The relatively high detection limit

The relatively high detection limit of the Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) prevents its application for detection of low concentrations of antigens. To increase the sensitivity for detection of HIV-1 p24 antigen, we developed a highly sensitive nuclease-linked fluorescence oligonucleotide assay (NLFOA). Two major improvements were incorporated in NLFOA to amplify antibody-antigen interaction signals and reduce the signal/noise ratio; a large number of nuclease molecules coupled to the gold nanoparticle/streptavidin complex and fluorescent signals generated from fluorescent-labeled oligonucleotides by the nuclease. The detection limit of p24 by NLFOA was 1 pg/mL, which was 10-fold more sensitive than the conventional ELISA (10 pg/mL). The specificity was 100% and the coefficient of variation (CV) was 7.8% at low p24 concentration (1.5 pg/mL) with various concentrations of spiked p24 in HIV-1 negative sera. Thus, NLFOA is highly sensitive, specific, reproducible and user-friendly. The more sensitive detection of low p24 concentrations in HIV-1-infected individuals by NLFOA could allow detection of HIV-1 infections that are missed by the conventional ELISA at the window period during acute infection to further reduce the risk for HIV-1 infection due to the undetected HIV-1 in the blood products. Moreover, NLFOA can be easily applied to more sensitive detection of other antigens.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จำนวนตรวจค่อนข้างสูงเอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay (ELISA) ป้องกันไม่ให้โปรแกรมประยุกต์การตรวจความเข้มข้นต่ำสุดของ antigens เพื่อเพิ่มความไวในการตรวจเอชไอวี-1 ตรวจหา p24 เราพัฒนาแบบทดสอบ oligonucleotide fluorescence nuclease เชื่อมโยงมีความไวสูง (NLFOA) ปรับปรุงที่สำคัญทั้งสองถูกรวมใน NLFOA เพื่อขยายสัญญาณโต้ตอบการตรวจหาแอนติบอดี และลดอัตราส่วนสัญญาณ/เสียง จำนวนโมเลกุล nuclease ควบคู่ไป gold nanoparticle/streptavidin ซับซ้อน และเรืองแสงสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ชื่อ oligonucleotides สร้าง โดย nuclease จำนวนตรวจหา p24 โดย NLFOA 1 pg/mL ซึ่ง 10-fold อ่อนไหวมากกว่า ELISA ธรรมดา (10 pg/mL) Specificity ที่ 100% และค่าสัมประสิทธิ์ของความแปรผัน (CV) ได้ 7.8% ที่ความเข้มข้นต่ำ p24 (1.5 pg/mL) กับความเข้มข้นต่าง ๆ ของ p24 ถูกแทงในเอชไอวี-1 จะเป็นค่าลบ ดังนั้น NLFOA เป็นคำสำคัญ เฉพาะ จำลอง และใช้งานง่าย การตรวจพบความเข้มข้นต่ำ p24 ในเอชไอวี-1-ติดเชื้อบุคคลโดย NLFOA อ่อนไหวมากอาจทำให้ตรวจหาเชื้อเอชไอวี-1 ที่พลาด โดย ELISA ทั่วไปในหน้าต่างรอบระยะเวลาระหว่างการติดเชื้อเฉียบพลันเพื่อลดความเสี่ยงการติดเชื้อเอชไอวี-1 เนื่องจากการตรวจไม่พบเชื้อเอชไอวี 1 ในผลิตภัณฑ์เลือด นอกจากนี้ NLFOA ได้ใช้ antigens อื่น ๆ ตรวจมีความไวต่อการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขีด จำกัด ของการตรวจสอบที่ค่อนข้างสูงของการทดสอบอิมมูโนเอนไซม์ที่เชื่อมโยง (ELISA) ป้องกันไม่ให้การประยุกต์ใช้สำหรับการตรวจสอบความเข้มข้นต่ำของแอนติเจน เพื่อเพิ่มความไวในการตรวจหาแอนติเจน p24 HIV-1 เราพัฒนาความไวสูงนิเชื่อมโยงการวิเคราะห์ oligonucleotide เรืองแสง (NLFOA) สองการปรับปรุงที่สำคัญได้รับการจัดตั้งขึ้นใน NLFOA เพื่อขยายสัญญาณปฏิสัมพันธ์แอนติบอดีแอนติเจนและลดอัตราส่วนสัญญาณเสียง /; เป็นจำนวนมากของโมเลกุลคู่กับนิอนุภาคนาโนทองคำ / streptavidin ซับซ้อนและสัญญาณเรืองแสงที่เกิดจาก oligonucleotides เรืองแสงที่มีข้อความจากนิว ขีด จำกัด ของการตรวจสอบของ p24 โดย NLFOA 1 pg / มิลลิลิตรซึ่งเป็น 10 เท่าที่มีความสำคัญมากขึ้นกว่าเดิมวิธี ELISA (10 pg / มิลลิลิตร) ความจำเพาะ 100% และสัมประสิทธิ์การแปรผัน (CV) เป็น 7.8% ที่มีความเข้มข้นต่ำ p24 (1.5 pg / มิลลิลิตร) ที่มีความเข้มข้นต่างๆของ p24 ถูกแทงในเอชไอวี -1 ซีรั่มเชิงลบ ดังนั้น NLFOA มีความไวสูงที่เฉพาะเจาะจงสามารถทำซ้ำได้และใช้งานง่าย การตรวจสอบที่มีความสำคัญมากขึ้นของความเข้มข้นต่ำ p24 ในบุคคลที่ติดเชื้อ HIV-1-ติดเชื้อโดย NLFOA อาจทำให้การตรวจหาการติดเชื้อเอชไอวี 1 ที่พลาดโดยวิธี ELISA การชุมนุมในช่วงหน้าต่างในระหว่างการติดเชื้อเฉียบพลันเพื่อลดความเสี่ยงในการติดเชื้อ HIV-1 การติดเชื้อเนื่องจาก ที่จะตรวจไม่พบการติดเชื้อ HIV-1 ในผลิตภัณฑ์ของเลือด นอกจากนี้ NLFOA สามารถนำมาประยุกต์ได้อย่างง่ายดายเพื่อการตรวจสอบที่มีความสำคัญมากขึ้นของแอนติเจนอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ค่อนข้างสูง ขีดจำกัดของเอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay ( ELISA ) ป้องกันการประยุกต์ใช้ตรวจหาความเข้มข้นต่ำของแอนติเจน เพิ่มความไวในการตรวจหาเชื้อเอชไอวี p24 แอนติเจน เราพัฒนาความไวสูงเชื่อมโยงการใช้นิวเคลียส ซึ่ง nlfoa )สองการปรับปรุงที่สำคัญเป็นนิติบุคคลที่จัดตั้งขึ้นใน nlfoa ระดับแอนติบอดีแอนติเจนปฏิสัมพันธ์ของสัญญาณและลดอัตราส่วนสัญญาณ / เสียงรบกวน ; เป็นจำนวนมากของนิวเคลียสโมเลกุลคู่กับอนุภาคนาโนทองคำ / streptavidin ซับซ้อนและเรืองแสงเรืองแสงป้ายสัญญาณที่สร้างขึ้นจากโอลิโกนิวคลีโอไทด์ โดยนิวเคลียส . การตรวจสอบวงเงินของ p24 โดย nlfoa 1 pg / ml .ซึ่งเป็น 10 เท่าได้ไวกว่าวิธี ELISA ( 10 pg / ml ) ความจำเพาะ 100% และสัมประสิทธิ์ความแปรปรวน ( CV ) คือ 7.8 % ที่ความเข้มข้นต่ำ ( 1.5 p24 pg / ml ) ที่มีความเข้มข้นของโปรตีนต่าง ๆนา p24 ไม่ลบ ดังนั้น nlfoa มีความไวสูง โดยเฉพาะการหาง่ายการตรวจหาความอ่อนไหวของความเข้มข้นต่ำ p24 hiv-1-infected บุคคลโดย nlfoa สามารถอนุญาตการตรวจหาการติดเชื้อที่พลาดโดยวิธีปกติในช่วงหน้าต่างในระหว่างการติดเชื้อเฉียบพลันเพื่อลดความเสี่ยงการติดเชื้อเนื่องจากการตรวจสอบเชื้อในผลิตภัณฑ์เลือด นอกจากนี้nlfoa สามารถประยุกต์ได้อย่างง่ายดายเพื่อการตรวจหาแอนติเจนอื่น ๆที่สำคัญมากขึ้น