Genetic confirmation
Genetic confirmation of C gigasxC. rivularis crosses was conducted on spat only. Samples of adductor muscle and digestive gland from adults (parents) were prepared for electrophoresis by homogenizing in 0.1 M Tris-HCl pH 7.0 buffer containing 0.10% B-mercaptoethanol. Juveniles were homogenized whole in equal volume of grinding buffer. After centrifugation at 5000 g for 6 min, a portion of the supernatant from each sample was loaded onto starch gels. We attempted to score each oyster for six enzymes: ADK (adenylate kinase , E.C. 2.7 .4.3 ), EST (esterase, E.C. 3.1.1.1 ), GPI (glucosephosphate isomerase, E.C. 5.3.1.9), MDH (malate dehydrogenase, E.C. 1.1.1.37), MPI (mannose phosphate isomerase, E.C. 5.3.1.8 ), and PGM (8.C.2.7.5.1).The LiOH buffer system of Selander et al. ( l97l) was used to resolve GPI. ADK, EST, MDH, and MPI were resolved on Tris-citrate pH 7.0 gels (Gaffney and Scott, 1984). We stained for PGM using the method of Pogson( 1989). Lower-case italics are used for specific enzyme-codinggene loci (e.g.,Pgi), with numerical suflixes for multiple loci (e.g., Pgm-| for the most rapidly migrating locus).
ยืนยันทางพันธุกรรม
ยืนยันทางพันธุกรรมของค gigasxc ข้าม rivularis ได้ดำเนินการทะเลาะวิวาทกันเพียง ตัวอย่างของกล้ามเนื้อ adductor และต่อมย่อยอาหารจากผู้ใหญ่ (พ่อแม่) มีเตรียมไว้สำหรับอิโดยผสมยางใน 0.1 เมตร tris-hcl ph 7.0 บัฟเฟอร์ที่มี 0.10% ข Mercaptoethanol หนุ่มสาวปั่นทั้งในปริมาตรที่เท่ากันบดบัฟเฟอร์ หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 5000 กรัม 6 นาทีเป็นส่วนหนึ่งของสารละลายจากแต่ละตัวอย่างถูกโหลดลงบนเจลสตาร์ช เราพยายามที่จะทำคะแนนแต่ละหอยนางรมหกเอนไซม์: ADK (ไคเนส adenylate, EC 2.7 .4.3) วิชิต (esterase, EC 3.1.1.1) gpi (glucosephosphate isomerase, EC 5.3.1.9) mdh (malate dehydrogenase, EC 1.1 1.37) MPI (แมนโนสไอโซเมอฟอสเฟต EC 5.3.1.8) และ PGM (8.c.2.7.5.1)ระบบบัฟเฟอร์ lioh ของ Selander ตอัล (l97l) ถูกนำมาใช้ในการแก้ไข gpi ADK, EST, mdh และ MPI มีการแก้ไขใน tris-citrate ph 7.0 เจล (GAFFNEY และสก็อต, 1984) เราสีเพื่อ PGM โดยใช้วิธีการของ pogson (1989) ตัวเอียงต่ำกว่ากรณีที่จะใช้สำหรับตำแหน่งที่เฉพาะเจาะจงเอนไซม์ codinggene (เช่น PGI) มี suflixes ตัวเลขในการหาตำแหน่งหลาย (เช่น PGM-| สำหรับตนมากที่สุดย้ายอย่างรวดเร็ว).
การแปล กรุณารอสักครู่..
ยืนยันพันธุ
C gigasxC ยืนยันทางพันธุกรรม rivularis ตัดได้ดำเนินใน spat เท่านั้น ตัวอย่างของ adductor กล้ามเนื้อและต่อมย่อยอาหารจากผู้ใหญ่ (พ่อแม่) ถูกเตรียมไว้สำหรับ electrophoresis โดย homogenizing ใน 0.1 บัฟเฟอร์ pH 7.0 M ทริสเรทติ้ง HCl ประกอบด้วย 0.10% B-mercaptoethanol Juveniles ถูก homogenized ทั้งปริมาณเท่าของบัฟเฟอร์ หลังจาก centrifugation ที่ g 5000 สำหรับขั้นต่ำ 6 ส่วนของ supernatant จากแต่ละตัวอย่างถูกโหลดลงในแป้งเจ เราพยายามที่จะคะแนนหอยนางรมแต่ละสำหรับเอนไซม์ 6: ADK (adenylate kinase, E.C. 2.7 .4.3), EST (esterase, E.C. 3.1.1.1), ไอโซเม (glucosephosphate อเรส E.C. 5.3.1.9), GPI MDH (มาลา dehydrogenase, E.C. 1.1.1.37), MPI ไอโซเม (mannose ฟอสเฟตอเรส E.C. 5.3.1.8), และ PGM (8.C.2.7.5.1)ระบบบัฟเฟอร์ LiOH ของ Selander et al. (l97l) ถูกใช้เพื่อแก้ไข GPI ADK, EST, MDH และ MPI ถูกแก้ไขบนทริสเรทติ้งซิเตรต pH 7.0 (Gaffney และสก็อต 1984) เราสีสำหรับ PGM โดยใช้วิธีของ Pogson (1989) เอียงเล็กใช้สำหรับเฉพาะเอนไซม์-codinggene loci (e.g.,Pgi), กับ suflixes เป็นตัวเลขสำหรับหลาย loci (เช่น Pgm- | สำหรับโลกัสโพลย้ายเร็วที่สุด)
การแปล กรุณารอสักครู่..