To gain an understanding of the mol

To gain an understanding of the molecular
basis for resistance to rice blast (Magnaporthe grisea),
we have initiated a project to clone Pi5(t), a locus associated
with broad-spectrum resistance to diverse blast
isolates. AFLP-derived markers linked to Pi5(t)-mediated
resistance were isolated using bulked segregant
analysis of F2 populations generated by crossing three
recombinant inbred lines (RILs), RIL125, RIL249, and
RIL260 with the susceptible line CO39. The most tightly
linked AFLP marker, S04G03, was positioned on
chromosome 9 of the fingerprint-based physical map of
Nipponbare, a well-characterized rice genotype. Flanking
BAC-based Nipponbare markers were generated for
saturation mapping using four populations, the three
initial RILs and an additional one derived from a cross
between M202 and RIL260. A BIBAC (binary BAC)
library was constructed from RIL260. Using these resources
Pi5(t) was mapped to a 170-kb interval, and a
contiguous set of BIBAC clones spanning this region was constructed. It had previously been suggested that
Pi3(t) and Pi5(t) might be allelic, due to their identical
resistance spectrum and tight linkage. We therefore
compared genomic regions for lines containing Pi3(t)
using the Pi5(t)-linked markers. DNA gel-blot analyses
indicated that the region around Pi3(t) is identical to
that of Pi5(t), suggesting that Pi3(t) and Pi5(t) are
the same resistance gene.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การได้รับความเข้าใจในระดับโมเลกุลข้อมูลพื้นฐานสำหรับการต้านทานกับข้าวระเบิด (Magnaporthe grisea),เราได้เริ่มต้นโครงการเป็นโคลน Pi5(t) โลกัสโพลที่เกี่ยวข้องกับระเบิดหลากหลาย broad-spectrum ทนต่อแยก เครื่องหมาย AFLP มาเชื่อมโยงกับ Pi5 (t) -mediatedต้านทานถูกแยกโดยใช้ bulked segregantการวิเคราะห์ประชากร F2 ที่สร้างขึ้น โดยข้ามสามวททช inbred บรรทัด (RILs), RIL125, RIL249 และRIL260 กับบรรทัดไวต่อ CO39 แน่นที่สุดเชื่อมโยงเครื่องหมาย S04G03 ถูกวางบนโครโมโซม 9 ของลายนิ้วมือตามแผนที่ทางกายภาพของNipponbare ลักษณะทางพันธุกรรมข้าว characterized เชิญ Flankingสร้างขึ้นสำหรับใช้บัค Nipponbare เครื่องหมายการแม็ปความเข้มที่ใช้ประชากรสี่ สามRILs เริ่มต้นและเป็นส่วนหนึ่งเพิ่มเติมมาจากกางเขนระหว่าง M202 และ RIL260 BIBAC (บัคไบนารี)ไลบรารีถูกสร้างจาก RIL260 ใช้ทรัพยากรเหล่านี้Pi5(t) ถูกแมปกับช่วง 170 kb และชุดติดกันโคลน BIBAC รัฐภูมิภาคนี้ถูกสร้างขึ้น มันมีก่อนหน้านี้ถูกแนะนำที่Pi3(t) และ Pi5(t) อาจ allelic เนื่องจากพวกเขาเหมือนกันสเปกตรัมความต้านทานและความเชื่อมโยงที่แน่น เราดังนั้นเปรียบเทียบภูมิภาค genomic สำหรับบรรทัดที่ประกอบด้วย Pi3(t)โดยใช้การ Pi5 (t) -เชื่อมโยงเครื่องหมาย วิเคราะห์ดีเอ็นเอเจลคืนในตาระบุว่า ภูมิภาครอบ Pi3(t) เหมือนกับของ Pi5(t), Pi3(t) และ Pi5(t) แนะนำยีนต้านทานเดียวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่จะได้รับความเข้าใจพื้นฐานของโมเลกุล
ต้านทานระเบิดข้าว ( magnaporthe นาน 2 ชั่วโมง ) ,
เราได้ริเริ่มโครงการโคลน pi5 ( T ) , ความเชื่อที่เกี่ยวข้องกับความต้านทานที่หลากหลายเหล่านี้

ระเบิดของเชื้อ เครื่องหมาย AFLP ที่เชื่อมโยงกับ pi5 ( t )
) ความต้านทานแยกใช้ยก segregant
การวิเคราะห์ประชากร F2 ที่สร้างขึ้นโดยข้ามสาม
สายพันธุ์แท้แนนท์ ( rils ) ril125 ril249 , ,
ril260 กับ co39 บรรทัดที่อ่อนแอ . ที่แน่นที่สุด
เชื่อมโยงเทคนิคเครื่องหมาย s04g03 ถูกวางอยู่บน
โครโมโซม 9 ของลายนิ้วมือที่ใช้ทางกายภาพแผนที่
nipponbare เป็นอย่างดีลักษณะพันธุกรรมข้าว . จ
บัคตาม nipponbare เครื่องหมายถูกสร้างขึ้นสำหรับการใช้แผนที่
3
4 ประชากรrils เริ่มต้นและหนึ่งเพิ่มเติม ที่มาจากข้ามระหว่าง m202 ril260
และ . เป็น bibac ( Binary BAC )
ห้องสมุดถูกสร้างจาก ril260 . การใช้ทรัพยากรเหล่านี้
pi5 ( t ) เป็นแมปไปยังช่วง 170 KB และ
ชุดติดกันของ bibac โคลนครอบคลุมภูมิภาคนี้ถูกสร้าง มันได้รับก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่า
pi3 ( T ) และ pi5 ( T ) อาจจะมียาฆ่าแมลง เนื่องจาก
เหมือนกันของพวกเขาคลื่นความต้านทานและความแน่น เราจึง
เมื่อเทียบภูมิภาคจีโนมสำหรับบรรทัดที่มี pi3 ( T )
( t ) - ใช้ pi5 เชื่อมโยงเครื่องหมาย ดีเอ็นเอเจล blot การวิเคราะห์
พบว่าพื้นที่รอบ ๆ pi3 ( T ) เหมือนกัน

ที่ pi5 ( T ) แนะนำว่า pi3 ( T ) และ pi5 ( T )
ยีนต้านทานเดียวกัน