5. 3 Euglena การทรานสฟอร์ม (Co-cult

5. 3 Euglena การทรานสฟอร์ม (Co-culture)
Euglena was cultured in a KH medium (pH of 6.8) for 4
to 5 days and, after cell counting, suspended in an IM liquid
medium to 5.0x106 cells/ml.
[0060]

The อะโกรแบคทีเรียม ทรานสฟอร์แมนต์ was subjected to
preculture in an อาหาร LB. The resulting ทรานสฟอร์แมนต์ was
inoculated in an IM medium (pH of 5.3) (Tables 2 to 4) and
cultured for about 10 to 15 hours. The cultured bacteria cells

were collected by centrifugation (7,700xg, 20°C, 1 min) and
suspended in the IM liquid medium so that 0D660 was 0.6.

1 ml of the Euglena suspended in the liquid medium and
1 ml of the อะโกรแบคทีเรียม ทรานสฟอร์แมนต์ suspended in the liquid
medium were mixed (a total of 2 ml of culture solution), and

acetosyringone was added at a final concentration of 100 ILE,
followed by co-culturing for 48 hours while gently stirring with
a rotator (2.5x106 cells/ml, OD660 = 0.3) . After the completion of

the culture, 200 111 of the culture solution (0.5x106 cells) or 200
[11 of a 10-fold dilution of the culture solution (0.50x106 cells)
was cultured in a KH selective plate medium (ซีโอซิน 25 lg/ml,
ซีโฟแทกซีม 100 [1g/ml)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5. ยูกลีนา 3 การทรานสฟอร์ม (ร่วมวัฒนธรรม) ยูกลีนาเป็นอ่างในสื่อ KH (pH 6.8) 4วันที่ 5 และ หลัง จากการตรวจนับเซลล์ หยุดชั่วคราวในของเหลวอิ่มตัวปานกลางถึง 5.0x106 เซลล์/มล.[0060]อะโกรแบคทีเรียมทรานสฟอร์แมนต์ถูกต้อง preculture ในการอาหารปอนด์ ทรานสฟอร์แมนต์ได้ถูกinoculated ในการ IM (pH 5.3) (ตารางที่ 2 ถึง 4) และอ่างประมาณ 10-15 ชั่วโมง เซลล์แบคทีเรียอ่างถูกรวบรวม โดย centrifugation (7, 700xg, 20° C, 1 นาที) และหยุดชั่วคราวในการ IM ของเหลวที่ 0D 660 ได้ 0.61 ml ของยูกลีนาที่ถูกระงับในกลางของเหลว และ1 ml ของทรานสฟอร์แมนต์อะโกรแบคทีเรียมที่ถูกระงับในของเหลวกลางรวม (จำนวน 2 ml ของวัฒนธรรม), และเพิ่ม acetosyringone ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของเมา 100 ตาม culturing ร่วมภายใน 48 ชั่วโมงขณะกวนเบา ๆ ด้วยมีตัวหมุน (2.5x106 เซลล์/ml, OD660 = 0.3) หลังเสร็จสิ้นวัฒนธรรม 200 111 ของการแก้ปัญหาวัฒนธรรม (0.5x106 เซลล์) หรือ 200[11 ของเจือจาง 10-fold โซลูชันวัฒนธรรม (0.50x106 เซลล์)มีอ่างใน KH จานเลือกสื่อ (ซีโอซิน 25 lg/ml ซีโฟแทกซีม 100 [1 g/ml)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5 3 ยูกลีนาการทรานสฟอร์ม (ร่วมวัฒนธรรม)
ยูกลีนาเป็นที่เพาะเลี้ยงในกลาง KH (pH 6.8) 4
ถึง 5 วันและหลังจากการนับเซลล์ที่ลอยอยู่ในของเหลว IM
ปานกลางถึง 5.0x106 เซลล์ / มิลลิลิตร
[0060] อะโกรแบคทีเรียมทรานสฟอร์แมนต์ได้ภายใต้การpreculture ในอาหารปอน ส่งผลให้ทรานสฟอร์แมนต์ได้รับเชื้อในกลาง IM (pH 5.3) (ตารางที่ 2-4) และเพาะเลี้ยงประมาณ 10 ถึง 15 ชั่วโมง เซลล์เพาะเลี้ยงแบคทีเรียที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยง (7,700xg 20 องศาเซลเซียส 1 นาที) และแขวนลอยในอาหารเหลว IM เพื่อให้ 0D660 เป็น 0.6. 1 มิลลิลิตรของยูกลีนาที่ลอยอยู่ในอาหารเหลวและ1 มิลลิลิตรของอะโกร แบคทีเรียมทรานสฟอร์แมนต์ที่ลอยอยู่ในของเหลวสื่อผสม (รวม 2 มล. ของการแก้ปัญหาวัฒนธรรม) และacetosyringone ถูกเพิ่มเข้ามาในความเข้มข้นสุดท้ายของ 100 ILE, ตามด้วยการร่วมการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 48 ชั่วโมงในขณะที่เบา ๆ ตื่นเต้นกับโรซาลี (2.5x106 เซลล์ / ml OD660 = 0.3) หลังจากเสร็จสิ้นการวัฒนธรรม, 200 111 ของการแก้ปัญหาวัฒนธรรม (0.5x106 เซลล์) หรือ 200 [11 ของการเจือจาง 10 เท่าของการแก้ปัญหาวัฒนธรรม (0.50x106 เซลล์) เป็นที่เพาะเลี้ยงในกลางแผ่นเลือก KH (ซีโอซิน 25 LG / ml ซีโฟแทกซีม 100 [1 กรัม / มล.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5 . 3 การทรานสฟอร์มยูกลีนา ( วัฒนธรรม Co )
ยูกลีนาเลี้ยงใน KH ปานกลาง ( pH 6.8 ) 4
5 วัน หลังจากนับเซลล์แขวนลอยในตัวกลางของเหลว
ม 5.0x106 เซลล์ / มิลลิลิตร 0060
[ ]

อะโกรแบคทีเรียมทรานสฟอร์แมนต์ภายใต้
พันธุ์ที่เกิดในอาหาร lb . ทรานสฟอร์แมนต์คือ
เชื้อในตัวกลาง IM ( พีเอช 5.3 ) ( ตารางที่ 2 ) และ
เลี้ยงประมาณ 10 ถึง 15 ชั่วโมง การเพาะเลี้ยงแบคทีเรีย

ครั้งนี้ ดังนี้ ( 7700xg 20 ° C , 1 นาที ) และ
ชั่วคราวในเหลว ผมที่ 0d660 คือ 0.6

1 มิลลิลิตรของยูกลีนาแขวนลอยในของเหลว )
1 มิลลิลิตรของอะโกรแบคทีเรียมทรานสฟอร์แมนต์แขวนลอยในของเหลว
สื่อผสม ( รวม 2 มิลลิลิตรของสารละลายวัฒนธรรม ) และ

acetosyringone ถูกเพิ่มในขั้นสุดท้ายความเข้มข้น 100 ด้วย ,
ตามด้วย Co เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ในขณะที่ค่อยๆกวนด้วย
เป็น rotator ( 2.5x106 เซลล์ / มิลลิลิตร od660 = 0.3 ) หลังจากจบ

วัฒนธรรม , 200 111 ของวัฒนธรรมแก้ปัญหา ( 0.5x106 เซลล์ ) หรือ 200
[ 11 เป็น 10 เท่า ( ของวัฒนธรรมแก้ปัญหา ( 0.50x106 เซลล์ )
เลี้ยงใน KH ใช้จานกลาง ( ซีโอซิน 25 LG / ml
ซีโฟแทกซีม 100 [ 1
/ ml )