ytotoxicity of LGO on HaCatT kerati

ytotoxicity of LGO on HaCatT keratinocytes cell line was determined by 3-(4, 5-dimethylthiazol-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT assay) (Rusanov et al., 2017). Briefly, cells(approximately 10,000 cells/well) were cultured in RPMI mediumsupplemented with 10% FBS and 1% antibiotic solution in a 96 wellplate at 37 C for 24 h with 5% CO2. After incubation cells weretreated with different concentrations of LGO (0.02–10 ll/ml) prepared in an incomplete medium. After 24 h, MTT 25 lg/ml (finalconcentration) was added to cell culture and incubated for 2 h.The culture supernatant was removed and cell layer with matrixwas dissolved in 100 ll DMSO (dimethyl sulfoxide) and the resultswere recorded by using an Elisa plate reader (BioTek instrumentsInc, Vermont, USA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความเป็นพิษของ LGO บนเซลล์ HaCatT keratinocytes ถูกขัดขวางโดย 3- (4, 5-dimethylthiazol-2,5-diphenyltetrazolium bro mide (การทดสอบ MTT) (Rusanov et al., 2017) โดยย่อเซลล์ (ประมาณ 10,000 เซลล์/ หลุม ) ได้รับการเพาะเลี้ยงในอาหาร RPMI ที่เสริมด้วย 10% FBS และสารละลายยาปฏิชีวนะ 1% ในจาน 96 หลุมที่ 37 C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงโดยมี CO2 5% หลังจากการฟักตัวเซลล์ได้รับการรักษาด้วยความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ LGO (0.02–10 ll/ml) เตรียมไว้ล่วงหน้าในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่สมบูรณ์ หลังจาก 24 ชั่วโมง เพิ่ม MTT 25 lg/ml ( ความเข้มข้นสุดท้าย) ลงในการเพาะเลี้ยงเซลล์และฟักเป็นเวลา 2 ชั่วโมงส่วนลอยเหนือตะกอนของการเพาะเลี้ยงถูกลบออกและชั้นเซลล์ที่มีเมทริกซ์ถูกละลายใน 100 ll DMSO (ไดเมทิลซัลฟอกไซด์ ) และผลลัพธ์ถูกบันทึกโดยใช้เครื่องอ่านเพลทของ Elisa (BioTek instruments Inc, Vermont, USA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การกำหนด cytotoxicity ของ LGO ต่อ HaCatT keratinocytocytosis (Rusanov et al. 2017) โดย 3- (4,5-dimeththiazole-2,5-diphenyltetrazazole bromide (การทดสอบ MTT) โดย LGO เซลล์ในระยะสั้น
(ประมาณ 10,000 เซลล์ / รู) เพาะเลี้ยงในสื่อ RPMI
เติม FBS 10% และสารละลายยาปฏิชีวนะ 1% ใน 96 หลุม
ปลูกที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงด้วย 5% CO2 หลังจากการเพาะเลี้ยงเซลล์
การรักษาด้วยความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ LGO (0.02 - 10 l / ml) ที่เตรียมไว้ในสื่อที่ไม่สมบูรณ์ หลังจาก 24 ชั่วโมง MTT 25 lg / ml (สุดท้าย
ความเข้มข้น) เพิ่มในวัฒนธรรมเซลล์และฟักไข่เป็นเวลา 2 ชั่วโมง
กำจัด supernatural วัฒนธรรมและผสมชั้นของเซลล์กับเมทริกซ์
ละลายใน DMSO 100 ลิตร (Dimethylsulfoxide) ผลลัพธ์
โดยใช้เครื่องอ่านแท็บเล็ต Elisa ( BioTek Instruments
Inc, เวอร์มอนต์, สหรัฐอเมริกา )

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความเป็นพิษของLGOต่อสายเซลล์keratinocytes HaCatTถูกกําหนดโดยวิธี3- ( 4,5-dimethylsulfonyl-2,5-diphenyltetrazole bromide ( MTT ) ( Rusanov et al.,2017 ) สั้นๆก็คือเซลล์
(ประมาณ10,000เซลล์/หลุม)เพาะเลี้ยงในอาหารRPMI
เติมสารละลายยาปฏิชีวนะ10 %และ1 %ใน96หลุม
วัฒนธรรมที่37องศาเซลเซียสเป็นเวลา24ชั่วโมงกับ5 % co 2 หลังจากฟักตัวเซลล์
ในอาหารที่ไม่สมบูรณ์preparedด้วยความเข้มข้นที่แตกต่างกันของlgo (0.02-10ไมโครลิตร/มิลลิลิตร) 24ชั่วโมงต่อมาMTT 25ไมโครกรัม/มิลลิลิตร(ในที่สุด
ความเข้มข้น)เพิ่มเข้าไปในวัฒนธรรมเซลล์และบ่ม2ชั่วโมง
ลบสารละลายในวัฒนธรรมชั้นเซลล์ด้วยเมทริกซ์
ละลายใน 100 ไมโครลิตร dmso (dimethylsulfonide) ผล
โดยใช้เครื่องอ่านบอร์ดเอลิซ่า (bioTek instruments)
บริษัทเวอร์มอนท์สหรัฐอเมริกา)