Materials and methodsMaterialsMaize

Materials and methods
Materials

Maize stalks were obtained from the experimental farm of Agricultural Research Center, Giza, Egypt. Maize stalks were rinsed with water, air dried, then cut into about 1–2 cm. The chopped maize stalks were dried at 70 °C for 24 h.

White rot fungi, namely P. ostreatus NRRL-2366 and yeast namely, S. cerevisiae A-66 were obtained from the National Center of Agricultural Utilization Research Service, US, Department of Agricultural, Peoria, Illinois, USA and Agric. Microbial. Res. Dept., Agric. Res. Center, respectively. The strains were maintained on potato dextrose agar medium ( Difco Manual, 1979), then stored at 4 °C.

Microbiological methods

Preparation of grains spawn

To prepare grains master spawn, wheat seeds or sorghum seeds were used.

Seeds were cleaned from debris, then soaked in water for overnight. Dead seeds were removed, then boiled in water for 15 min. After cooling, the seeds were transferred to around bottle by occupying 2/3 of its volume and mixed with calcium carbonate 2% (w/w) and calcium sulfate 1% (w/w). Bottles were then sterilized, for 1 h at 121 °C. After cooling, the sterilized bottles were inoculated with mycelial disks (5 mm diameter) which were born from the margins of 6 days old culture of P. ostreatus. The inoculated bottles were incubated at 25 °C for 15–20 days. The grains master spawn was used to inoculate the bags containing (100 g) pasteurized maize stalks.

Preparation of yeast preculture

Conical flasks (500 ml capacity) containing 100 ml of peptone yeast extract glucose broth medium (Fouda et al., 1960) were sterilized at 121 °C/20 min. Flasks were inoculated with loopful of the tested strain, then incubated at 28 °C on rotary shaker (150 rpm) for 48 h. From inoculum containing 109 cells per each ml of S. cerevisiae, three separate volumes of quantities being 15, 30 and 45 ml were transferred to three separate poly ethylene bags.

Solid state cultivation technique: The nutritional upgrading trial of maize stalks was carried out in plastic bags containing 100 g of chopped stalks (stalks of 1–2 cm length were pasteurized in hot water 90 °C for 2 h). The moisture content of maize stalks was adjusted to 70%. The bags were inoculated with 10–12 g P. ostreatus spawn, in combined mixture with S. cerevisiae (15, 30 and 45 ml) for each bag. The inoculated bags were incubated at 28 °C for 7, 14, 21 and 28 days ( Darwish, 2000).

Chemical analytical methods

Moisture content, ash, crude fiber, crude protein ether extract, neutral and acid detergent fiber, micro and macro elements (Fe, Zn, Cu, Ca, P, K, Mg, Mn, Pb, Ni and Cd) were determined according to separate methods described in AOAC (2002). Total hydrolyzable carbohydrates were determined according to Montgomery (1961). Lignocellulosic fractions based on dry matter basis were determined according to the method of Van Soest and Robertson (1980).

In vitro disappearance

The in vitro dry matter disappearance (DMD) and organic matter disappearance (OMD) of samples were determined according to the two stages technique described by Tilley and Terry (1963). The rumen liquor was collected from fistulated sheep fed ration consisted of 70% wheat straw, 15% alfalfa hay and 15% concentrate feed mixture.

Statistical analysis

Statistical analysis for each separate collected data was done according to Gomez and Gomez (1984). The treatment means were compared using the least significant difference test (LSD) at the 5% level of probability as outlined by Waller and Duncan (1969).

Results and discussion
Chemical analysis of maize stalks used throughout the current work is shown in Table 1.

Table 1.
Chemical composition of maize stalks (on dry matter basis, %).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการวัสดุStalks ข้าวโพดได้รับมาจากฟาร์มทดลองของศูนย์วิจัยเกษตร กิซา อียิปต์ Stalks ข้าวโพดถูก rinsed ด้วยน้ำ อากาศ แห้ง ตัดแล้วเป็นประมาณ 1-2 ซม. Stalks ข้าวโพดสับได้แห้งที่ 70 ° C ใน 24 ชมRot ขาวเชื้อรา ได้แก่ P. ostreatus NRRL 2366 และยีสต์ได้แก่ S. cerevisiae A 66 ได้รับมาจากชาติศูนย์เกษตรกรรมการใช้ประโยชน์วิจัยบริการ เรา ภาคเกษตร พี อิลลินอยส์ สหรัฐอเมริกา และ Agric. Microbial ทรัพยากรฝ่าย ศูนย์ทรัพยากร Agric. ตามลำดับ สายพันธุ์ถูกจัดเก็บอยู่ในมันฝรั่งขึ้น agar สื่อ (คู่มือ Difco, 1979), จาก นั้นเก็บที่ 4 องศาเซลเซียสวิธีการทางจุลชีววิทยาเตรียมวางไข่ธัญพืชการเตรียมแป้งหลักวางไข่ เมล็ดข้าวสาลีหรือข้าวฟ่างเมล็ดใช้เมล็ดทำความสะอาดจากเศษ แล้วนำไปแช่ในน้ำพรรณไม้หลากหลายชนิด เมล็ดตายได้เอา แล้วต้มในน้ำ 15 นาที หลังจากทำความเย็น เมล็ดได้โอนรอบขวดมี 2/3 ของปริมาณ และผสมกับแคลเซียมคาร์บอเนต 2% (w/w) และแคลเซียมซัลเฟต 1% (w/w) ขวดได้แล้ว sterilized สำหรับ h 1 ที่ 121 องศาเซลเซียส หลังจากทำความเย็น ขวด sterilized ถูก inoculated กับดิสก์ mycelial (เส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มม.) ซึ่งเกิดจากขอบของวัฒนธรรมเก่า 6 วัน P. ostreatus ขวด inoculated ได้ incubated ที่ 25 ° C 15 – 20 วัน ธัญพืชหลักวางไข่ใช้ฉีดถุง (100 กรัม) ประกอบด้วย pasteurized stalks ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์การเตรียมการของยีสต์ precultureทรงกรวยน้ำ (ความจุ 500 ml) ประกอบด้วย 100 ml ของ peptone ยีสต์สารสกัดกลูโคสซุปปานกลาง (Fouda et al., 1960) ได้ sterilized ที่ 121 ° C/20 นาทีน้ำมี inoculated กับ loopful ของสายพันธุ์ทดสอบ แล้ว incubated ที่ 28 ° C ในโรตารี่เชคเกอร์ (150 rpm) สำหรับ 48 h จาก inoculum 109 เซลล์ต่อมล.แต่ละของ S. cerevisiae ไดรฟ์ข้อมูลที่แยกต่างหากสามปริมาณเป็น 15, 30 และ 45 ml ถูกโอนย้ายไปสามแยกโพลีเอทิลีนถุงเทคนิคการเพาะปลูกของแข็ง: ทดลอง upgrading โภชนาการของ stalks ข้าวโพดถูกดำเนินในถุงพลาสติกที่ประกอบด้วย 100 กรัมของสับ stalks (stalks ความยาว 1 – 2 ซม.ได้ pasteurized ในน้ำร้อน 90 ° C สำหรับ 2 h) มีการปรับปรุงเนื้อหาความชื้นของข้าวโพด stalks 70% กระเป๋าถูก inoculated กับวางไข่ 10-12 g P. ostreatus รวมผสมกับ S. cerevisiae (15, 30 และ 45 ml) สำหรับแต่ละถุง กระเป๋า inoculated มี incubated ที่ 28 ° C 7, 14, 21 และ 28 วัน (Darwish, 2000)วิธีการวิเคราะห์ทางเคมีชื้น เถ้า เส้น ใยหยาบ หยาบอีเทอร์โปรตีน แยก กลาง และกรดฟอกเส้นใย ไมโคร และแมโครองค์ประกอบ (Fe, Zn, Cu, Ca, P, K, Mg, Mn, Pb, Ni และซีดี) ได้กำหนดตามวิธีแยกใน AOAC (2002) คาร์โบไฮเดรตรวม hydrolyzable ถูกกำหนดตามมอนท์โก (1961) Lignocellulosic เศษส่วนตามเกณฑ์เรื่องแห้งถูกกำหนดตามวิธีการของ Van Soest และโรเบิร์ตสัน (1980)หายตัวไปในเรื่องการเพาะเลี้ยงแห้งหายตัวไป (ฝ่ายการ) และอินทรีย์หายตัวไป (รนด์) ของตัวอย่างถูกกำหนดตามเทคนิคขั้นที่สองโดย Tilley และเทอร์รี่ (1963) เหล้าต่อรวบรวมจากแกะ fistulated อาหารเลี้ยงดูประกอบด้วยฟางข้าวสาลี 70%, 15% และ 15% alfalfa hay เข้มข้นส่วนผสมอาหารสัตว์วิเคราะห์ทางสถิติวิเคราะห์ทางสถิติสำหรับข้อมูลที่รวบรวมแยกแต่ละทำตามเมซและเมซ (1984) วิธีการรักษาถูกเปรียบเทียบโดยใช้การทดสอบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญน้อยที่สุด (LSD) ในระดับ 5% ของความน่าเป็นตามที่ระบุไว้ โดยวอลเลอร์และดันแคน (1969)ผลและการสนทนาวิเคราะห์เคมีของ stalks ข้าวโพดที่ใช้ตลอดการทำงานปัจจุบันจะแสดงอยู่ในตารางที่ 1ตารางที่ 1องค์ประกอบทางเคมีของข้าวโพด stalks (ในเรื่องแห้ง, %)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการวัสดุก้านข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ที่ได้รับจากฟาร์มทดลองของศูนย์วิจัยเกษตรแห่งกิซ่า, อียิปต์ ก้านข้าวโพดถูกล้างด้วยน้ำอากาศแห้งแล้วตัดเป็นประมาณ 1-2 ซม. ก้านข้าวโพดแห้งที่ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงสับ. เชื้อราสีขาวคือพีนางรม NRRL-2366 และยีสต์คือ S. cerevisiae A-66 ที่ได้รับจากศูนย์แห่งชาติของการใช้บริการวิจัยการเกษตร, สหรัฐ, กรม เกษตรพีโอเรีย, อิลลินอยส์, สหรัฐอเมริกาและ Agric จุลินทรีย์ Res ฝ่าย Agric Res ศูนย์ตามลำดับ สายพันธุ์ที่ได้รับการดูแลในสื่อวุ้นเดกซ์โทรสมันฝรั่ง (Difco Manual, 1979) แล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส. วิธีทางจุลชีววิทยาการเตรียมเมล็ดวางไข่เพื่อเตรียมความพร้อมธัญพืชวางไข่ต้นแบบเมล็ดข้าวสาลีหรือเมล็ดข้าวฟ่างถูกนำมาใช้. เมล็ดพันธุ์พืชได้รับการทำความสะอาดจากเศษแล้ว แช่ในน้ำในชั่วข้ามคืน เมล็ดตายถูกถอดออกแล้วนำมาต้มในน้ำเป็นเวลา 15 นาที หลังจากที่ระบายความร้อนเมล็ดถูกย้ายไปรอบขวดโดยครอบครอง 2/3 ของปริมาณและผสมกับแคลเซียมคาร์บอเนต 2% (w / w) และแคลเซียมซัลเฟต 1% (w / w) ขวดได้รับการฆ่าเชื้อแล้วเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส หลังจากที่การระบายความร้อนที่ถูกเชื้อขวดฆ่าเชื้อด้วยเส้นใยดิสก์ (เส้นผ่านศูนย์กลาง 5) ซึ่งเกิดจากอัตรากำไรขั้นต้นของวันที่ 6 วัฒนธรรมเก่าพีนางรม ขวดเชื้อบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15-20 วัน ธัญพืชหลักวางไข่ถูกใช้ในการฉีดวัคซีนถุงที่มี (100 กรัม) พาสเจอร์ไรส์ก้านข้าวโพด. เตรียมของยีสต์ preculture ขวดกรวย (500 มล. ความจุ) ที่มี 100 มล. ของยีสต์เปปโตนสารสกัดจากกลางน้ำซุปกลูโคส (Fouda et al., 1960) ได้รับการฆ่าเชื้อ 121 ° C / 20 นาที ขวดได้รับเชื้อด้วย loopful สายพันธุ์ทดสอบที่บ่มแล้ววันที่ 28 ° C ในเครื่องปั่นหมุน (150 รอบต่อนาที) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง จากเชื้อที่มี 109 เซลล์ต่อมิลลิลิตรแต่ละ S. cerevisiae, สามเล่มที่แยกต่างหากจากปริมาณเป็น 15, 30 และ 45 มล. ถูกย้ายไปสามแยกถุงโพลีเอทิลีน. เทคนิคการเพาะปลูกของรัฐแข็ง: การพิจารณาคดีการอัพเกรดทางโภชนาการของก้านข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ได้ดำเนินการใน ถุงพลาสติกที่มี 100 กรัมของก้านสับ (ก้านของความยาว 1-2 ซม. ได้รับการพาสเจอร์ไรส์ในน้ำร้อน 90 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 ชั่วโมง) ปริมาณความชื้นของก้านข้าวโพดปรับถึง 70% ถุงถูกเชื้อด้วย 10-12 กรัมวางไข่พีนางรมในส่วนผสมรวมกับเอส cerevisiae (15, 30 และ 45 มล.) สำหรับแต่ละถุง ถุงเชื้อบ่มที่ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7, 14, 21 และ 28 วัน (Darwish, 2000). เคมีวิธีการวิเคราะห์ความชื้นเถ้าเยื่อใยสารสกัดจากอีเทอร์โปรตีนเส้นใยผงซักฟอกที่เป็นกลางและกรดขนาดเล็กและองค์ประกอบแมโคร(เฟ, สังกะสี, ทองแดง, Ca, P, K, Mg, Mn, Pb, Ni และ Cd) ได้รับการพิจารณาตามวิธีการที่แยกต่างหากที่อธิบายไว้ใน AOAC (2002) คาร์โบไฮเดรต hydrolyzable ทั้งหมดได้รับการพิจารณาตามที่กอเมอรี (1961) เศษส่วนลิกโนเซลลูโลสบนพื้นฐานแห้งได้รับการพิจารณาตามวิธีการของแวนโซเอสต์และโรเบิร์ต (1980). ในหลอดทดลองการหายตัวไปในหลอดทดลองการหายตัวไปของวัตถุแห้ง (DMD) และการหายตัวไปของสารอินทรีย์ (OMD) ของกลุ่มตัวอย่างได้รับการพิจารณาให้เป็นไปตามขั้นตอนที่สอง เทคนิคการอธิบายโดยทิลลีย์และเทอร์รี่ (1963) สุรากระเพาะรูเมนที่ถูกเก็บรวบรวมจากแกะ fistulated ปันส่วนเลี้ยงประกอบด้วยฟางข้าวสาลี 70% หญ้าแห้งหญ้าชนิต 15% และ 15% เข้มข้นผสมฟีด. การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์ทางสถิติที่เก็บรวบรวมข้อมูลในแต่ละแยกต่างหากได้ทำตามที่โกเมซและโกเมซ (1984) วิธีการรักษาที่ถูกนำมาเปรียบเทียบโดยใช้การทดสอบอย่างน้อยแตกต่างกัน (LSD) ที่ระดับ 5% ของความน่าจะเป็นตามที่ระบุไว้โดยวอลเลอร์และดันแคน (1969). ผลการอภิปรายและการวิเคราะห์ทางเคมีของต้นข้าวโพดที่ใช้ตลอดการทำงานในปัจจุบันจะแสดงในตารางที่ 1 ตารางที่ 1 องค์ประกอบทางเคมีของก้านข้าวโพด (บนพื้นฐานวัตถุแห้ง%)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ

( ใช้วัสดุได้มาจากฟาร์มทดลองของศูนย์วิจัยการเกษตร , Giza , อียิปต์ ข้าวโพดก้านถูกล้างด้วยน้ำ อากาศแห้ง แล้วหั่นเป็นประมาณ 1 - 2 เซนติเมตร สับข้าวโพดก้านที่อุณหภูมิ 70 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง

ขาวเน่าเชื้อราและยีสต์ คือ P . ostreatus nrrl-2366 คือ Sโดย a-66 ได้มาจากศูนย์แห่งชาติของบริการ การวิจัยการเกษตรเรา กรมเกษตร พีโอเรีย , Illinois , สหรัฐอเมริกาและ Agric . จุลินทรีย์ ศาสตร์ฝ่าย Agric . ความละเอียดพิมพ์กลาง ตามลำดับ สายพันธุ์ที่ถูกเก็บรักษาไว้บนอาหาร potato dextrose agar medium ( คู่มือ , difco 1979 ) แล้วเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C .



จุลชีววิทยาวิธีการเตรียมเมล็ดวางไข่

เตรียมเมล็ดธัญพืชหลัก spawn เมล็ดข้าวฟ่างข้าวสาลีหรือใช้

เมล็ดทำความสะอาดจากเศษ แล้วแช่น้ำข้ามคืน เมล็ดที่ตายแล้วออก แล้วต้มในน้ำเดือดเป็นเวลา 15 นาที หลังจากเย็น , เมล็ดถูกย้ายไปรอบ ๆขวด โดยมี 2 / 3 ของปริมาณและผสมแคลเซียมคาร์บอเนต 2% ( w / w ) และแคลเซียม ซัลเฟต 1% ( w / w ) ขวดผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว ,เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 121 องศา หลังจากเย็น , ฆ่าเชื้อขวดถูกใส่ของดิสก์ ( 5 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง ) ซึ่งเกิดจากขอบของ 6 วันวัฒนธรรมของ P . ostreatus . ใส่ขวดที่อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 15 - 20 วัน เกรนมาสเตอร์ Spawn ใช้ฉีดถุงบรรจุ ( 100 กรัม ) ผลิตข้าวโพดดอก

เตรียมยีสต์พันธุ์

ที่เป็นรูปทรงกรวยและขวด ( ความจุ 500 มล. ) ( 100 มิลลิลิตร สารสกัดจากยีสต์ในน้ำซุปเปปโตนกลาง ี โฟดา et al . , 1960 ) ฆ่าเชื้อที่ 121 ° C / 20 นาที ( ใส่ขวด loopful ของการทดสอบความเครียด แล้วบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศา C ( หมุนปั่น 150 รอบต่อนาที ) ที่เวลา 48 ชั่วโมง จากเชื้อที่มี 109 เซลล์ต่อมิลลิลิตรของ S . cerevisiae สามเล่ม แยกเป็นปริมาณ 1530 และ 45 มิลลิลิตร คือ สาม แยก โพลีเอธิลีนถุง

สถานะของแข็งเทคนิค : การยกระดับโภชนาการทดลองข้าวโพดก้านได้ดําเนินการในถุงพลาสติก ประกอบด้วยก้านสับ 100 กรัม ( ดอกที่ 1 – 2 เซนติเมตร ความยาวพาสเจอร์ไรส์ในน้ำร้อน 90 ° C 2 H ) ความชื้นของข้าวโพดก้านปรับ 70% ถุงที่ใส่ 10 – 12 g Pปากมดลูกวางไข่ในรวมผสมกับ S . cerevisiae ( 15 , 30 และ 45 มล. ) สำหรับแต่ละถุง ใส่ถุงที่อุณหภูมิ 28 องศา C เป็นเวลา 7 , 14 , 21 และ 28 วัน ( Darwish , 2000 ) .



เคมีวิเคราะห์ความชื้น , เถ้า , เยื่อใยและโปรตีนสกัดอีเทอร์ เป็นกลาง acid detergent fiber , ไมโครและแมโครองค์ประกอบ ( Fe , Zn , Cu , CA , p , K , Mg , MN , PB ,ฉันและซีดี ) คำนวณตามวิธีการที่อธิบายในการแยกโปรตีน ( 2002 ) รวม hydrolyzable คาร์โบไฮเดรตได้รับการพิจารณาตาม มอนโกเมอรี่ ( 1961 ) lignocellulosic เศษส่วนบนพื้นฐานแห้งถูกกำหนดตามวิธีการของ Van Soest และ โรเบิร์ตสัน ( 1980 ) .



ในการหายตัวไปในหลอดทดลองแห้งหายไป ( DMD ) และการหายตัวไปของอินทรีย์วัตถุ ( OMD ) ของตัวอย่างตามสองขั้นตอนเทคนิคอธิบายไว้โดย ทิลลี่ย์และเทอร์รี่ ( 1963 ) อาหาร การกินเหล้า รวบรวมข้อมูลจากแกะ เลี้ยงอาหาร ประกอบด้วย ฟางข้าวสาลี 70% , หญ้าแห้งและหญ้า 15% 15% เน้นให้อาหารผสม



สถิติการวิเคราะห์การวิเคราะห์ทางสถิติสำหรับแต่ละแยกเก็บข้อมูลตาม โกเมซ และ โกเมซ ( 1984 ) การเปรียบเทียบการใช้วิธีการทดสอบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญน้อยที่สุด ( LSD ) ที่ 5 ระดับของความน่าจะเป็นตามที่ระบุโดยวอลเลอร์และดันแคน ( 1969 )


ผลและการอภิปรายการวิเคราะห์ทางเคมีของข้าวโพดก้านใช้ตลอดการทำงานในปัจจุบันแสดงดังตารางที่ 1 ตารางที่ 1

.องค์ประกอบทางเคมีของข้าวโพดก้าน ( บนพื้นฐานแห้ง
% )