2.7. Effect of bacterial inoculatio

2.7. Effect of bacterial inoculation and Phi treatment against
charcoal root rot under greenhouse conditions
Inoculum of M. phaseolina was prepared in laboratory by multiplying
the pathogen on rice (Oryza sativa). The rice grains (250 g)
were soaked in distilled water overnight in autoclavable bags. Then
they were autoclaved twice (121 ◦C for 30 min) and inoculated with
five agar plugs (6 mm diameter) cut from the margin of an actively
growing pathogen colony. The bags were incubated at 28 ◦C in the
dark for 2–3 weeks and shaken daily. Rice seeds containing mycelial
fragments plus sclerotia served as inoculum. A mix (3:1 v/v) of
tyndallised nursery substrate (Grow Mix, Multipro, Terrafertil S.A.,
Buenos Aires, Argentina) and sand was placed in 8.5 × 7 cm plastic
pots. A layer of infested rice seeds (12 g per pot) was distributed
in half of the experimental pots and covered with 2 cm of the
same substrate. Soybean seeds inoculated with bacterial strain 9 or
54 and subsequently treated with MnPhi, as previously described,
were planted and maintained in the greenhouse (25 ± 5 ◦C) for 45
days. Each treatment was run with six replications in a completely
randomised design and the experiment was repeated two times.
An experimental unit was one soybean plant per pot. Thus, the
disease severity was evaluated in the plants from seeds subjected
to the same six treatments as previously described in Section 2.5.
The correlation between disease severity and CFU was confirmed
in previous studies (Mengistu et al. 2007), so CFU in soybean root was used as a measure of disease severity. At the plant growth
stage of R1, plants were carefully uprooted to determine CFU of the
pathogen. The roots were dried at 40 ◦C and ground with a sample
mill. For each sample, 5 mg of ground tissue was placed in a
centrifuge tube with 1 ml of sodium hypochlorite (2%) for 3 min,
subsequently washed with sterile distilled water and then added
to 20 ml of autoclaved PDA amended with rifampicin (100 mg L−1)
and metalaxyl (224 mg L−1). After 3 days of incubation at 28 ◦C, M.
phaseolina CFUs were counted and converted to CFU per gram of
root. Severity Control was estimated as [(Mean of CFU/g root in
untreated control)-(Mean of CFU/g root in treated plants)]/(Mean
of CFU/g root in untreated control) × 100

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7. ผลของแบคทีเรีย inoculation และพีพีรักษากับรากถ่าน rot สภาวะเรือนกระจกInoculum phaseolina เมตรถูกเตรียมในห้องปฏิบัติการ โดยการคูณศึกษาในข้าว (Oryza ซา) ธัญพืชข้าว (250 กรัม)ถูกนำไปแช่ในน้ำกลั่นค้างคืนในถุง autoclavable แล้วพวก autoclaved สอง (121 ◦C ใน 30 นาที) และ inoculated ด้วย5 ปลั๊ก agar (เส้นผ่าศูนย์กลาง 6 มิลลิเมตร) ตัดจากขอบของตัวอย่างอาณานิคมการศึกษาการเติบโต กระเป๋าถูก incubated ที่ ◦C 28 ในเข้ม 2-3 สัปดาห์ และเขย่าทุกวัน เมล็ดข้าวที่ประกอบด้วย mycelialบางส่วนของบวก sclerotia ผู้ทรง inoculum ผสม (3:1 v/v)พื้นผิวของสถานรับเลี้ยงเด็ก tyndallised (เติบโตผสม Multipro, Terrafertil S.A.บัวโนสไอเรส อาร์เจนตินา) และทรายที่อยู่ใน 8.5 × 7 ซม.พลาสติกหม้อ มีการกระจายชั้นของเมล็ดข้าวรบกวน (12 กรัมต่อกระถาง)ครึ่งหนึ่งของกระถางทดลองกับ 2 ซม.ของพื้นผิวเดียวกัน เมล็ดถั่วเหลือง inoculated กับแบคทีเรียต้องใช้ 9 หรือ54 และบำบัดต่อ ด้วย MnPhi อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ว่าปลูก และเก็บรักษาไว้ในเรือนกระจก (25 ± 5 ◦C) สำหรับ 45วันนั้น รันกับระยะหกในแต่ละทรีทเม้นต์สมบูรณ์ออกแบบ randomised และทดลองได้ซ้ำสองครั้งหน่วยทดลองมีพืชถั่วเหลืองหนึ่งต่อหม้อ ดังนั้น การมีประเมินความรุนแรงของโรคในพืชจากเมล็ดที่อยู่ภายใต้ไปที่เดียว 6 รักษาก่อนหน้านี้ที่ อธิบายไว้ในส่วน 2.5ได้รับการยืนยันความสัมพันธ์ระหว่างความรุนแรงของโรคและ CFUในการศึกษาก่อนหน้า (Mengistu et al. 2007), ดังนั้น CFU ในรากถั่วเหลืองใช้เป็นการวัดความรุนแรงของโรค ในการเจริญเติบโตของพืชขั้นตอนของ R1 พืชได้อย่าง uprooted เพื่อกำหนด CFU ของการศึกษา รากแห้งที่ 40 ◦C และดินกับตัวอย่างมิลล์สำหรับแต่ละตัวอย่าง เนื้อเยื่อพื้น 5 มก.ถูกวางไว้ในเครื่องหมุนเหวี่ยงท่อ มี 1 ml ของฟอก (2%) ในนาทีที่ 3ต่อมาล้าง ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ และเพิ่มการ 20 ml ของ autoclaved PDA แก้ไข ด้วย rifampicin (100 mg L−1)และ metalaxyl (224 มิลลิกรัม L−1) หลังจากบ่มที่ 28 ◦C, M 3 วันphaseolina CFUs นับ และแปลงเป็น CFU ต่อกรัมของราก ควบคุมความรุนแรงได้ประมาณเป็น [(ค่าเฉลี่ยของราก CFU/g ในuntreated control)- (หมายความว่าราก CFU/g ในพืชบำบัด)] / (หมายความว่าของราก CFU/g ในตัวควบคุมที่ไม่ถูกรักษา) × 100

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 ผลของการฉีดวัคซีนและการรักษาแบคทีเรียพีกับโรครากเน่าถ่านเรือนกระจกภายใต้เงื่อนไขที่กล้าเชื้อเอ็มphaseolina ถูกจัดทำขึ้นในห้องปฏิบัติการโดยการคูณเชื้อโรคในข้าว(Oryza sativa) เมล็ดข้าว (250 กรัม) ถูกแช่ในน้ำกลั่นในชั่วข้ามคืนในถุงหม้อนึ่งฆ่าเชื้อ จากนั้นพวกเขาได้รับเบาสองครั้ง (121 ◦Cเป็นเวลา 30 นาที) และเชื้อด้วยห้าปลั๊กวุ้น(6 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง) ตัดมาจากอัตรากำไรขั้นต้นของแข็งขันอาณานิคมเชื้อโรคเจริญเติบโต ถุงถูกบ่มที่ 28 ◦Cในที่มืด2-3 สัปดาห์และเขย่าทุกวัน เมล็ดข้าวที่มีเส้นใยเศษบวก sclerotia ทำหน้าที่เป็นหัวเชื้อ ผสม (3: 1 v / v) ของสารตั้งต้นที่สถานรับเลี้ยงเด็ก tyndallised (Grow Mix, Multipro, Terrafertil SA, บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินา) และหาดทรายถูกวางไว้ใน 8.5 × 7 ซมพลาสติกกระถาง ชั้นของเมล็ดข้าวเหม็น (12 กรัมต่อหม้อ) จัดจำหน่ายในครึ่งหนึ่งของกระถางทดลองและปกคลุมไปด้วย2 ซมของพื้นผิวเดียวกัน เมล็ดถั่วเหลืองสายพันธุ์กับเชื้อแบคทีเรียที่ 9 หรือ54 และรับการรักษาต่อมา MnPhi ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ถูกนำมาปลูกและเก็บรักษาไว้ในเรือนกระจก(25 ± 5 ◦C) เป็นเวลา 45 วัน การรักษาแต่ละคนได้ทำงานกับหกซ้ำในอย่างสมบูรณ์แบบสุ่มและการทดสอบซ้ำครั้งที่สอง. หน่วยทดลองเป็นหนึ่งในพืชถั่วเหลืองต่อกระถาง ดังนั้นความรุนแรงของโรคได้รับการประเมินในพืชจากเมล็ดยัดเยียดเดียวกันหกการรักษาตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ในมาตรา2.5. ความสัมพันธ์ระหว่างความรุนแรงของโรคและโคโลนีได้รับการยืนยันในการศึกษาก่อนหน้า (Mengistu et al. 2007) ดังนั้น CFU ในรากถั่วเหลือง ถูกนำมาใช้เป็นตัวชี้วัดความรุนแรงของโรค ที่เจริญเติบโตของพืชขั้นตอนของ R1 พืชถูกถอนรากถอนโคนอย่างระมัดระวังเพื่อตรวจสอบ CFU ของเชื้อโรค รากแห้งที่ 40 ◦Cและพื้นดินที่มีตัวอย่างโรงงาน สำหรับแต่ละตัวอย่าง, 5 มิลลิกรัมของเนื้อเยื่อพื้นดินถูกวางไว้ในหลอดcentrifuge 1 มล. ของโซเดียมไฮโปคลอไรต์ (2%) เป็นเวลา 3 นาที, ล้างภายหลังด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อแล้วเพิ่มถึง 20 มิลลิลิตร PDA เบาแก้ไขเพิ่มเติมกับ rifampicin (100 มิลลิกรัม L-1) และ metalaxyl (224 มก. L-1) หลังจาก 3 วันของการบ่มที่ 28 ◦C, M. phaseolina CFUs นับและแปลงเป็นโคโลนีต่อกรัมของราก การควบคุมความรุนแรงเป็นที่คาดกันว่าเป็น [(ค่าเฉลี่ยของโคโลนี / กรัมรากในการควบคุมได้รับการรักษา) - (ค่าเฉลี่ยของโคโลนี / กรัมรากในพืชได้รับการรักษา)] / (ค่าเฉลี่ยของโคโลนี/ กรัมรากในการควบคุมได้รับการรักษา) × 100