Strains were grown on chocolate aga

Strains were grown on chocolate agar slants. Bacteria were
collected and pelleted using a microcentrifuge and were cultured in
nutrient broth for 24 h at 37°C with agitation at 100 rpm. Cell suspensions were centrifuged at 4,500 rpm for 5 min at 4°C, and the
pellets obtained were used for DNA extraction by the three
methods. Three test tubes containing cell pellets (approximately 0.1
g each) were used for DNA extraction. In the microwave lysis
method, cell pellets were washed with 1 ml of TE (10 mM Tris, pH
8, 10 mM EDTA) and were resuspended in 100 µl of TE. After addition of 50 µl of 10% SDS the mixture was incubated for 30 min at 65°C. The lysates were centrifuged and supernatants were removed. The microtubes were then placed in a microwave oven (with
specifications; LG grill, model No. MG-604AZ, input 220v-50/bHz,
microwave 1350 w, RF output 900 w,2,4500 MH) and heated twice
for 1 min at 900 W or three times for 1 min at 750 W. The pellets
were dissolved in 200 µl of TE and were extracted with an equal
volume of phenol/chloroform/ isoamyl alcohol (25:24:1) for 15 min.
The aqueous phase was recovered by centrifugation for 20 min and
precipitated with ethanol

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์ที่ได้รับการปลูกใน slants วุ้นช็อคโกแลต แบคทีเรียที่ถูกเก็บรวบรวมและใช้เม็ดไมโครและเพาะเลี้ยงในน้ำซุปสารอาหารเป็นเวลา24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสมีการกวน 100 รอบต่อนาทีที่ เซลล์แขวนลอยถูกหมุนเหวี่ยงที่ 4,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาทีที่ 4 ° C และเม็ดได้ถูกนำมาใช้ในการสกัดดีเอ็นเอโดยสามวิธี สามหลอดทดลองที่มีเซลล์เม็ด (โดยประมาณ 0.1 กรัม) ถูกนำมาใช้ในการสกัดดีเอ็นเอ ในการสลายไมโครเวฟวิธีเม็ดเซลล์ถูกล้างด้วย 1 มิลลิลิตรของ TE (10 มิลลิทริสพีเอช 8, 10 มิลลิ EDTA) และ resuspended 100 ไมโครลิตรของ TE หลังจากที่นอกเหนือจาก 50 ไมโครลิตร 10% SDS ส่วนผสมที่ถูกบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 65 องศาเซลเซียส lysates ถูกปั่นและ supernatants ถูกถอดออก Microtubes ถูกวางไว้แล้วในเตาอบไมโครเวฟ (มีข้อกำหนดย่างLG รุ่นฉบับ MG-604AZ เข้า 220v-50 / bHz, ไมโครเวฟ 1,350 W, เอาท์พุท RF 900 W, 2,4500 MH) และให้ความร้อนสองครั้งเป็นเวลา 1 นาที ที่ 900 W หรือสามครั้งเป็นเวลา 1 นาทีที่ดับบลิว 750 เม็ดละลายใน200 ไมโครลิตรของ TE และสกัดด้วยเท่ากับปริมาณของฟีนอล/ คลอโรฟอร์ม / isoamyl เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ (25: 24: 1). เป็นเวลา 15 นาทีในช่วงน้ำถูกกู้คืนโดยการหมุนเหวี่ยงสำหรับ 20 นาทีและตกตะกอนด้วยเอทานอล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สายพันธุ์ที่ปลูกใน slants ช็อกโกแลตวุ้น แบคทีเรียถูก
รวบรวมและอัดเม็ดโดยใช้ไมโครเซนตริฟิวจ์ และเพาะเลี้ยงใน broth 24 H
สารอาหารที่ 37 ° C ด้วยการกวนที่ 100 รอบต่อนาที เซลล์แขวนลอยอยู่ที่ 4 , 500 รอบต่อนาที ระดับ 5 นาทีที่ 4 ° C และ
เม็ดได้ ใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอจาก 3
วิธี 3 หลอดทดลองที่มีเซลล์เม็ด ( ประมาณ 0.1
กรัมแต่ละ ) ใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอ ในไมโครเวฟการสลาย
วิธี เซลล์เม็ดถูกล้างด้วย 1 มิลลิลิตรของ Te ( 10 มม. นอกจากนี้ พีเอช
8 , 10 mM EDTA ) และ resuspended 100 µ L ของเต้ หลังจากเพิ่ม 50 µผม 10% SDS ส่วนผสมบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 65 ° C ) และ lysates ระดับ supernatants ถูกถอดออก การ microtubes ถูกวางไว้แล้วในเตาไมโครเวฟ (
กำหนด ;แอลจี ย่างแบบไม่ mg-604az bhz , 220v-50 / ใส่
ไมโครเวฟ 1350 W , RF output 900 W , 24 , 500 ค่ะ )
2 อุ่น 1 นาที 900 W หรือสามครั้งเป็นเวลา 1 นาทีที่ 750 W . เม็ด
ถูกละลายใน 200 µ l te และสกัดด้วยปริมาณเท่ากับ
ของ ฟีนอล / ยาสลบ / แอลกอฮอล์ในปริมาณ ( 25:24:1 ) 15 นาที
เฟสน้ำก็หาย โดยปั่น 20 นาที
ตกตะกอนด้วยเอทานอล