The bacterial strains selected for this study are listed in Table 1. All strains were grown
anaerobically in a plant protein medium (PPM), which is the same as the low-nitrogen (N)
medium of Hazlewood and Nugent (1978), except that it contains soluble plant protein
extract from white clover (1.7 mg total N/ml) as the sole N source. The concentration of
total soluble protein in the extract was determined using the method described by Bradford
(1976). The preparation, distribution and inoculation of PPM was carried out under a stream
of CO2 or in an anaerobic hood with a 95% CO2/5% H2 atmosphere (Coy Laboratory
Products Inc., Grass Lake, MI). Total soluble plant protein was extracted from fresh white
clover forage by blending 100 g of plant material in 300 ml artificial saliva (AS; pH 6.8;
McDougall, 1948), and squeezing the extract through 4 layers of cheesecloth. The filtrate
was collected and centrifuged at 17,000×g for 20 min at 5 ◦C and the supernatant fraction
was filter-sterilized by passing through a 0.22 m filter. Dithiothreitol, glucose, cellobiose,
NaHCO3, and vitamins were prepared anaerobically and filter-sterilized before addition to
the autoclaved medium (Attwood and Reilly, 1995). CT and polyethylene glycol (PEG;
MW 3500) were prepared as concentrated stock solutions using anaerobic distilled water
and filter sterilized under anaerobic conditions
The bacterial strains selected for this study are listed in Table 1. All strains were grownanaerobically in a plant protein medium (PPM), which is the same as the low-nitrogen (N)medium of Hazlewood and Nugent (1978), except that it contains soluble plant proteinextract from white clover (1.7 mg total N/ml) as the sole N source. The concentration oftotal soluble protein in the extract was determined using the method described by Bradford(1976). The preparation, distribution and inoculation of PPM was carried out under a streamof CO2 or in an anaerobic hood with a 95% CO2/5% H2 atmosphere (Coy LaboratoryProducts Inc., Grass Lake, MI). Total soluble plant protein was extracted from fresh whiteclover forage by blending 100 g of plant material in 300 ml artificial saliva (AS; pH 6.8;McDougall, 1948), and squeezing the extract through 4 layers of cheesecloth. The filtratewas collected and centrifuged at 17,000×g for 20 min at 5 ◦C and the supernatant fractionwas filter-sterilized by passing through a 0.22 m filter. Dithiothreitol, glucose, cellobiose,NaHCO3, and vitamins were prepared anaerobically and filter-sterilized before addition tothe autoclaved medium (Attwood and Reilly, 1995). CT and polyethylene glycol (PEG;MW 3500) were prepared as concentrated stock solutions using anaerobic distilled waterand filter sterilized under anaerobic conditions
การแปล กรุณารอสักครู่..
เชื้อแบคทีเรียสายพันธุ์ที่ศึกษาอยู่ใน ตารางที่ 1 ทุกสายพันธุ์ ปลูก
พในโปรตีนจากพืชขนาดกลาง ( ppm ) ซึ่งเป็นเช่นเดียวกับไนโตรเจนต่ำ ( n )
( และของเฮเซิลวูด นูเจนท์ ( 1978 ) , ยกเว้นว่ามีปริมาณโปรตีนสารสกัดจากพืช
ปกขาว ( 1.7 มิลลิกรัมไนโตรเจน / ml ) เป็น แต่เพียงผู้เดียว - แหล่งที่มา ความเข้มข้นของ
ปริมาณโปรตีนที่ละลายในน้ำในการแยกวิเคราะห์โดยใช้วิธีการที่อธิบายโดย Bradford
( 1976 ) การเตรียม การกระจาย และการฉีดวัคซีนของ ppm พบว่าภายใต้กระแส
CO2 หรือในเครื่องดูดควัน ถังกับ 95% CO2 / 5 % H2 ( อายบรรยากาศห้องปฏิบัติการ
ผลิตภัณฑ์อิงค์ , ทะเลสาบ , หญ้ามิ ) โปรตีนที่สกัดจากพืชรวม
สีขาวสดแฉก พืชอาหารสัตว์ โดยการผสม 100 กรัมของวัสดุพืชในน้ำลายเทียม 300 มิลลิลิตร ( ; พีเอช 6.8 ;
แม็คดูกัล , 1948 ) และบีบแยกผ่าน 4 ชั้นของผ้า . 148
รวบรวมและระดับที่ 17000 × G สำหรับ 20 นาทีที่ 5 ◦ C
ส่วนสูงคือกรองฆ่าเชื้อโดยผ่าน 0.22 M ตัวกรอง บัตรแข็ง กลูโคส โซเดียมไบคาร์บอเนตที่
, ,และวิตามินเตรียมพ และกรองฆ่าเชื้อก่อน
) และสังเคราะห์ ( แอ็ตวู๊ด และ ไรลี่ย์ , 1995 ) CT และ polyethylene glycol ( PEG ;
( 3500 ) เตรียมความเข้มข้นหุ้นโซลูชันที่ใช้ไร้น้ำกลั่นฆ่าเชื้อภายใต้สภาวะไร้อากาศ
และกรอง
การแปล กรุณารอสักครู่..