β-1,3-glucanase is an important cell wall-degrading enzyme involved in mycoparasitism by Trichoderma spp. during antagonism against phytopathogenic fungi. A simple microplate-based method to assay β-1,3-glucanase activity is described here as an alternative to an expensive tube-assay method. The reaction volume of the micro-assay was reduced to 130 µl from the 1150 µl used in the standard β-1,3-glucanase macro-assay. Statistical analyses showed significant difference in sensitivity between the micro- and the macro-assay. The micro-method was optimized using the Response Surface Quadratic Model. The sensitivity of the optimized micro-method was shown to be four-fold greater than the macro-assay and two-fold higher than the micro-assay. The optimized micro-assay was significantly more sensitive in all of the twenty examined isolates during Trichoderma spp. β-1,3-glucanase screening. We conclude that this modified and optimized method is more convenient, faster, cheaper and more reproducible than the traditional tube-assay.
β-1,3-glucanase เป็นเอนไซม์สำคัญเซลล์ผนังส่วนร่วมในการย่อยสลาย mycoparasitism โดยเชื้อรา Trichoderma spp ในระหว่างการเป็นปรปักษ์กันกับเชื้อราสาเหตุโรคพืช วิธี microplate ที่ใช้ง่ายในการ assay กิจกรรมβ-1,3-glucanase อธิบายไว้ที่นี่เป็นทางเลือกให้วิธีหลอดทดสอบที่มีราคาแพง ปริมาณการเกิดปฏิกิริยาของการทดสอบไมโครลดลงถึง 130 ไมโครลิตรจาก 1150 ไมโครลิตรใช้ในมาตรฐานβ-1,3-glucanase มหภาคทดสอบ การวิเคราะห์ทางสถิติแสดงให้เห็นความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในความไวระหว่างไมโครและมหภาคทดสอบ วิธีไมโครถูกปรับให้เหมาะสมโดยใช้พื้นผิวตอบสนองกำลังสองรุ่น ความไวของวิธีไมโครดีที่สุดคือการแสดงให้เห็นว่าสี่เท่ามากกว่ามหภาคทดสอบและสองเท่าสูงกว่าไมโครทดสอบ การเพิ่มประสิทธิภาพการทดสอบไมโครอย่างมีนัยสำคัญที่มีความสำคัญมากขึ้นในทุกยี่สิบตรวจสอบสายพันธุ์ระหว่างเชื้อรา Trichoderma spp β-1,3-glucanase การตรวจคัดกรอง เราสรุปได้ว่าวิธีการแก้ไขและการเพิ่มประสิทธิภาพนี้จะสะดวกกว่า, เร็วกว่า, ถูกกว่าและสามารถทำซ้ำได้มากกว่าหลอดทดสอบแบบดั้งเดิม
การแปล กรุณารอสักครู่..
