The reagents were gently mixed and

The reagents were gently mixed and incubated in order, 1 h at 42 °C, 10 min at 70 °C and the synthesized cDNA was stored at 4 °C for further use. The constitutively expressed housekeeping gene, β-actin was used both as a positive control and for sample normalization. The amplified product sizes and the sequences of primers used for β-actin, TNFα, IL-10 and lysozyme c and g were studied. Each PCR reaction consisted of 13.1 μL dH2O, 2 μL 10 × PCR buffer, 0.5 μL 10 mM dNTPs, 1.5 μL MgCl2, 0.2 μL (10 pmol) of each forward and reverse primers, followed by 0.5 μL (0.05 U/μL) JumpStart™ AccuTaq la DNA polymerase and 2 μL cDNA. The amplification profile was: 95 °C for 3 min followed by 30 cycles denaturation for 45 s at 94 °C, at appropriate annealing temperature for 45 s (Table 2) and extension at 72 °C for 45 s, followed by a final extension for 10 min at 72 °C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Reagents ถูกผสมเบา ๆ และ incubated ตามลำดับ h 1 ที่ 42 ° C, 10 นาทีที่ 70 ° C และการสังเคราะห์ cDNA ถูกเก็บที่ 4 ° C สำหรับใช้เพิ่มเติม ทำความสะอาด constitutively แสดงยีน β-แอกตินถูกใช้ทั้ง เป็นตัวควบคุมบวก และฟื้นฟูอย่าง มีศึกษาขนาดของผลิตภัณฑ์เอาต์และลำดับของไพรเมอร์ที่ใช้แอกติ นβ 10 TNFα, IL และ lysozyme c และ g แต่ละปฏิกิริยา PCR ประกอบด้วย 13.1 μL dH2O บัฟเฟอร์ PCR 10 × μL 2, 0.5 μL dNTPs 10 มม. 1.5 μL MgCl2, μL 0.2 (10 pmol) ของแต่ละไปข้างหน้า และย้อนกลับไพรเมอร์ ตาม ด้วย 0.5 ลา μL (0.05 U/μL) JumpStart ™ AccuTaq ดีเอ็นเอพอลิเมอเรสและ cDNA 2 μL มีโพรไฟล์การขยาย: 95 ° C สำหรับ 3 นาทีตาม ด้วยรอบ 30 denaturation สำหรับ 45 s ที่° C 94 อุณหภูมิที่เหมาะสมหลอม s (ตารางที่ 2) และส่วนขยายที่ 72 ° C สำหรับ 45 45 s ตาม ด้วยนามสกุลเป็นขั้นสุดท้ายใน 10 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

น้ำยาถูกผสมเบา ๆ และบ่มในการสั่งซื้อเวลา 1 ชั่วโมงที่ 42 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีที่ 70 องศาเซลเซียสและสังเคราะห์ cDNA ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสสำหรับใช้งานต่อไป ยีนทำความสะอาดแสดง constitutively, β-โปรตีนที่ถูกใช้เป็นทั้งการควบคุมที่ดีและตัวอย่างการฟื้นฟู ขนาดสินค้าที่ขยายและลำดับของไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับβ-โปรตีน, TNFα IL-10 และไลโซไซม์และ G การศึกษา แต่ละปฏิกิริยา PCR ประกอบด้วย 13.1 ไมโครลิตร dH2O 2 ไมโครลิตร 10 × PCR บัฟเฟอร์ 0.5 ไมโครลิตร 10 มิลลิ dNTPs 1.5 ไมโครลิตร MgCl2 0.2 ไมโครลิตร (10 pmol) ของแต่ละข้างหน้าและย้อนกลับไพรตามด้วย 0.5 ไมโครลิตร (0.05 U / ไมโครลิตร) JumpStart ดีเอ็นเอโพลิเมอร์™ AccuTaq ลาและ 2 ไมโครลิตร cDNA รายละเอียดการขยายเป็น 95 ° C เป็นเวลา 3 นาทีตามด้วย 30 สูญเสียสภาพธรรมชาติรอบ 45 s ที่ 94 ° C ที่อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการอบ 45 วินาที (ตารางที่ 2) และการขยายที่ 72 ° C เป็นเวลา 45 วินาที, ตามด้วยนามสกุลสุดท้าย เป็นเวลา 10 นาทีที่ 72 ° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มีสารเคมีปนอ่อนโยนและบ่มเพื่อ 1 ชั่วโมง 42 ° C 10 นาทีที่ 70 องศา C และสังเคราะห์ cDNA ที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศา C สำหรับการใช้งานต่อไป การ constitutively แสดงความยีนบีตา - actin ถูกใช้เป็นทั้งบวกและตัวอย่างการควบคุมการฟื้นฟู . " การขยายขนาดของผลิตภัณฑ์ และลำดับของไพรเมอร์ใช้บีตา - actin TNF αเตอร์ , และ , ไลโซไซม์ C และ G ได้แต่ละเพื่อตรวจหาจำนวน 13.1 μผม dh2o 2 μ L 10 × PCR buffer , 0.5 μ L 10 dntps มม. 1.5 μ L ชุดμ 0.2 ลิตร ( 10 pmol ) ของแต่ละไปข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์ ตามด้วยμ 0.5 L ( u / l + μ ) Jumpstart ™ accutaq la DNA polymerase และ 2 μ L ยีน . โดยการเพิ่มโปรไฟล์ : 95 องศา C เป็นเวลา 3 นาที ตามด้วย 30 รอบ ( 45 S ที่ 94 ° Cที่เหมาะสมอุณหภูมิการอบอ่อน 45 S ( ตารางที่ 2 ) และส่วนขยายที่ 72 ° C เป็นเวลา 45 วินาที ตามด้วยส่วนขยายสุดท้ายสำหรับ 10 นาทีที่ 72 ° C