Glucose oxidation increased with in

Glucose oxidation increased with increasing extracellular glucose concentrations even in the presence of PA ([5], present paper). This raises the question why is glucose oxidation not expressing saturation kinetic? In order to study this phenomenon we investigated the oxidation of acetic acid which was immediately converted to acetyl coenzyme A (acetyl-CoA) in the above conditions. Both low glucose and PA concentrations reduced acetate oxidation (Fig. 2A and B) as shown by introducing either 0.4 mmol/l PA or 5.0 mmol/l glucose exposure. However, at higher substrate concentrations acetate oxidation was only further reduced by increases in the PA concentration rather than further raises in the glucose levels showing that only acetyl-CoA originating from β-oxidation could dilute the existing acetyl-CoA pool from acetate. Moreover, the dilution in acetyl-CoA oxidation was only minimal at high PA concentrations. This data indicates that the increase in glucose oxidation was mediated through acetyl-CoA originated from PDH and further, there must be an additional mechanism promoting an increased in glucose oxidation without dilution of the acetate dependent acetyl-CoA pool. We described recently that diabetic myotubes express an increased basal glucose oxidation despite a reduced TCA flux [19]. This was based on observations that pyruvate could be both decarboxylated to acetyl-CoA by PDH and carboxylated to oxaloacetate (OAA) by pyruvate carboxylase (PC). The latter reaction increased the flux through TCA by an anaplerotic increase in OAA level. OAA can condensate with acetyl-CoA and form citrate which can be further oxidized or released to the cytosol and media, thereby allowing pyruvate (glucose) to be incompletely oxidized. Based on above observations it could be speculated that glucose promoted its own oxidation by increasing the TCA flux via anaplerosis of OAA from pyruvate. To prove this hypothesis we firstly investigated glucose oxidation with or without inhibition of PC by phenylacetic acid (PAA, inhibitor of PC [10]) (Fig. 3A). The increase in glucose oxidation with increasing glucose level could indeed be partly explained by anaplerosis though PC. Moreover, high glucose availability increased the citrate level in the media (Fig. 3B) and this increase in citrate could also be partly inhibited by PAA. Further, glucose uptake at 5.0 and 15.0 mmol/l glucose was 2.4 ± 0.3 and 3.5 ± 0.3 nmol/min/mg protein, (mean ± SE, N = 8) respectively, corresponding to that 2% and 6% of taken up glucose was found as citrate. These data suggest that the increase in glucose oxidation with increased glucose availability is partly based on anaplerotic supplementation of TCA through PC and that both complete and incomplete pyruvate (glucose) oxidation is improved by the anaplerotic process. A similar phenomena were seen in β-cells exposed to increasing glucose concentrations [10]. Acetyl-CoA can allosteric activate PC, providing a mechanism of how PC could be stimulated by increasing acetyl-CoA from glucose [20]. However, at present it is unclear why increasing glucose availability did not dilute the acetyl-CoA pool from acetate. Further studies are needed to clarify whether PC and PDH are either compartmentalized together, coupled or whether PC preferentially uses acetyl-CoA from pyruvate rather than from β-oxidation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลูโคสออกซิเดชันเพิ่มขึ้น ด้วยการเพิ่มความเข้มข้นของน้ำตาลใน extracellular แม้ในต่อหน้าของ PA ([5], ปัจจุบันกระดาษ) คำถามทำไมเป็นกลูโคสออกซิเดชันไม่แสดงความเข้มเคลื่อนไหวยกนี้ เพื่อศึกษาปรากฏการณ์นี้ เราตรวจสอบการเกิดออกซิเดชันของกรดน้ำส้มที่ถูกทันทีแปลงเป็น acetyl coenzyme A (acetyl-CoA) ในเงื่อนไขข้างต้น ทั้งต่ำน้ำตาลกลูโคส และ PA ความเข้มข้นลด acetate ออกซิเดชัน (Fig. 2A และ B) แสดง โดยแนะนำ 0.4 mmol/l PA หรือแสงกลูโคส 5.0 mmol/l อย่างไรก็ตาม ที่สูงกว่าพื้นผิวความเข้มข้น acetate ออกซิเดชันได้เฉพาะเพิ่มเติมลดลง โดยเพิ่มความเข้มข้น PA แทนยกเพิ่มเติมในระดับกลูโคสแสดง acetyl-CoA เฉพาะเกิดจากβ-ออกซิเดชันสามารถ dilute สระ acetyl-CoA ที่มีอยู่จาก acetate นอกจากนี้ เจือจางในออกซิเดชันของ acetyl-CoA ได้เท่าน้อยที่ความเข้มข้นสูงของ PA ข้อมูลนี้บ่งชี้ว่า การเพิ่มขึ้นของกลูโคสออกซิเดชัน mediated ที่ผ่านมาจาก PDH acetyl-CoA และเพิ่มเติม ต้องมีกลไกเพิ่มเติมการส่งเสริมการเพิ่มขึ้นในการเกิดออกซิเดชันของกลูโคสโดยไม่เจือจางของ acetyl-CoA acetate ขึ้นสระ เราอธิบายเมื่อเร็ว ๆ นี้ว่า เบาหวาน myotubes เอ็กซ์เพรสการออกซิเดชันโรคกลูโคสเพิ่มขึ้นแม้ มีการไหล TCA ลด [19] นี้เป็นไปตามสังเกต pyruvate ที่อาจเป็นทั้ง decarboxylated กับ acetyl-CoA โดย PDH และ carboxylated กับ oxaloacetate (OAA) โดย pyruvate carboxylase (PC) ปฏิกิริยาหลังเพิ่มขึ้นไหลผ่าน TCA โดยเพิ่ม anaplerotic ในระดับ OAA OAA สามารถคอนเดนเสทกับ acetyl-CoA และฟอร์มซิเตรตซึ่งสามารถเพิ่มเติมออกซิไดซ์ หรือออกไปยังไซโตซอลและสื่อ จึงให้ pyruvate (น้ำตาลกลูโคส) เพื่อจะออกซิไดซ์สมบูรณ์ ตามข้างบนสังเกตอาจคาดว่า กลูโคสออกซิเดชันของตัวเองที่ส่งเสริม โดยการเพิ่มฟลักซ์ TCA ผ่าน anaplerosis ของ OAA จาก pyruvate เพื่อพิสูจน์สมมติฐานนี้เราประการแรกตรวจสอบน้ำตาลกลูโคสออกซิเดชันมี หรือไม่ มีการยับยั้งของ PC ด้วยกรด phenylacetic (PAA ผลของพีซี [10]) (Fig. 3A) แน่นอนอาจเพิ่มกลูโคสออกซิเดชันกับเพิ่มระดับน้ำตาลกลูโคสบางส่วนอธิบายความ anaplerosis แม้ว่า PC ได้ นอกจากนี้ กลูโคสสูงพร้อมเพิ่มระดับซิเตรต (Fig. 3B) สื่อ และซิเตรตเพิ่มนี้อาจยังมีบางส่วนห้าม โดย PAA เพิ่มเติม ดูดซับกลูโคสที่ 5.0 และ 15.0 กลูโคส mmol/l เป็น 2.4 ± 0.3 และ 3.5 ± 0.3 นาที/nmol/mg โปรตีน , (หมายถึง ± SE, N = 8) ตามลำดับ ที่สอดคล้องกับ 2% และ 6% ของกลูโคสที่ถ่ายขึ้นที่พบเป็นซิเต ข้อมูลเหล่านี้แนะนำว่า เพิ่มออกซิเดชันของกลูโคสกับกลูโคสเพิ่มขึ้นพร้อมบางส่วนยึด anaplerotic แห้งเสริมของ TCA ผ่าน PC และออกซิเดชันทั้งสมบูรณ์ และไม่สมบูรณ์ pyruvate (กลูโคส) ปรับกระบวนการ anaplerotic ปรากฏการณ์คล้ายที่เห็นในเซลล์βที่สัมผัสเพื่อเพิ่มความเข้มข้นกลูโคส [10] Allosteric acetyl-CoA สามารถเปิดใช้งาน PC ให้กลไกของวิธี PC อาจจะถูกกระตุ้นโดย acetyl-CoA เพิ่มขึ้นจากกลูโคส [20] อย่างไรก็ตาม ในปัจจุบันเป็นที่ชัดเจนทำไมเพิ่มกลูโคส พร้อมได้ไม่ dilute สระ acetyl-CoA จาก acetate ศึกษาเพิ่มเติมจะต้องชี้แจงว่า PDH และ PC มีทั้ง compartmentalized ด้วยกัน ควบคู่ หรือว่า PC โน้ตใช้ acetyl-CoA จาก pyruvate แทน จากβ-ออกซิเดชัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ออกซิเดชันกลูโคสเพิ่มขึ้นด้วยการเพิ่มความเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคส extracellular แม้ในที่ที่ PA ([5], กระดาษปัจจุบัน) นี้ทำให้เกิดคำถามว่าทำไมออกซิเดชันกลูโคสไม่ได้แสดงการเคลื่อนไหวอิ่มตัว? เพื่อที่จะศึกษาปรากฏการณ์นี้เราตรวจสอบการเกิดออกซิเดชันของกรดอะซิติกซึ่งเป็นแปลงทันทีเพื่อ acetyl โคเอนไซม์ (acetyl-CoA) ในเงื่อนไขข้างต้น ทั้งกลูโคสต่ำและความเข้มข้นของ PA ออกซิเดชันอะซิเตทลดลง (รูป. 2A และ B) ตามที่แสดงโดยการแนะนำทั้ง 0.4 mmol / L PA หรือ 5.0 mmol / L การเปิดรับกลูโคส อย่างไรก็ตามในความเข้มข้นของสารตั้งต้นที่สูงขึ้นออกซิเดชันอะซิเตทเป็นเพียงการลดลงต่อไปโดยการเพิ่มขึ้นของความเข้มข้น PA มากกว่ายกต่อไปในระดับน้ำตาลแสดงให้เห็นว่ามีต้นกำเนิด acetyl-CoA เฉพาะจากออกซิเดชันβอาจเจือจางสระว่ายน้ำ acetyl-CoA ที่มีอยู่จากอะซิเตท นอกจากนี้การลดสัดส่วนในการออกซิเดชั่ acetyl-CoA เป็นเพียงเล็กน้อยที่ระดับความเข้มข้นสูง PA ข้อมูลนี้แสดงให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นของการเกิดออกซิเดชันกลูโคสถูกสื่อกลางผ่าน acetyl-CoA มาจาก PDH และต่อไปจะต้องมีกลไกในการส่งเสริมเพิ่มเติมที่เพิ่มขึ้นในการเกิดออกซิเดชันกลูโคสโดยไม่ต้องเจือจางอะซิเตทขึ้นอยู่กับสระว่ายน้ำ acetyl-CoA เราอธิบายไว้เมื่อเร็ว ๆ นี้ว่า myotubes เบาหวานแสดงออกซิเดชันกลูโคสพื้นฐานเพิ่มขึ้นแม้จะมีการไหลของ TCA ลดลง [19] นี้ขึ้นอยู่กับข้อสังเกตว่าอาจจะมีการไพรูทั้ง decarboxylated เพื่อ acetyl-CoA โดย PDH และ carboxylated เพื่อ oxaloacetate (OAA) โดยคาร์บอกซิไพรู (PC) ปฏิกิริยาหลังเพิ่มขึ้นไหลผ่าน TCA จากการเพิ่มขึ้นในระดับ anaplerotic OAA OAA สามารถคอนเดนเสทที่มี acetyl-CoA และซิเตรตในรูปแบบที่สามารถออกซิไดซ์ต่อไปหรือปล่อยให้เซลล์และสื่อซึ่งจะช่วยให้ไพรู (กลูโคส) ที่จะออกซิไดซ์ไม่สมบูรณ์ ตามข้อสังเกตดังกล่าวข้างต้นก็อาจจะคาดการณ์ว่าระดับน้ำตาลในการส่งเสริมการเกิดออกซิเดชันของตัวเองโดยการเพิ่มการไหลของ TCA ผ่าน anaplerosis ของ OAA จากไพรู เพื่อพิสูจน์สมมติฐานนี้ตอนแรกที่เราตรวจสอบการเกิดออกซิเดชันกลูโคสมีหรือไม่มีการยับยั้งการทำงานของเครื่องคอมพิวเตอร์โดยกรด phenylacetic (PAA ยับยั้งของเครื่องคอมพิวเตอร์ [10]) (รูป. 3A) การเพิ่มขึ้นของการเกิดออกซิเดชันกลูโคสที่มีระดับน้ำตาลที่เพิ่มขึ้นแน่นอนสามารถอธิบายได้บางส่วนโดย anaplerosis แม้ว่าเครื่องคอมพิวเตอร์ นอกจากนี้ความพร้อมน้ำตาลสูงเพิ่มระดับ citrate ในสื่อ (รูป. 3B) และเพิ่มขึ้นใน citrate นี้อาจจะมีการยับยั้งบางส่วนโดย PAA นอกจากนี้การดูดซึมกลูโคสที่ 5.0 และ 15.0 มิลลิโมล / ลิตรน้ำตาลกลูโคสเป็น 2.4 ± 0.3 และ 3.5 ± 0.3 นาโนโมล / นาที / มิลลิกรัมโปรตีน (mean ± SE, จำนวน = 8) ตามลำดับซึ่งสอดคล้องกับที่ 2% และ 6% ของนำขึ้นกลูโคส ก็พบว่าเป็นซิเตรต ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นของการเกิดออกซิเดชันกลูโคสมีความพร้อมกลูโคสเพิ่มขึ้นเป็นส่วนหนึ่งในการเสริม anaplerotic ของ TCA ผ่านเครื่องคอมพิวเตอร์และว่าทั้งสองไพรูสมบูรณ์และไม่สมบูรณ์ (กลูโคส) ออกซิเดชันจะดีขึ้นโดยกระบวนการ anaplerotic ปรากฏการณ์ที่คล้ายกันได้เห็นในβเซลล์สัมผัสกับการเพิ่มความเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคส [10] acetyl-CoA สามารถเปิดใช้งานเครื่องคอมพิวเตอร์ allosteric ให้กลไกของวิธีการที่เครื่องคอมพิวเตอร์จะได้รับการกระตุ้นโดยการเพิ่ม acetyl-CoA จากกลูโคส [20] แต่ในปัจจุบันก็เป็นที่ชัดเจนว่าทำไมว่างกลูโคสที่เพิ่มขึ้นไม่ได้เจือจางสระว่ายน้ำ acetyl-CoA จากอะซิเตท การศึกษาเพิ่มเติมมีความจำเป็นที่จะชี้แจงว่าเครื่องคอมพิวเตอร์และ PDH จะ compartmentalized กันทั้งคู่หรือไม่ว่าจะเป็นเครื่องคอมพิวเตอร์พิเศษใช้ acetyl-CoA จากไพรูมากกว่าจากβ-ออกซิเดชัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ออกซิเดชันกลูโคสเพิ่มขึ้นพบว่า กลูโคสความเข้มข้นในการแสดงตนของป่าแม้แต่ ( [ 5 ] ปัจจุบันกระดาษ ) นี้เพิ่มคำถามทำไมไม่แสดงปฏิกิริยาออกซิเดชันกลูโคสอิ่มตัวจลน์ ? เพื่อศึกษาปรากฏการณ์นี้เราศึกษาออกซิเดชันของกรดซึ่งได้ทันทีแปลงเป็นอะโค ( อะ COA ) ในเงื่อนไขข้างต้นทั้งต่ำและลดความเข้มข้นกลูโคสปาเทต ( รูปที่ 2A ออกซิเดชันและ b ) แสดงโดยแนะนำให้ 0.4 mmol / L หรือวัดป่า 5.0 มิลลิโมล / ลิตรในการเปิดรับแสง อย่างไรก็ตามที่ความเข้มข้นสูงสารอะซิเตตเกิดเพียงลดลง โดยเพิ่มความเข้มข้นในป่ามากกว่าเพิ่มเติมเพิ่มในระดับกลูโคสแสดงเท่านั้นอะบีตา - ออกซิเดชันที่เกิดจากยาอาจเจือจางที่มีอยู่อะ COA Pool จากอะซิเทต นอกจากนี้ ในสัดส่วนอะ COA เกิดเพียงเล็กน้อยที่ความเข้มข้น PA สูงข้อมูลนี้แสดงว่าเพิ่มออกซิเดชันกลูโคส โดยผ่านทางความหมาย COA มาจาก PDH และต่อไปจะต้องเพิ่มกลไกส่งเสริมเพิ่มในออกซิเดชันกลูโคสโดยไม่เจือจางของอะซีทิล COA ) สระ เราอธิบายเมื่อเร็ว ๆนี้ที่แสดง myotubes เบาหวานเพิ่มขึ้นกลูโคสออกซิเดชันแรกเริ่มแม้จะลดลง TCA ฟลักซ์ [ 19 ]นี้ได้จากการสังเกตว่า ไพรูเวตอาจเป็นทั้งสารสกัดจากเปลือกเพื่อความหมายและ COA โดย PDH carboxylated กับซาโลอะซิเตต ( ประธาน ) โดยไพรูเวทคาร์บอกซีเลส ( PC ) ปฏิกิริยาหลังเพิ่มไหลผ่าน TCA โดยการเพิ่มขึ้นในระดับ anaplerotic แซ็ก . ประธานสามารถใช้กับเซอร์ทิลและรูปแบบซิเตรตซึ่งสามารถเพิ่มเติมออกซิเจน หรือปล่อยให้ออกไป และสื่อเพื่ออนุญาตให้ไพรูเวต ( กลูโคส ) จะสลายตัวไม่สมบูรณ์ . ตามข้างต้น ) มันอาจจะสันนิษฐานว่ากลูโคสส่งเสริมการออกซิเดชันของตนเอง โดยการเพิ่มค่าผ่านทางของ TCA anaplerosis แซ็กจากไพรูเวท . เพื่อพิสูจน์สมมติฐานนี้เราแรกศึกษาการเกิดปฏิกิริยาออกซิเดชันกลูโคสที่มีหรือไม่มีการยับยั้งของพีซี โดยกรดฟีนิลแอซีติก ( ฟุต , ยับยั้งของ PC [ 10 ] ) ( รูปที่ 3 )เพิ่มออกซิเดชันกลูโคสเพิ่มระดับกลูโคสสามารถแน่นอนสามารถอธิบายได้บางส่วน โดย anaplerosis แม้ว่าเครื่องคอมพิวเตอร์ นอกจากนี้ การมีกลูโคสสูง เพิ่มระดับ citrate ในสื่อ ( รูปที่ 3B ) และเพิ่มซิเทรตก็มีส่วน ( พา ต่อการดูดซึมกลูโคสใน 5.0 เป็นมิลลิโมล / ลิตรและกลูโคส โปรตีน 2.4 ± 0.3 และ 3.5 ± 0.3 nmol / min / มก. ( หมายถึง±เซn = 8 ) ตามลำดับ สอดคล้องกับที่ 2 % และ 6 % รับกลูโคส พบเป็นซิเตรต . ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า การเพิ่มการใช้กลูโคสกลูโคสเพิ่มขึ้น ส่วนหนึ่งขึ้นอยู่กับการเสริม anaplerotic ของ TCA ผ่านพีซี และทั้งสมบูรณ์และไม่สมบูรณ์ ไพรูเวท ( กลูโคส ) ออกซิเดชันจะดีขึ้น โดยกระบวนการ anaplerotic .ปรากฏการณ์ที่คล้ายกันอยู่ในบีตาเซลล์เปิดรับเพิ่มความเข้มข้นกลูโคส [ 10 ] สามารถเปิดใช้งานตัวควบคุมอะ COA PC ให้กลไกของเครื่องคอมพิวเตอร์จะถูกกระตุ้นโดยการเพิ่มอะ COA จากกลูโคส [ 20 ] อย่างไรก็ตาม ปัจจุบัน มันยังไม่ชัดเจน ทำไมเพิ่มความพร้อมกลูโคสไม่ได้เจือจางยาพูลจากทิลอะซิเทตการศึกษาเพิ่มเติมจะต้องชี้แจงว่าเครื่องคอมพิวเตอร์และ PDH จะ compartmentalized ด้วยกัน คู่ หรือ ว่า PC ใช้อะ preferentially COA จากไพรูเวตมากกว่าจากบีตา - ออกซิเดชัน .