.99 หรือ −0.70 MPa ตามลำดับ) ยังมีจ่ายบนอิเล็กโทรดอีกแผ่นด้านล่าง เป็นแผ่นด้านบนวางบนแผ่นด้านล่างในยึด DMFและใช้สนามแม่เหล็ก โดยมีแม่เหล็กภายนอก(NeFeB เส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มม. ความหนา 3 มม. 6.86 N, magnete ซูเปอร์เยอรมนี) อยู่ข้างบนแผ่นและส่งผลให้ตรึงของพลาสต์รวมกันอนุภาคแม่เหล็ก (รูป 1(d))ถัดไป หยดน้ำมินิที่ประกอบด้วยน้ำถูกแรงและผสานกับหยดพลาสต์และซึ่งต่อมาบันทึกการเปลี่ยนแปลงในระดับเซลล์ ด้วยกล้องจุลทรรศน์ติดตั้งกล้อง (ตามลำดับ Olympus CKX41 ญี่ปุ่น และ VX-5500-Microsoft สหรัฐอเมริกา) โดยการตกแต่ง DMF เฉลี่ย7 พลาสต์รักษา และวิเคราะห์ในทุกดูภาพยนตร์ที่บันทึกไว้ถูกประมวลผลโดยใช้เฟรมต่อวินาทีกับทุก protoplast serially ได้โดยใช้การวิเคราะห์ภาพฟรีแวร์โปรแกรม (ImageJ เรา สุขภาพแห่งชาติสถาบัน Bethesda แมรี่แลนด์สหรัฐอเมริกา) สำหรับการคำนวณปริมาณเซลล์ รูปร่าง protoplast ถูกสันนิษฐานเป็นทรงคล้ายทรงกลมแบนข้างมี [28] มากกว่าทรงกลมสมบูรณ์แบบมันถูกตรวจสอบที่ระหว่างพลาสต์อย.น้ำรักษาไม่ได้จะรักษารูปทรงกลมอย่างสมบูรณ์แต่มักจะเติบโตในขนาดในทางทรงรี โดยการวาดวงรีรอบละพลาสต์ ไดรฟ์ (1/6 D1 D22) ในเวลาแตกต่างกันคำนวณคะแนน โดยวัดใหญ่ (D1) และแกนรอง(D2) ของวงรีพอดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 น้ำวัดที่มีศักยภาพและการวิเคราะห์ภาพของ
โปรโตพลา
เพื่อดำเนินการตรวจวัดการซึมผ่านของน้ำที่กรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ
แผ่นด้านล่างถูกห่อหุ้มอยู่ในฐานะผู้ถือชิปสำหรับการเชื่อมต่อไฟฟ้า
และหยด 4.5 ลิตรที่มีโปรโตพลา MMP-ผูกพัน
(-1.6 MPa ซึ่งสอดคล้องกับแรงดันที่แท้จริง ) คือการ
จ่ายด้วยตนเองบนแผ่นล่างสุดเหนือขั้วไฟฟ้า
ที่มีหน้าต่างแสดงภาพ หยดที่สองที่มี
น้ำบริสุทธิ์ (3.2 หรือ 6.5 ลิตรส่งผลให้ความดันออสโมติก
เปลี่ยนแปลง -0.99 -0.70 หรือ MPa ตามลำดับ) นอกจากนี้ยังได้รับการยกเว้น
ในขั้วไฟฟ้าของแผ่นด้านล่างอีก แผ่นด้านบนถูก
วางไว้ที่ด้านบนของแผ่นด้านล่างในฐานะผู้ถือ DMF
และสนามแม่เหล็กที่ถูกนำมาใช้ผ่านแม่เหล็กภายนอก
(NeFeB 5 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางหนา 3 มม 6.86 N, ซูเปอร์ Magnete,
เยอรมนี) วางไว้ข้างต้นแผ่นด้านบน และส่งผลให้ในการตรึง
ของแม่เหล็กโปรโตพลาอนุภาคผัน (รูปที่ 1. (D)).
ถัดไปหยดสำหรับผู้ที่เป็นออสโมติกประกอบด้วยน้ำกระตุ้น
และกลมกลืนไปกับโปรโตพลาหยดและต่อมา
มีการเปลี่ยนแปลงในปริมาณของเซลล์ได้รับการบันทึกผ่าน กล้องจุลทรรศน์
กล้องติด (ตามลำดับ CKX41-Olympus, ญี่ปุ่นและ VX-
5500 ไมโครซอฟท์, สหรัฐ) โดยวิธีการของกิจวัตร DMF เฉลี่ย
7 โปรโตพลาได้รับการรักษาและวิเคราะห์ในด้านของทุก
มุมมอง.
ภาพเคลื่อนไหวที่บันทึกได้รับการประมวลผลโดยใช้หนึ่งเฟรมต่อวินาที
ทุกโปรโตพลาลำดับโดยใช้การวิเคราะห์ภาพฟรีแวร์
โปรแกรม (ImageJ, สหรัฐสถาบันสุขภาพแห่งชาติ Bethesda, Maryland,
USA) สำหรับการคำนวณปริมาณเซลล์รูปร่างโปรโตพลาถูก
ถือว่าเป็นลูกกลม prolate [28] แทนที่จะเป็นทรงกลมสมบูรณ์แบบ
ขณะที่มันถูกตั้งข้อสังเกตว่าในช่วงสำหรับผู้ที่เป็นออสโมติกโปรโตพลาการรักษา
ไม่ได้เสมอรักษารูปทรงกลมอย่างสมบูรณ์แบบ แต่มักจะ
เติบโตขึ้นในขนาด เป็นวิธีที่ทรงรี โดยการวาดรูปวงรีรอบแต่ละ
โปรโตพลา, ปริมาณ (1/6? D1 D2
2) ในเวลาที่แตกต่างกัน
จุดนี้จะถูกคำนวณโดยหลัก (D1) และรองแกนวัด
(D2) ของวงรีติดตั้ง