deaths annually in the United States (Scallan et al., 2011). Therefore,
outbreaks associated with Listeria species are major public health
concerns. Due to the close morphological and biochemical resemblances
of L. monocytogenes to other Listeria species and the
non-specific clinical manifestations of listeriosis (Johnson et al.,
2004; Vázquez-Boland et al., 2001), the availability of rapid, specific
and sensitive diagnostic tests capable of distinguishing
L. monocytogenes from other Listeria species are imperative for the
effective control of the disease.
The standard microbiological methods routinely utilized for the
isolation of L. monocytogenes in foodstuffs or other materials usually
require two enrichment steps in liquid media and further
isolation on a solid selective medium (Barocci et al., 2008). It is
now indispensable to develop new and more rapid methods which
can replace the traditional techniques. An alternative to conventional
detection methods for foodborne pathogens is molecular
techniques like polymerase chain reaction (PCR) methods which
have shown promise in microbial diagnostics over the past decades
because of their rapidity and higher accuracy compared to traditional
methods (Garrido et al., 2012; Kawasaki et al., 2009; Liu
et al., 2012). A DNA analysis could be superior to culture techniques
due to the increasing importance of infectious diseases and
the lack of correlation between infectivity and cultivability. The
detection specificity of PCR methods depends on the specific
binding of the primer pair to the target sequences in the organisms.
Recently, modifications of this technology have emerged,
some of which allow for the rapid detection of multiple pathogens
in a single test. Multiplex PCR and real time PCR methods were
used for identifying various foodborne pathogens worldwide due
to high sensitivity, saving time and cost (Bubert et al., 1999; Cheng
et al., 2008; Garrido et al., 2012; Jofré et al., 2005; Kawasaki et al.,
2009; Liu et al., 2012).
In this study, we have developed a rapid, sensitive and specific
multiplex PCR assay for the detection of Listeria species in food
products simultaneously, using specific primer pairs in a single
tube. The optimized multiplex PCR assay has been evaluated with
93 Listeria strains which were isolated from meat processed
foods.
เสียชีวิตเป็นประจำทุกปีในประเทศสหรัฐอเมริกา (Scallan et al. 2011) ดังนั้น
การระบาดของโรคที่เกี่ยวข้องกับเชื้อ Listeria ชนิดมีความสำคัญต่อสุขภาพของประชาชน
กังวล เนื่องจากความคล้ายคลึงใกล้ทางสัณฐานวิทยาและชีวเคมี
ของ L. monocytogenes สายพันธุ์เชื้อ Listeria อื่น ๆ และ
อาการทางคลินิกที่ไม่เฉพาะเจาะจงของ listeriosis (จอห์นสัน, et al.,
2004. Vázquez-โบแลนด์, et al, 2001) ความพร้อมของอย่างรวดเร็วที่เฉพาะเจาะจง
และ การตรวจวินิจฉัยที่ไวต่อความสามารถในการแยกความแตกต่าง
ลิตร monocytogenes จากสายพันธุ์เชื้อ Listeria อื่น ๆ ที่มีความจำเป็นสำหรับ
การควบคุมที่มีประสิทธิภาพของโรค.
วิธีทางจุลชีววิทยามาตรฐานใช้เป็นประจำสำหรับ
การแยก L. monocytogenes ในอาหารหรือวัสดุอื่น ๆ ที่มักจะ
ต้องมีสองขั้นตอนการเพิ่มปริมาณของเหลวในสื่อและต่อไป
การแยกในสื่อเลือกที่มั่นคง ( Barocci et al., 2008) มันเป็น
ตอนนี้ที่ขาดไม่ได้ในการพัฒนาวิธีการใหม่และรวดเร็วมากขึ้นซึ่ง
สามารถแทนที่เทคนิคแบบดั้งเดิม ทางเลือกในการชุมนุม
วิธีการตรวจหาเชื้อโรคที่เกิดจากอาหารเป็นโมเลกุล
เทคนิคเช่นวิธี Polymerase chain reaction (PCR) วิธีการซึ่ง
ได้แสดงให้เห็นสัญญาในการตรวจวินิจฉัยเชื้อจุลินทรีย์ในช่วงทศวรรษที่ผ่านมา
เพราะความรวดเร็วและความแม่นยำที่สูงขึ้นเมื่อเทียบกับแบบดั้งเดิม
วิธีการ (Garrido et al, 2012. คาวาซากิ et al, 2009;. หลิว
et al, 2012). การวิเคราะห์ดีเอ็นเออาจจะดีกว่าเทคนิคการเพาะเลี้ยง
เนื่องจากการเพิ่มความสำคัญของโรคติดเชื้อและ
ขาดความสัมพันธ์ระหว่างการติดเชื้อและ cultivability
จำเพาะการตรวจสอบของวิธี PCR ขึ้นอยู่กับเฉพาะ
ผูกพันของคู่ไพรเมอร์เพื่อลำดับเป้าหมายในชีวิต.
เมื่อเร็ว ๆ นี้การปรับเปลี่ยนของเทคโนโลยีนี้ได้เกิด
บางแห่งที่อนุญาตให้มีการตรวจสอบอย่างรวดเร็วของเชื้อโรคหลาย
ในการทดสอบเพียงครั้งเดียว multiplex PCR และเวลาจริง PCR วิธีการที่ถูก
นำมาใช้สำหรับการระบุจุลชีพก่อโรคที่เกิดจากอาหารต่างๆทั่วโลกเนื่องจาก
มีความไวสูงช่วยประหยัดเวลาและค่าใช้จ่าย (Bubert et al, 1999;. เฉิง
et al, 2008;.. Garrido et al, 2012; et al, Jofre 2005; คาวาซากิ, et al.,
2009;.. หลิว et al, 2012)
ในการศึกษาครั้งนี้เราได้มีการพัฒนาอย่างรวดเร็วที่สำคัญและเฉพาะ
multiplex PCR ทดสอบตรวจหาเชื้อ Listeria ชนิดในอาหาร
ผลิตภัณฑ์พร้อมกันโดยใช้คู่ไพรเมอร์ที่ระบุใน เดียว
หลอด เพิ่มประสิทธิภาพการทดสอบ PCR multiplex ได้รับการประเมินที่มี
93 สายพันธุ์เชื้อ Listeria ซึ่งแยกได้จากเนื้อสัตว์แปรรูป
อาหาร
การแปล กรุณารอสักครู่..

บุคคลที่เสียชีวิตทุกปีในสหรัฐอเมริกา ( scallan et al . , 2011 ) ดังนั้นที่เกี่ยวข้องกับ Listeria ระบาดชนิดสาขาสาธารณสุขข้อสงสัย เนื่องจากลักษณะทางสัณฐานวิทยาและชีวเคมีคล้ายคลึงกันของ L . monocytogenes ชนิดพันธุ์และ Listeria อื่น ๆคลินิกเฉพาะลักษณะอาการของลิสเทอริโอซิส ( จอห์นสัน et al . ,2004 ; วาสเควซ น โบแลนด์ et al . , 2001 ) , ความพร้อมของอย่างรวดเร็ว เฉพาะและได้มีการทดสอบความสามารถในการแยกวินิจฉัยฉัน monocytogenes จากสายพันธุ์ Listeria อื่นขวางสำหรับผลของการควบคุมโรคมาตรฐานจุลชีววิทยาวิธีการตรวจที่ใช้สำหรับการแยก monocytogenes ลิตรในอาหารหรือวัสดุอื่น ๆมักจะต้องใช้สองขั้นตอนการเสริมในอาหารเหลว และเพิ่มเติมในการแยกของแข็งกลาง ( barocci et al . , 2008 ) มันคือแล้วที่ขาดไม่ได้ในการพัฒนาใหม่และวิธีการที่รวดเร็วมากขึ้นสามารถแทนที่เทคนิคแบบดั้งเดิม ทางเลือกที่จะปกติวิธีการตรวจหาเชื้อโรคอาหารเป็นพิษ เป็นโมเลกุลเทคนิค เช่น วิธีพีซีอาร์ ( PCR ) ซึ่งวิธีการได้แสดงสัญญาในการวินิจฉัยจุลินทรีย์มากกว่าทศวรรษที่ผ่านมาเพราะความรวดเร็วและความถูกต้องสูงเมื่อเทียบกับแบบดั้งเดิมวิธี ( Garrido et al . , 2012 ; คาวาซากิ et al . , 2009 ; ยูet al . , 2012 ) การวิเคราะห์ดีเอ็นเออาจจะเหนือกว่าเทคนิควัฒนธรรมเนื่องจากการเพิ่มความสำคัญของโรคติดเชื้อและขาดความสัมพันธ์ระหว่างการติดเชื้อ และการสามารถทำกสิกรรมได้ . ที่การตรวจหาความจำเพาะของวิธี PCR ขึ้นอยู่กับที่เฉพาะเจาะจงการจับคู่ของไพรเมอร์เพื่อเป้าหมายลำดับในสิ่งมีชีวิตเมื่อเร็วๆ นี้ การปรับเปลี่ยนเทคโนโลยีนี้เกิดขึ้นบางอย่างที่ช่วยให้สำหรับการตรวจสอบอย่างรวดเร็วของเชื้อโรคหลายในการทดสอบเดียว เทคนิค multoplex PCR และวิธี PCR เวลาจริงคือที่ใช้สำหรับการระบุต่างๆทั่วโลกเนื่องจากเชื้อโรคอาหารเป็นพิษความไวสูง , ประหยัดเวลาและค่าใช้จ่าย ( bubert et al . , 1999 ; เฉิงet al . , 2008 ; Garrido et al . , 2012 ; jofr é et al . , 2005 ; คาวาซากิ et al . ,2009 ; Liu et al . , 2012 )ในงานวิจัยนี้ เราได้พัฒนาอย่างรวดเร็ว ความไวและเฉพาะเจาะจงวิธี multiplex PCR ในการตรวจหาชนิดของแบคทีเรียที่เป็นพิษในอาหารผลิตภัณฑ์พร้อมกันโดยใช้คู่ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงในเดี่ยวหลอด วิธี multiplex PCR ที่เหมาะสมได้ถูกประเมินด้วย93 Listeria ซึ่งแยกได้จาก เนื้อสัตว์แปรรูป สายพันธุ์อาหาร
การแปล กรุณารอสักครู่..
