Engraftment of gene-modified umbili

Engraftment of gene-modified umbilical cord blood cells in
neonates with adenosine deaminase deficiency

Abstract
Haematopoietic stem cells in umbilical cord blood are an attractive target for gene therapy of
inborn errors of metabolism. Three neonates with severe combined immunodeficiency were
treated by retroviral-mediated transduction of the CD34+ cells from their umbilical cord blood
with a normal human adenosine deaminase complementary DNA followed by autologous
transplantation. The continued presence and expression of the introduced gene in leukocytes from
bone marrow and peripheral blood for 18 months demonstrates that umbilical cord blood cells
may be genetically modified with retroviral vectors and engrafted in neonates for gene therapy.
Inherited deficiency of adenosine deaminase (ADA) is the cause of approximately onequarter
of the cases of severe combined immunodeficiency (SCID)1,2. Based on the
successful treatment of ADA-deficient SCID by allogeneic bone marrow transplantation and
the cloning of the normal human ADA complementary DNA, ADA-deficiency has been a
major target for gene therapy3,4. Theoretically, genetically corrected autologous Tlymphoid
precursors should have a selective survival advantage over non-corrected ADAdeficient
cells. A broad level of expression by an inserted ADA gene (from one-tenth to
above normal) should be beneficial without adverse consequences, although there is no
specific information about consequences of vast overexpression of ADA in cells of all
haematopoietic lineages. Thus, even with the currently modest capabilities to efficiently
transfer genes into primary haematopoietic cells and an inability to control gene expression
in a precise manner, ADA-deficient SCID may respond to gene therapy.
The first clinical trial of gene therapy involved two young girls with ADA deficiency, using
their peripheral blood T lymphocytes as the target for ADA gene transfer5,6. Multiple
courses of leukopheresis, transduction and re-infusion of T lymphocytes led to increased
numbers of T lymphocytes and improved T-Iymphocyte function, with attainment in one of
the two patients of circulating leukocyte ADA levels equivalent to a quarter of those in
normal individuals. Despite these encouraging results with mature T lymphocytes, the
genetic correction of haematopoietic stem cells may create a more long-lasting source of
ADA-expressing T lymphocytes. Information gained from the treatment of ADA deficiency
would be applicable to the use of haematopoietic stem cells for gene therapy for other
aetiologic forms of SCID and to other genetic diseases affecting haematopoietic and
lymphoid cells.
In the spring of 1993, three women who were known to be heterozygous for ADA
deficiency were identified to be carrying ADA-deficient fetuses. After independent genetic
counseling, each family elected to carry its respective pregnancy to term. Because of the
prenatal diagnosis, the unique opportunity was afforded to attempt gene therapy for the
neonates using their umbilical cord blood as a source of haematopoietic stem cells.
Extensive information has been accumulated to indicate that umbilical cord blood contains
haematopoietic stem cells; more than forty patients have had successful haematopoietic
reconstitution by the transplantation of allogeneic cord blood leukocytes following
cytoablative conditioning7,8.
Approval to perform gene transfer into the neonates’ umbilical cord blood followed by the
transplantation of the cells was obtained from the Institutional Review Boards, the
Recombinant DNA Advisory Committee (RAC) of the National Institutes of Health, and the
Food and Drug Administration. The parents of each child gave informed consent for the
collection, transduction and re-infusion of the umbilical cord blood CD34+ cells. After term
delivery of each neonate, umbilical cord blood was collected and processed to isolate the
CD34+ population. The CD34+ cells were transduced with the retroviral vector LASN (ref.
9), which carried a normal human ADA cDNA, and returned to their respective donors by
intravenous infusion on their fourth day of life. Subsequently, we determined the
effectiveness of gene transduction and whether the engraftment of the umbilical cord blood
stem cells had occurred. We report here the results of the first use of umbilical cord blood
cells for clinical gene therapy.
Clinical course
At birth the prenatal diagnosis of ADA-deficiency was confirmed. Fluorescence-activated
cell sorting (FACS) analysis of umbilical cord blood samples demonstrated that the patients
had reduced numbers of T lymphocytes (1.5–2%) compared with those in normal umbilical
cord blood (56.6% ± 12.5). Their levels of serum deoxyadenosine metabolites (dAXP) were
elevated. Following the institution of enzyme replacement therapy with polyethylene glycol
(PEG) combined with ADA on days 1–4 of life (30 U kg-1 twice weekly by intramuscular
injection), there was correction of the metabolic abnormalities, with dAXP levels in
erythrocytes decreasing from 160–302 nmol ml-1 (cord blood red blood cells (RBCs)) to

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Engraftment of gene-modified umbilical cord blood cells inneonates with adenosine deaminase deficiencyAbstractHaematopoietic stem cells in umbilical cord blood are an attractive target for gene therapy ofinborn errors of metabolism. Three neonates with severe combined immunodeficiency weretreated by retroviral-mediated transduction of the CD34+ cells from their umbilical cord bloodwith a normal human adenosine deaminase complementary DNA followed by autologoustransplantation. The continued presence and expression of the introduced gene in leukocytes frombone marrow and peripheral blood for 18 months demonstrates that umbilical cord blood cellsmay be genetically modified with retroviral vectors and engrafted in neonates for gene therapy.Inherited deficiency of adenosine deaminase (ADA) is the cause of approximately onequarterof the cases of severe combined immunodeficiency (SCID)1,2. Based on thesuccessful treatment of ADA-deficient SCID by allogeneic bone marrow transplantation andthe cloning of the normal human ADA complementary DNA, ADA-deficiency has been amajor target for gene therapy3,4. Theoretically, genetically corrected autologous Tlymphoidprecursors should have a selective survival advantage over non-corrected ADAdeficientcells. A broad level of expression by an inserted ADA gene (from one-tenth toabove normal) should be beneficial without adverse consequences, although there is noข้อมูลเฉพาะเกี่ยวกับผลกระทบของ overexpression ของ ADA ในเซลล์ทั้งหมดมากมายเชื้อชาติ haematopoietic ดังนั้น แม้ ด้วยความเจียมเนื้อเจียมตัวในปัจจุบันให้มีประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนในเซลล์ haematopoietic หลักและไม่สามารถควบคุมการแสดงออกของยีนอย่างแม่นยำ วทคร ADA ไม่อาจตอบสนองต่อการรักษาด้วยยีนทดลองทางคลินิกครั้งแรกของการรักษาด้วยยีนเกี่ยวข้องกับสองสาวกับ ADA ขาด ใช้ของเลือดต่อพ่วง T lymphocytes เป็นเป้าหมายสำหรับ ADA ยีน transfer5, 6 หลายหลักสูตร leukopheresis, transduction และคอนกรีตใหม่ของ T lymphocytes นำไปสู่การเพิ่มขึ้นจำนวน T lymphocytes และฟังก์ชัน T Iymphocyte ปรับปรุง มีโดยในหนึ่งผู้ป่วยสองของหมุนเวียนเท่ากับไตรมาสในระดับ leukocyte ADAคนปกติ แม้ มีผลกับผู้ใหญ่ T lymphocytes ส่งเสริมเหล่านี้การแก้ไขทางพันธุกรรมของเซลล์ต้นกำเนิด haematopoietic อาจสร้างเป็นแหล่งขึ้นยาวนานแสดง ADA lymphocytes T ข้อมูลที่ได้รับจากการรักษาของ ADA ขาดจะใช้กับการใช้เซลล์ต้นกำเนิดของ haematopoietic สำหรับการบำบัดยีนสำหรับอื่น ๆแบบฟอร์ม aetiologic ภายใต้ และโรคพันธุกรรมอื่น ๆ ที่ส่งผลกระทบต่อ haematopoietic และเซลล์ lymphoidในฤดูใบไม้ผลิ 1993 ผู้หญิงสามถูกเรียกเป็น heterozygous สำหรับ ADAขาดได้ระบุให้สามารถแบก fetuses ADA ไม่ หลังอิสระทางพันธุกรรมให้คำปรึกษา ครอบครัวละเลือกเพื่อดำเนินการตั้งครรภ์ตามลำดับในระยะ เนื่องจากการวินิจฉัยก่อนคลอด สไตล์ที่นี่พยายามใช้ยีนบำบัดในการneonates โดยใช้เลือดสายสะดือเป็นแหล่งของเซลล์ต้นกำเนิด haematopoieticมีการสะสมข้อมูลมากมายเพื่อบ่งชี้ว่า ประกอบด้วยเลือดสายสะดือเซลล์ต้นกำเนิด haematopoietic ผู้ป่วยมากกว่าสี่สิบมี haematopoietic ประสบความสำเร็จreconstitution โดยปลูกของ leukocytes เลือด allogeneic สายดังต่อไปนี้cytoablative conditioning7, 8อนุมัติให้ดำเนินการถ่ายโอนยีนเข้าไปในเลือดสายสะดือของ neonates ตามการปลูกถ่ายเซลล์ได้รับจากคณะกรรมการตรวจสอบสถาบัน การวททชดีเอ็นเอที่ปรึกษา (RAC) ของสถาบันแห่งชาติสุขภาพ และอาหารและยา พ่อแม่ของเด็กแต่ละคนให้แจ้งความยินยอมในการคอลเลกชัน transduction และคอนกรีตใหม่ของเซลล์เลือด CD34 + สะดือ หลังจากระยะจัดส่งของแต่ละ neonate เลือดสายสะดือถูกรวบรวม และประมวลผลการแยกCD34 + ประชากร เซลล์ CD34 + ถูก transduced กับเวกเตอร์ retroviral LASN (อ้างอิง9), ซึ่งดำเนิน cDNA ADA มนุษย์ปกติ และส่งกลับไปยังผู้บริจาคของพวกเขาเกี่ยวข้องด้วยคอนกรีตฉีดในวันที่สี่ของชีวิต ในเวลาต่อมา เรากำหนดประสิทธิภาพของยีน transduction และ engraftment เลือดสายสะดือเซลล์ต้นกำเนิดได้เกิดขึ้น ที่นี่เรารายงานผลครั้งแรกที่ใช้เลือดสายสะดือcells for clinical gene therapy.Clinical courseAt birth the prenatal diagnosis of ADA-deficiency was confirmed. Fluorescence-activatedcell sorting (FACS) analysis of umbilical cord blood samples demonstrated that the patientshad reduced numbers of T lymphocytes (1.5–2%) compared with those in normal umbilicalcord blood (56.6% ± 12.5). Their levels of serum deoxyadenosine metabolites (dAXP) wereelevated. Following the institution of enzyme replacement therapy with polyethylene glycol(PEG) combined with ADA on days 1–4 of life (30 U kg-1 twice weekly by intramuscularinjection), there was correction of the metabolic abnormalities, with dAXP levels inerythrocytes decreasing from 160–302 nmol ml-1 (cord blood red blood cells (RBCs)) to

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

engraftment ยีนปรับปรุงสายเซลล์เม็ดเลือดสะดือใน
ทารกแรกเกิดที่มีการขาด deaminase adenosine บทคัดย่อhaematopoietic เซลล์ต้นกำเนิดในเลือดสายสะดือเป็นเป้าหมายที่น่าสนใจสำหรับการรักษาด้วยยีนของข้อผิดพลาดมา แต่กำเนิดของการเผาผลาญ สามทารกแรกเกิดด้วยโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องรวมอย่างรุนแรงได้รับการรักษาโดย transduction ไวรัสพึ่งของ CD34 + เซลล์จากเลือดจากสายสะดือของพวกเขาที่มี deaminase adenosine มนุษย์ปกติ DNA ประกอบตามด้วย autologous ปลูก การแสดงตนอย่างต่อเนื่องและการแสดงออกของยีนที่นำมาใช้ในเม็ดเลือดขาวจากไขกระดูกและเลือด 18 เดือนแสดงให้เห็นว่าเซลล์เลือดจากสายสะดืออาจถูกดัดแปลงพันธุกรรมที่มีพาหะไวรัสและทรงปลูกฝังในทารกแรกเกิดสำหรับการรักษาด้วยยีน. สืบทอดขาด deaminase อะดีโนซีน (ADA) เป็น สาเหตุของการประมาณ onequarter ของกรณีของโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องอย่างรุนแรงรวม (SCID) 1,2 บนพื้นฐานของการรักษาที่ประสบความสำเร็จของวทคร ADA ขาดโดยการปลูกถ่ายไขกระดูก allogeneic และโคลนปกติมนุษย์ ADA DNA ประกอบ, ADA ขาดได้รับเป้าหมายสำคัญสำหรับยีน therapy3,4 ในทางทฤษฎีการแก้ไขพันธุกรรม Tlymphoid autologous สารตั้งต้นควรจะมีความได้เปรียบในการอยู่รอดที่เลือกข้างที่ไม่ได้รับการแก้ไข ADAdeficient เซลล์ ระดับวงกว้างของการแสดงออกโดยการใส่ยีน ADA (จากหนึ่งในสิบที่จะสูงกว่าปกติ) ควรจะเป็นประโยชน์โดยไม่มีผลกระทบที่ไม่พึงประสงค์แม้จะไม่มีข้อมูลที่เฉพาะเจาะจงเกี่ยวกับผลกระทบของการแสดงออกใหญ่ของ ADA ในเซลล์ของทุกlineages haematopoietic ดังนั้นแม้จะมีความสามารถในการเจียมเนื้อเจียมตัวในขณะนี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพในการถ่ายโอนยีนเข้าสู่เซลล์เม็ดเลือดหลักและไม่สามารถที่จะควบคุมการแสดงออกของยีนในลักษณะที่แม่นยำ SCID ADA ขาดอาจตอบสนองต่อการรักษาด้วยยีน. ทดลองทางคลินิกครั้งแรกของการรักษาด้วยยีนที่เกี่ยวข้องกับผู้หญิงสองคนหนุ่มสาวที่มี ขาด ADA ใช้lymphocytes T เลือดของพวกเขาเป็นเป้าหมายของ ADA ยีน transfer5,6 หลายหลักสูตรของ leukopheresis, พลังงานและอีกครั้งแช่ของเซลล์เม็ดเลือดขาว T นำไปสู่การเพิ่มจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาว T และปรับปรุงการทำงานของ T-Iymphocyte กับความสำเร็จในหนึ่งในสองผู้ป่วยหมุนเวียนระดับ ADA เม็ดโลหิตขาวเทียบเท่ากับหนึ่งในสี่ของผู้ที่อยู่ในบุคคลปกติ ถึงแม้ว่าจะมีผลกระตุ้นให้กับเซลล์เม็ดเลือดขาว T ผู้ใหญ่การแก้ไขทางพันธุกรรมของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดอาจสร้างแหล่งเพิ่มเติมยาวนานของADA-แสดง lymphocytes T ข้อมูลที่ได้จากการรักษาของการขาด ADA จะใช้บังคับกับการใช้เซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดสำหรับการรักษาด้วยยีนอื่น ๆรูปแบบ aetiologic ของวทครและโรคทางพันธุกรรมอื่น ๆ ที่มีผลต่อการสร้างเม็ดเลือดและเซลล์ต่อมน้ำเหลือง. ในฤดูใบไม้ผลิของปี 1993, ผู้หญิงสามคนที่เป็นที่รู้จัก จะ heterozygous สำหรับ ADA ขาดถูกระบุที่จะแบกทารก ADA ขาด หลังจากที่ทางพันธุกรรมที่เป็นอิสระให้คำปรึกษาในครอบครัวแต่ละคนเลือกที่จะดำเนินการตั้งครรภ์ของแต่ละระยะ เพราะการวินิจฉัยก่อนคลอดโอกาสที่ถูกเจ้าตัวจะพยายามรักษาด้วยยีนสำหรับทารกแรกเกิดโดยใช้เลือดจากสายสะดือของพวกเขาเป็นแหล่งที่มาของเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด. ข้อมูลที่กว้างขวางได้รับการสะสมเพื่อแสดงว่าเลือดสายสะดือมีเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด; กว่าสี่สิบผู้ป่วยที่มีประสบความสำเร็จ haematopoietic ปฏิสังขรณ์โดยการปลูกของเม็ดเลือดขาวในเลือดสาย allogeneic ต่อไปนี้conditioning7,8 cytoablative. ได้รับอนุมัติให้ดำเนินการถ่ายโอนยีนเข้าสู่กระแสเลือดสายสะดือทารกแรกเกิด 'ตามด้วยการปลูกถ่ายเซลล์ที่ได้รับจากคณะกรรมการทบทวนสถาบันดีเอ็นเอคณะกรรมการที่ปรึกษา (RAC) ของสถาบันสุขภาพแห่งชาติและกรรมการอาหารและยา พ่อแม่ผู้ปกครองของเด็กแต่ละคนให้ความยินยอมในการเก็บพลังงานและอีกครั้งแช่ของสายสะดือเลือด CD34 + เซลล์ หลังจากระยะการส่งมอบของทารกแต่ละเลือดสายสะดือถูกเก็บรวบรวมและประมวลผลเพื่อแยกประชากร CD34 + เซลล์ + CD34 ถูก transduced กับไวรัสเวกเตอร์แลสเซน (Ref. 9) ซึ่งดำเนิน cDNA ADA มนุษย์ปกติและกลับไปยังผู้บริจาคของตนโดยการฉีดเข้าเส้นเลือดดำในวันที่สี่ชีวิตของพวกเขา ต่อจากนั้นเรากำหนดประสิทธิภาพของพลังงานยีนและไม่ว่า engraftment ของสายสะดือเลือดเซลล์ต้นกำเนิดที่เกิดขึ้น เรารายงานที่นี่ผลของการใช้งานครั้งแรกของสายสะดือเลือดเซลล์ยีนบำบัดทางคลินิก. แน่นอนทางคลินิกที่เกิดการวินิจฉัยก่อนคลอดของ ADA ขาดได้รับการยืนยัน เรืองแสงที่ทำงานโดยใช้การจัดเรียงเซลล์ (FACS) การวิเคราะห์ตัวอย่างเลือดจากสายสะดือแสดงให้เห็นว่าผู้ป่วยที่ได้ลดจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาว T (1.5-2%) เมื่อเทียบกับผู้ที่อยู่ในสะดือปกติเลือดจากสายสะดือ (56.6% ± 12.5) ระดับของสารซีรั่ม deoxyadenosine (dAXP) ได้รับการยกระดับ ต่อไปนี้สถาบันการศึกษาของการบำบัดทดแทนเอนไซม์ที่มีพลาสติกคอล(PEG) รวมกับ ADA ในวันที่ 1-4 ของชีวิต (30 U kg-1 สัปดาห์ละสองครั้งโดยฉีดเข้ากล้ามเนื้อฉีด) มีการแก้ไขความผิดปกติของการเผาผลาญอาหารที่มีระดับ dAXP ในเม็ดเลือดแดงลดลง 160-302 นาโนโมมล-1 (สายเลือดเซลล์เม็ดเลือดแดง (เม็ดเลือดแดง)) เพื่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การปลูกถ่ายยีนเลือดสายสะดือในทารกแรกเกิดกับเซลล์
ดีอะมิเนสขาด


ที่แท้จริงเป็นสเต็มเซลล์ในสายสะดือเป็นมีเสน่ห์เป้าหมายสำหรับยีนบำบัดของ
สายอักขระว่าง . สามทารกแรกเกิดที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องรุนแรงรวมเป็น
ถือว่า retroviral โดยการแปรของ cd34 เซลล์จากเลือดสายสะดือ
กับคนปกติดีอะมิเนสจากดีเอ็นเอของ
ตามด้วยการปลูก ยังคงสถานะและการแสดงออกของยีนชนิดที่แนะนำในไขกระดูกและเลือดจาก
ต่อเป็นเวลา 18 เดือน สะท้อนให้เห็นว่า เลือดจากสายสะดือเซลล์
อาจจะดัดแปลงพันธุกรรมที่มีเวกเตอร์และ retroviral engrafted ในทารกแรกเกิดสำหรับยีนบำบัด .
กระเหม่นของดีอะมิเนส ( ADA ) เป็นสาเหตุประมาณ onequarter
กรณีรุนแรง รวมภูมิคุ้มกันบกพร่อง ( สคิด ) 1 , 2 ขึ้นอยู่กับการรักษาที่ประสบความสําเร็จของ ADA ขาด
allogeneic สคิด โดยการปลูกถ่ายไขกระดูกและ
โคลนนิ่งของมนุษย์ปกติเอประกอบดีเอ็นเอ , ADA ขาดได้รับยีนเป้าหมายหลัก
therapy3,4 . ในทางทฤษฎีแก้ไขพันธุกรรมของ tlymphoid
ตั้งต้นควรเลือกที่ไม่รอดจากการแก้ไข adadeficient
เซลล์ กว้างระดับการแสดงออกของยีนโดยแทรก ADA ( จากหนึ่งในสิบ

สูงกว่าปกติ ) ควรเป็นประโยชน์ โดยไม่มีผลกระทบที่ไม่พึงประสงค์ แม้ว่าไม่มี
ข้อมูลเฉพาะเกี่ยวกับผลของ overexpression กว้างใหญ่ของเอในเซลล์ทั้งหมด
เผ่าพันธุ์ที่แท้จริง . ฉะนั้น แม้ในขณะนี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพด้วยเจียมเนื้อเจียมตัว
ถ่ายโอนยีนเข้าสู่เซลล์หลักที่แท้จริงและไม่สามารถที่จะควบคุม
การแสดงออกของยีนในลักษณะที่แม่นยำ , ADA ขาดสคิดอาจตอบสนองต่อการรักษายีน .
การทดลองทางคลินิกครั้งแรกของยีนบำบัดเกี่ยวข้องกับสองหนุ่มสาวกับ ADA ใช้
ขาดของเม็ดเลือดขาวลิมโฟซัยท์เป็นเป้าหมายสำหรับ T เอยีน transfer5,6 . หลักสูตรของหลาย
leukopheresis ผ่าน , และแบบไม่ก่อให้เกิดการเพิ่มจำนวนของเม็ดเลือดขาวลิมโฟซัยท์และฟังก์ชัน T
t-iymphocyte ดีขึ้นกับอายุ หนึ่งใน 2 รายของ ADA
2 ระดับเทียบเท่ากับหนึ่งในสี่ของผู้ที่อยู่ใน
บุคคลปกติหมุนเวียน .แม้เหล่านี้เล็กผลด้วยทีลิมโฟซัยท์ ,
แก้ไขพันธุกรรมของสเต็มเซลล์ที่แท้จริงอาจสร้างมากขึ้นในระยะยาวแหล่ง
เอแสดงทีลิมโฟซัยท์ . ข้อมูลที่ได้รับจากการรักษาของ ADA ขาด
จะใช้เพื่อการใช้สเต็มเซลล์ที่แท้จริงสำหรับยีนบำบัดสำหรับ
อื่น ๆaetiologic รูปแบบสคิดและโรคทางพันธุกรรมอื่น ๆ ที่มีผลต่อเซลล์เม็ดเลือดที่แท้จริงและ
.
ในฤดูใบไม้ผลิของปี 1993 สามผู้หญิงที่รู้จักกันเป็น homozygous สำหรับ Ada
ขาดระบุต้องแบก ADA ขาดสาย . หลังจากเป็นอิสระทางพันธุกรรม
ปรึกษา แต่ละครอบครัวเลือกที่จะแบกของการตั้งครรภ์ที่เกี่ยวข้องกับระยะ เพราะ
การวินิจฉัยก่อนคลอด ,โอกาสเป็น afforded เพื่อพยายามรักษายีนเพื่อใช้เลือดสายสะดือของทารกแรกเกิด
ที่แท้จริงเป็นแหล่งของสเต็มเซลล์ .
ข้อมูลอย่างละเอียดได้สะสมเพื่อแสดงว่าเลือดสายสะดือมีสเต็มเซลล์
ที่แท้จริง มากกว่าผู้ป่วยสี่สิบมีประสบความสำเร็จที่แท้จริง
สร้างใหม่โดยการปลูกถ่ายเลือดสายสะดือของ allogeneic ชนิดต่อไปนี้ cytoablative conditioning7,8
.
ขออนุมัติเพื่อดำเนินการถ่ายโอนยีนเข้าสู่เลือดสายสะดือทารกแรกเกิด ' ตามด้วย
การปลูกถ่ายของเซลล์ที่ได้รับจากคณะกรรมการตรวจสอบสถาบัน ,
ดีเอ็นเอคณะกรรมการที่ปรึกษา ( RAC ) ของสถาบันสุขภาพแห่งชาติ ,
สำนักงานคณะกรรมการอาหารและยา ผู้ปกครองของเด็กแต่ละคนได้ให้ความยินยอมสำหรับ
คอลเลกชัน ผ่านและฉีดของเลือดสายสะดือ cd34 เซลล์ หลังจากเทอม
ส่งแต่ละเลือดสายสะดือทารกแรกเกิด ถูกเก็บรวบรวมและประมวลผลเพื่อแยก
cd34 ประชากร เซลล์ cd34 เป็น transduced กับเวกเตอร์อังกฤษ แล ซน retroviral
9 ) ซึ่งถือเป็นมนุษย์ธรรมดา ADA cDNA ,