3.3. Southern blot analysisResults

3.3. Southern blot analysis
Results showed that all tested transformants had one or more
hybridization bands, whereas the wild type did not show a band
(Table 1 and Fig. 2). This suggested that plasmid pBluescript II
KS-hph had successfully inserted into T23 as also confirmed by
PCR results. Among all tested transformants, seven transformants
were observed with a single copy blotting band while three transformants
were found with multiple copy blotting bands (Fig. 2,
lane E, J and K). If the plasmid integration was due to a REMI event,
a single 4.0 kb band was expected. Among the transformants with
a single blotting band, five mutants showed an integration event
has happened probably at the same single chromosomal site and
two of them showed an insertion bigger than the size of the
plasmid. Additionally, two hybridization bands were observed in
the remaining three transformants. These results, thus, indicated
that it was possible that the restriction sites, for the endonuclease
(HindIII was used in REMI), were not regenerated at both ends
during integration or the pBluescript II KS-hph plasmid might be
integrated into two different genomic loci.
3.4. Assessment of tolerance to imidacloprid
All transformants derived from T. atroviride T23 were measured
for their tolerance to imidacloprid based on their colony diameters
on a given imidacloprid concentration containing PDA medium. A
total of 153 transformants were found with better growth than
the parent T23 in the 200 lgmL1 imidacloprid containing growth
medium.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.3 วิเคราะห์น้าภาคใต้ผลการศึกษาพบว่า ทั้งหมดทดสอบ transformants ได้อย่างหนึ่งhybridization วง ในขณะที่ป่าชนิดไม่ได้แสดงวงดนตรี(ตารางที่ 1 และ 2 รูป) นี้แนะนำ pBluescript ที่ plasmid IIKS-hph ได้สำเร็จแทรกเป็นได้ รับการยืนยันโดย T23ผล PCR ในทุกทดสอบ transformants, transformants เจ็ดถูกตั้งข้อสังเกตกับสำเนาเดียว blotting วิธีวงในขณะที่สาม transformantsพบที่ มีหลายสำเนา blotting วิธีวง (รูป 2เลน E, J และ K) ถ้ารวม plasmid เนื่องจากเหตุการณ์เรมี่คาดว่าวงดนตรีเดี่ยว 4.0 kb ระหว่าง transformants กับblotting วิธีเดียววง กลายพันธุ์ห้ารวมเหตุการณ์ที่แสดงให้เห็นว่าเกิดขึ้นคงที่ไซต์ของโครโมโซมเดียวเดียว และสองของพวกเขาแสดงให้เห็นว่าการแทรกขนาดใหญ่กว่าขนาดของการplasmid นอกจากนี้ สอง hybridization วงถูกตั้งข้อสังเกตในสาม transformants ที่เหลือ ผลลัพธ์เหล่านี้ ดังนั้น ระบุว่า มันเป็นไปได้ว่า ข้อจำกัดเว็บไซต์ สำหรับการ endonuclease(HindIII ใช้ใน REMI), ไม่ได้สร้างใหม่ทั้งในระหว่างการรวมหรือการ pBluescript II KS-hph plasmid อาจรวมอยู่ในตำแหน่งอ่อนแอออกแตกต่างกันสอง3.4. การประเมินผลของค่าเผื่อในการ imidaclopridทั้งหมด transformants มาจาก T. atroviride T23 ถูกวัดเพื่อ imidacloprid อิงเส้นผ่าศูนย์กลางของโคโลนี่ของค่าเผื่อบน imidacloprid กำหนดความเข้มข้นที่ประกอบด้วย PDA ขนาดกลาง Aพบทั้งหมด 153 transformants มีเจริญเติบโตดีกว่าหลัก T23 ใน imidacloprid 200 lgmL 1 ที่ที่ประกอบด้วยการเจริญเติบโตปานกลาง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.3 ภาคใต้วิเคราะห์ blot
ผลการศึกษาพบว่าการทดสอบ transformants ทุกคนมีหนึ่งหรือมากกว่า
วงดนตรีที่ผสมพันธุ์ขณะที่ป่าประเภทไม่ได้แสดงวงดนตรี
(ตารางที่ 1 และรูปที่. 2) นี้ชี้ให้เห็นว่าพลาสมิด pBluescript II
KS-HPH ได้แทรกประสบความสำเร็จใน T23 เป็นยังยืนยันโดย
ผล PCR ท่ามกลาง transformants ทดสอบทั้งหมดเจ็ด transformants
ถูกตั้งข้อสังเกตกับสำเนาเดียว blotting วงในขณะที่สาม transformants
ถูกพบกับวงดนตรีหลายสำเนากระดาษ (รูป. 2
เลน E, J และ K) หากบูรณาการพลาสมิดเป็นเพราะเหตุการณ์ REMI,
เดี่ยววง 4.0 KB ที่คาดว่า ท่ามกลาง transformants กับ
วงซับเดียวห้ากลายพันธุ์แสดงให้เห็นเหตุการณ์ที่บูรณาการ
ที่เกิดขึ้นอาจจะอยู่ที่เว็บไซต์ของโครโมโซมเดียวที่เหมือนกันและ
สองของพวกเขาแสดงให้เห็นว่าการแทรกขนาดใหญ่กว่าขนาดของ
พลาสมิด นอกจากนี้ทั้งสองวงดนตรีที่ผสมพันธุ์ถูกตั้งข้อสังเกตใน
ที่เหลืออีกสาม transformants ผลการศึกษานี้จึงแสดงให้เห็น
ว่ามันเป็นไปไม่ได้ที่เว็บไซต์ข้อ จำกัด สำหรับ endonuclease
(HindIII ถูกใช้ใน REMI) ไม่ได้ถูกสร้างใหม่ที่ปลายทั้งสอง
ในระหว่างการรวมหรือ pBluescript II KS-HPH พลาสมิดอาจจะ
รวมเป็นสองตำแหน่งจีโนมที่แตกต่างกัน .
3.4 การประเมินผลของความอดทนที่จะ Imidacloprid
transformants ทั้งหมดมาจาก T. atroviride T23 ถูกวัด
สำหรับความอดทนของพวกเขาเพื่อ imidacloprid ขึ้นอยู่กับขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางอาณานิคมของพวกเขา
อยู่กับความเข้มข้น imidacloprid ให้มีขนาดกลาง PDA
รวมของ 153 transformants ถูกพบกับการเจริญเติบโตที่ดีกว่า
T23 ปกครองใน 200 lgmL 1 imidacloprid ที่มีการเจริญเติบโต
ปานกลาง