2.3. Reagents
Ethanol was purchased fromPHARMCO-AAPER (CT, USA), trans-
cinnamic acid was purchased from Aldrich Chemical Company, Inc.
(WI, USA), trans-cinnamaldehyde, phenylalanine and salicylic acid
were purchased from SigmaeAldrich, Inc. (MO, USA).
2.4. Evaluation of tissue browning
A Minolta Chroma Meter CR-300 (Minolta Corp., Osaka, Japan)
was used to assess the color of lettuce stems discs. In order to ac-
count for within-stem and within-bag color variation among cut
surfaces of lettuce stem discs, two measurements per lettuce stem
disc and six measurements per bag were taken. The means of L* a*,
and b* from12 readings were recorded for each replication on each
sampling day. The Chroma meter was calibrated with a standard
white plate (Y ¼ 94.00, x ¼ 0.3158, y ¼ 0.3322). Color wasmeasured
on day 0, 4, 7, 14 and 20.
2.5. Enzyme extraction and assay
PAL activity was measured as described (Degl'Innocenti et al.,
2005) with some modification. About two g frozen lettuce stem
discs from the mixture of 25 discs were homogenized at 4 C with
16mL of 50mmol L1
borate buffer (pH 8.5) containing 5mmol L1
2-mercaptoethanol and 0.2 g of polyvinylpyrrolidone. The ho-
mogenate was filtrated through 4 layers of cheesecloth and
centrifuged at 20,000 g at 4 C for 10 min. The supernatant was
assayed for PAL activity after the addition of 0.55 mL of
50 m mol L1
L-phenylalanine and incubation at 40 C for 1 h. The
samples were measured at 290 nm using the Shimadzu PharmaS-
pec UV-160A UVeVis spectrophotometer (Shimadzu Scientific In-
strument, MD, USA) before and after incubation. One unit of PAL
activity equals the amount of PAL that produced 103
mol of
transcinnamic acid per kg fresh discs in 1 h. PAL activity was
measured daily from day 0 to day 6 of storage.
2.3. reagentsเอทานอลร้าน fromPHARMCO-AAPER (CT สหรัฐอเมริกา), ทรานส์-กรดทรานส์-ซินนามิกถูกซื้อจาก Aldrich เคมี บริษัท inc(WI สหรัฐอเมริกา), ทรานส์ cinnamaldehyde, phenylalanine และกรดซาลิไซลิซื้อจาก SigmaeAldrich, Inc. (MO สหรัฐอเมริกา)2.4. การประเมินผลของเนื้อเยื่อ browningเป็นความ Minolta เครื่องวัด CR-300 (Minolta Corp. โอซาก้า ญี่ปุ่น)ใช้การประเมินสีของดิสก์ลำต้นผักกาดหอม ในสั่ง ac-นับความผันแปรสีภายในก้านและภายในกระเป๋าผู้ตัดพื้นผิวของดิสก์ก้านผักกาด วัดสองต่อผักกาดเกิดดิสก์และวัด 6 ต่อถุงได้นำ หมายถึงของ L เป็น *,และ b * from12 อ่านบันทึกสำหรับแต่ละแบบจำลองในแต่ละวันที่สุ่มตัวอย่าง ตัววัดความถูกปรับเทียบกับมาตรฐานแผ่นสีขาว (Y ¼ 94.00, x ¼ 0.3158, y ¼ 0.3322) สี wasmeasuredในวันที่ 0, 4, 7, 14 และ 202.5. เอนไซม์สกัดและวิเคราะห์กิจกรรม PAL เป็นวัดดังที่ (Degl'Innocenti et al.,2005) ด้วย modification บาง ก้านผักกาดแช่แข็งประมาณ 2 gดิสก์จากส่วนผสมของดิสก์ 25 ถูก homogenized เป็นกลุ่มที่ 4 C ด้วย16mL ของ 50mmol L 1borate บัฟเฟอร์ (pH 8.5) ประกอบด้วย 5mmol L 12 mercaptoethanol และ 0.2 g ของ polyvinylpyrrolidone โฮ-mogenate filtrated ผ่านชั้นที่ 4 ของ cheesecloth และcentrifuged ที่ 20000 g ที่ C 4 ใน 10 นาที Supernatant ถูกassayed PAL กิจกรรมหลังจากการเพิ่ม 0.55 mL ของ50 เมตรโมล L 1L phenylalanine และบ่มที่ 40 C สำหรับ 1 h.ตัวอย่างที่วัดที่ 290 nm โดยใช้ PharmaS Shimadzu -เครื่องทดสอบกรดด่าง UVeVis pec UV 160A (Shimadzu Scientific In-strument, MD สหรัฐอเมริกา) ก่อน และ หลังบ่ม หน่วยหนึ่งของ PALกิจกรรมเท่ากับจำนวน PAL ที่ผลิต 10 3โมลของมีกรด transcinnamic ต่อกิโลกรัมสดดิสก์ในกิจกรรม PAL 1 h.วัดตั้งแต่วันที่ 0 วันที่ 6 ของการจัดเก็บ
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 รีเอเจนต์เอทานอลถูกซื้อ fromPHARMCO-AAPER (CT, USA), ทรานส์กรดซินนามิกซื้อมาจากดิชเคมีCompany, Inc (WI สหรัฐอเมริกา), ทรานส์ cinnamaldehyde, phenylalanine และกรดซาลิไซลิที่ซื้อมาจากSigmaeAldrich อิงค์ (MO, สหรัฐอเมริกา). 2.4 การประเมินการเกิดสีน้ำตาลเนื้อเยื่อMinolta Chroma Meter CR-300 (Minolta คอร์ปโอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) ถูกนำมาใช้ในการประเมินสีของแผ่นก้านผักกาดหอม เพื่อที่จะทําการนับสำหรับภายในลำต้นและภายในถุงรูปแบบสีในหมู่ตัดพื้นผิวของแผ่นก้านผักกาดหอมสองวัดต่อก้านผักกาดหอมแผ่นดิสก์และหกวัดต่อถุงถูกนำ วิธีของ L * a * และ b * from12 การอ่านที่ถูกบันทึกไว้สำหรับการจำลองแบบแต่ละในแต่ละวันการสุ่มตัวอย่าง เมตร Chroma ถูกสอบเทียบกับมาตรฐานแผ่นสีขาว(Y ¼ 94.00, x ¼ 0.3158, y ¼ 0.3322) สี wasmeasured ในวันที่ 0, 4, 7, 14 และ 20 2.5 สกัดเอนไซม์และทดสอบกิจกรรม PAL วัดตามที่อธิบายไว้ (Degl'Innocenti et al., 2005) ที่มีประจุบวก Modi สายบาง เกี่ยวกับสองกรัมแช่แข็งก้านผักกาดหอมแผ่นจากส่วนผสมของ 25 แผ่นที่ถูกปั่นที่ 4 องศาเซลเซียสกับ 16mL ของ 50mmol L 1 บัฟเฟอร์ borate (pH 8.5) ที่มี 5mmol L 1 2 mercaptoethanol และ 0.2 กรัม polyvinylpyrrolidone แต่ในขณะmogenate ถูกไฟ ltrated ถึง 4 ชั้นของผ้าและหมุนเหวี่ยงที่20,000? กรัมที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที สารละลายที่ได้รับassayed กิจกรรม PAL หลังจากที่นอกเหนือจาก 0.55 มิลลิลิตรของ50 เมตร mol L 1 L-phenylalanine และบ่มที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตัวอย่างวัดที่ 290 นาโนเมตรโดยใช้ Shimadzu PharmaS- PEC UV-160A UVeVis spectrophotometer (Shimadzu ทางวิทยาศาสตร์สายค In-strument, MD, USA) ก่อนและหลังการบ่ม หนึ่งหน่วยของ PAL กิจกรรมเท่ากับปริมาณของ PAL ที่ผลิต 10? 3 โมลของกรด transcinnamic ต่อกิโลกรัมแผ่นสดใน 1 ชั่วโมง กิจกรรม PAL ถูกวัดทุกวันตั้งแต่วันที่0 ถึงวันที่ 6 ของการจัดเก็บ
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 สารเคมี
เอทานอลซื้อ frompharmco aaper ( CT , สหรัฐอเมริกา ) , trans -
วัวกระทิงถูกซื้อจาก บริษัท เคมีดิช )
( WI , USA ) , ทรานส์ซินนามาลดีไฮด์และ phenylalanine , กรด salicylic
ซื้อมาจาก sigmaealdrich อิงค์ ( โม , USA ) .
2.4 . การประเมินผลของเยื่อสีน้ำตาล
Minolta Chroma เครื่องวัด cr-300 ( Minolta คอร์ป , โอซาก้า , ญี่ปุ่น )
ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินสีของผักกาดก้านแผ่นดิสก์ เพื่อที่จะได้ AC -
นับภายในลำต้น และภายในกระเป๋าสีรูปแบบของพื้นผิวของแผ่นตัด
ผักกาดหอมก้านสองก้านวัดต่อผักกาดหอม
ดิสก์และหกวัดต่อถุงแล้ว ค่าเฉลี่ย L * a * b *
, from12 อ่านบันทึกแต่ละซ้ำในแต่ละวัน
การสุ่มตัวอย่าง Chroma เมตรถูกเทียบกับมาตรฐาน
แผ่นสีขาว ( Y ¼ 94.00 ¼ 0.3158 x , y ¼ 0.3322 ) สีวัด
ในวันที่ 0 , 4 , 7 , 14 และ 20 .
2.5 การสกัดเอนไซม์และกิจกรรมการทดสอบ PAL
วัดตามที่อธิบายไว้ ( degl'innocenti et al . ,
2005 ) กับโมไดจึงไอออนบวก ประมาณสองกรัมแช่แข็ง ผักกาดก้าน
แผ่นจากส่วนผสมของ 25 แผ่น เป็นโฮโมที่ 4 C
16ml ของ 50mmol ผม 1
บอเรตบัฟเฟอร์ pH 8.5 ) ที่มี 5mmol 1
lพอลิวินิลไพร์โรลิโดนอย่างเดียวและ 0.2 กรัม . โฮ -
mogenate ถูกถ่ายทอด ltrated ผ่าน 4 ชั้นของผ้าและระดับที่ 20 , 000 g
4 C 10 นาทีมีปริมาณสูง
กิจกรรมเพื่อนหลังจากเติม 0.55 กรัม 50 m mol /
1
ฟีนิลอะลา และ บ่มที่ 40 องศาเซลเซียสนาน 1 ชั่วโมง
จำนวนวัดที่ 290 nm ใช้ Shimadzu pharmas -
uv-160a PEC uvevis Spectrophotometer ( Shimadzu scienti จึง C -
strument , MD , USA ) ก่อนและหลังการบ่ม หน่วยหนึ่งของกิจกรรมเพื่อน
เท่ากับจำนวนเพื่อนที่ผลิต 10 3
transcinnamic โมลของกรดต่อกิโลกรัมสดแผ่นใน 1 ชั่วโมง เพื่อนน้อง
วัดทุกวัน จากวันที่ 0 ถึงวันที่ 6 ของการจัดเก็บ
การแปล กรุณารอสักครู่..
