Pathogen
B. cinerea, was isolated from decayed strawberry fruits and maintained on potato dextrose agar (PDA) at 4 °C. Fresh cultures of the fungus were prepared by subculture of mycelia onto new PDA plate and the incubated at 23 °C for 3-5 days.
Extraction of essential oils
Essential oils of selected plants including clove, cinnamon, lemongrass and galingale, were obtained by hydro-distillation in a Clevenger-type apparatus as described by Tripathi et al., (2008). The extracted crude essential oils were stored in sealed glass bottles or flasks, and protected from the light by wrapping in aluminum foil and stored at 4 °C.
Antifungal bioassay
The volatile component of the essential oils from clove, cinnamon, lemongrass and galingale were tested for antifungal activity against B. cinerea by using modified micro-atmospheric method (in vitro) previously described by Singh et al. (1999) with some modification.
PDA plates were prepared using 5 cm Petri dishes containing 5 mL of PDA. A 4 mm (diameter) agar disc of B. cinerea was cut from the periphery of the active growth culture (3 - 5 days old) and the mycelial surface was placed upside down on the centre of the dish. The Petri dish was then inverted and a small paper disc (6 mm diameter, Whatman No.1) was placed inside on the lid of each Petri dish. An aliquot amount (5, 10, 15, 20 and 25 μl) of each essential oil was applied to the paper disc. Incubation of the fungus and test was conducted in a growth chamber at 23 °C with 12/12 dark-light regime. Each test was replicated for three times. The antifungal activity was determined after 3 day incubation by means of the percentage of inhibited redial growth as following equation:
% inhibition = ∆do − ∆d × 100 ∆do
Where ∆do and ∆d are the average diameter of the fugal colonies in the control and treatment sets, respectively
Determination of the nature of the inhibition of essential oil
To determine the nature of the inhibition of each essential oil, the mycelial discs which were totally suppressed by the essential oil were transferred to a PDA plate which was not supplemented with the essential oil. The treatment was fungistatic if the growth of the fungus
began again and was considered fungicidal if the fungus did not re-grow.
เชื้อโรคบี ซีเนเรีย, ที่แยกได้จากผลไม้สตรอเบอร์รี่ผุและการบำรุงรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่ง (PDA) ที่ 4 ° C วัฒนธรรมใหม่ของเชื้อราที่ถูกจัดทำขึ้นโดยวัฒนธรรมของเส้นใยใส่จานใหม่ PDA และบ่มที่ 23 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3-5 วัน. การสกัดน้ำมันหอมระเหยน้ำมันหอมระเหยของพืชที่เลือกรวมทั้งกานพลูอบเชยตะไคร้และข่าได้ที่ได้รับจากน้ำ-distillation ในอุปกรณ์ Clevenger ชนิดตามที่อธิบาย Tripathi et al. (2008) ที่สกัดน้ำมันหอมระเหยน้ำมันดิบถูกเก็บไว้ในขวดแก้วปิดสนิทหรือขวดและป้องกันจากแสงโดยการตัดในกระดาษฟอยล์อลูมิเนียมและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส. เชื้อราชีวภาพองค์ประกอบที่ระเหยของน้ำมันหอมระเหยจากกานพลู, อบเชย, ตะไคร้และข่าได้รับการทดสอบ กิจกรรมต้านเชื้อรากับบีซีเนเรียโดยใช้วิธีไมโครบรรยากาศการแก้ไข (ในหลอดทดลอง) อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยซิงห์และอัล (1999) ที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง. แผ่นพีดีเอได้จัดทำขึ้นโดยใช้ 5 ซม. จานเลี้ยงเชื้อที่มี 5 มิลลิลิตรพีดีเอ 4 มิลลิเมตร (เส้นผ่าศูนย์กลาง) แผ่นวุ้นของซีเนเรียบีถูกตัดออกจากขอบของวัฒนธรรมการเจริญเติบโตของการใช้งาน (3-5 วันเก่า) และพื้นผิวของเส้นใยถูกวางคว่ำลงบนศูนย์กลางของจาน จาน Petri ถูกคว่ำแล้วและแผ่นกระดาษขนาดเล็ก (6 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางเบอร์ 1) ถูกนำมาวางบนฝาภายในของแต่ละจานเลี้ยงเชื้อ จำนวนเงินที่หาร (5, 10, 15, 20 และ 25 ไมโครลิตร) ของแต่ละน้ำมันหอมระเหยที่ถูกนำไปใช้แผ่นกระดาษ บ่มเพาะของเชื้อราและการทดสอบได้ดำเนินการในห้องการเจริญเติบโตที่ 23 ° C ที่มีระบอบการปกครอง 12/12 เข้มแสง การทดสอบแต่ละคนได้รับการจำลองแบบสามครั้ง กิจกรรมต้านเชื้อราถูกกำหนดหลังจากบ่ม 3 วันโดยวิธีการของร้อยละของการยับยั้งการเจริญสายดังต่อไปนี้สมการยับยั้ง% = Δdo - Δd× 100 Δdoที่ไหนΔdoΔdและมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางเฉลี่ยของอาณานิคมfugal ใน การควบคุมและชุดรักษาตามลำดับการกำหนดลักษณะของการยับยั้งน้ำมันหอมระเหยที่การตรวจสอบลักษณะของการยับยั้งของแต่ละน้ำมันหอมระเหยที่แผ่นเส้นใยที่ถูกระงับทั้งหมดโดยน้ำมันหอมระเหยที่ถูกถ่ายโอนไปยังแผ่นพีดีเอที่ไม่ได้เสริมด้วยน้ำมันหอมระเหย การรักษาเป็น fungistatic ถ้าการเจริญเติบโตของเชื้อราเริ่มอีกครั้งและได้รับการพิจารณาเชื้อราเชื้อราถ้าไม่ได้เติบโตอีกครั้ง
การแปล กรุณารอสักครู่..
เชื้อโรค
B ขาว ถูกแยกจากผุผลไม้สตรอเบอรี่และรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) ที่อุณหภูมิ 4 องศา สดวัฒนธรรมของเชื้อรา เตรียมประกาศศักดาของเส้นใยลงบนจาน PDA ใหม่และบ่มที่อุณหภูมิ 23 องศา C เป็นเวลา 3-5 วัน การสกัดน้ำมันหอมระเหย
เลือกพืชรวมทั้งน้ํามันหอมระเหยกานพลู อบเชย , ตะไคร้ และข่าที่ได้จากพลังงานน้ำการกลั่นในเคลวินเจอร์ประเภทอุปกรณ์ตามที่อธิบายไว้โดยทริปาธิ et al . , ( 2008 ) น้ำมันสกัดน้ำมันหอมระเหยที่ถูกเก็บไว้ในขวดแก้วหรือขวดปิดสนิทและป้องกันจากแสง โดยห่อด้วยฟอยล์ และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C .
ส่วนเชื้อราสามารถระเหยของน้ำมันหอมระเหยจากกานพลู อบเชยกระชาย ตะไคร้ และทดสอบฤทธิ์ต้านฤทธิ์ต่อบีขาวโดยใช้วิธีดัดแปลงแบบบรรยากาศไมโคร ( ในหลอดทดลอง ) อธิบายไว้ก่อนหน้าโดย Singh et al . ( 1999 ) มีการปรับเปลี่ยน
PDA แผ่นเตรียมใช้ 5 ซม. จานเลี้ยงเชื้อที่มี 5 ml ของ PDA 4 มม. ( เส้นผ่านศูนย์กลาง ) วุ้นแผ่นของขาวถูกตัดออกจากรอบนอกของวัฒนธรรมการใช้ 3 - 5 วัน ) และพื้นผิวของเส้นใยถูกวางคว่ำบนศูนย์กลางของจาน จานเลี้ยงเชื้อก็คว่ำและแผ่นกระดาษเล็ก ๆ ( ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 6 มม. whatman 1 ) อยู่ภายในฝา Petri แต่ละจาน เป็นส่วนลงตัวจํานวน ( 5 , 10 , 15 , 20 และ 25 μ L ) ของแต่ละน้ำมันหอมระเหย ใช้เป็นแผ่นกระดาษบ่มเชื้อราและการทดสอบดำเนินการในการเจริญเติบโตไม่มี ที่ 23 ° C 12 / 12 แสงที่มืดมากขึ้น การสอบแต่ละครั้งเป็นจำนวนสามครั้ง กิจกรรมในการมุ่งมั่น หลังจาก 3 วันบ่ม โดยร้อยละของการรับสายการเจริญเติบโตเป็นสมการต่อไปนี้ :
% ยับยั้ง = ∆ทำ∆ D −× 100 ∆ทำ
ที่∆ทำและ∆ D มีเส้นผ่านศูนย์กลางของโคโลนี ฟูกัลในชุดควบคุม และ การรักษาตามลำดับ
กำหนดลักษณะของการยับยั้ง
น้ำมันหอมระเหยเพื่อศึกษาธรรมชาติของการยับยั้งแต่ละน้ำมัน , แผ่นเส้นใยซึ่งทั้งหมดว่าน้ำมันหอมระเหยที่ถูกโอนไปยัง PDA จานซึ่ง ไม่ได้ถูกเสริมด้วยน้ำมันระเหยการรักษาคือ fungistatic ถ้าการเจริญเติบโตของเชื้อรา
เริ่มขึ้นอีกครั้ง และเป็นเชื้อรา หากไม่พิจารณา fungicidal
Re เติบโต
การแปล กรุณารอสักครู่..