2.4. Cryopreservation of seeds by v

2.4. Cryopreservation of seeds by vitrification
Fresh seeds were mixed and packed into dozens of packets.
Each treatment had 4 replicates comprising of 0.02 g seed. Seeds
were placed in a 2 mL plastic cryotube and pre-cultured on an MS
medium containing 0.06 M and 0.3 M sucrose for 3 d at 25 ◦C. The
seeds were then placed in cryotubes containing 1 mL of loading
solution (LS, 0.4 M sucrose and 2 M glycerol in MS medium, pH 5.7)
for 15 min at 25 ◦C. After removing the solution, the seeds were
dehydrated at 0 ◦C for 1 h and 3 h with 2 mL cooled plant vitrification
solution (PVS2, 30% glycerol, 15% ethylene glycol, 15% dimethyl
sulfoxide in MS medium supplemented with 0.4 M sucrose, pH
5.8). One milliliter of PVS2 was replaced with 1 mL PVS2 before
the cryotubes were plunged into LN. The other 2 treatments were
processed without MS medium pre-culture prior to LN treatment.
The cryotubes were removed and warmed in a water bath at 40 ◦C
for 1 min after being stored in LN for 24 h. The PVS2 was removed,
liquid MS medium supplemented with 1.2 M sucrose was added,

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 เก็บรักษาเมล็ดพันธุ์โดยการแช่แข็ง
เมล็ดสดถูกผสมและบรรจุลงในหลายสิบของแพ็กเก็ต.
การรักษาแต่ละคนมี 4 ซ้ำประกอบด้วย 0.02 กรัมเมล็ด เมล็ด
ถูกวางไว้ใน cryotube พลาสติก 2 มิลลิลิตรและ pre-เลี้ยงบน MS
ขนาดกลางที่มี 0.06 M และ M 0.3 ซูโครส 3 d ที่ 25 ◦C
เมล็ดถูกวางไว้แล้วใน cryotubes มี 1 มิลลิลิตรของการโหลด
วิธีการแก้ปัญหา (LS 0.4 M ซูโครสและ 2 M กลีเซอรอลในอาหารสูตร MS ที่มีค่า pH 5.7)
เป็นเวลา 15 นาทีที่ 25 ◦C หลังจากลบแก้ปัญหาเมล็ดพันธุ์ที่ถูก
คายน้ำที่ 0 ◦Cเป็นเวลา 1 ชั่วโมงและ 3 ชั่วโมงมี 2 มิลลิลิตรระบายความร้อนด้วยพืชแช่แข็ง
วิธีการแก้ปัญหา (PVS2, กลีเซอรีน 30%, 15% คอลเอทิลีน 15% dimethyl
sulfoxide ใน MS เสริมขนาดกลางที่มี 0.4 M น้ำตาลซูโครส ค่า pH
5.8) หนึ่งมิลลิลิตร PVS2 ถูกแทนที่ด้วย 1 มิลลิลิตร PVS2 ก่อน
cryotubes ถูกกระโจนเข้าสู่ LN อีก 2 การรักษาที่ถูก
ประมวลผลโดยไม่ต้องเลี้ยงก่อน MS ก่อนที่จะรักษา LN.
cryotubes ถูกถอดออกและอุ่นในอ่างน้ำที่ 40 ◦C
เป็นเวลา 1 นาทีหลังจากที่ถูกเก็บไว้ใน LN เวลา 24 ชั่วโมง PVS2 ถูกลบออก
เหลวสูตร MS ที่เติมน้ำตาลซูโครส 1.2 ล้านเสริม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การเก็บรักษาเมล็ดพันธุ์โดยการเพาะเมล็ดและ
สดผสมบรรจุลงในสิบของแพ็กเก็ต มี 4 ซ้ำประกอบด้วย
รักษาแต่ละเม็ด 0.02 กรัม เมล็ด
ถูกวางอยู่ใน 2 มิลลิลิตร และ พลาสติก cryotube ก่อนเพาะเลี้ยงบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีเป็น MS
0.06 เมตรและ 0.3 M sucrose เป็นเวลา 3 D ที่ 25 ◦ C
เมล็ดถูกวางไว้แล้วใน cryotubes ประกอบด้วย 1 มิลลิลิตรโหลด
โซลูชั่น ( LS , 0 .4 เมตรและ 2 เมตรใช้กลีเซอรอลในอาหาร MS PH 5.7 )
15 นาทีที่ 25 ◦ C หลังจากเอาสารละลาย , เมล็ดแห้ง◦
0 C เป็นเวลา 1 ชั่วโมงและ 3 ชั่วโมง 2 ml ด้วยโซลูชั่นการ
พืช ( pvs2 กลีเซอรอล 15% , 30% , เอทิลีนไกลคอล , 15 ตามลำดับ
ไดเมทิลซัลฟอกไซด์ ในอาหารสูตร MS ที่เติมซูโครส 0.4 โมลพีเอช
5.8 ) หนึ่งมิลลิลิตรของ pvs2 ถูกแทนที่ด้วย pvs2 ก่อน
1 มิลลิลิตรการ cryotubes ถูกปักไปที่ . อีก 2 พื้นที่ คือ วัฒนธรรม
ประมวลผลโดยไม่ MS ก่อนก่อนในการรักษา .
cryotubes ถูกถอดออกและอบอุ่นในอ่างน้ำที่ 40 ◦ C
1 นาทีหลังจากถูกเก็บไว้ในอีก 24 ชั่วโมง pvs2 ออก
เหลวสูตร MS ที่เติมน้ำตาลซูโครสเพิ่ม 1.2 เมตร ,