Fractionation of intramuscular fat
The IMF was fractionated into NL, PL, and free fatty
acids (FFA) according toRuiz and others (2004)with modifications.
Fifty microliters of a solution containing 15 μg/μL
of tritricosanoin,1 μg/μL of heneicosanoic acid (Nu-Chek,
MN, USA), and 5 μg/μL of 1,2–dipentadecanoyl-sn-glycero-
3-phosphatidylcholine (Larodan, Malm¨o, Sweden) were added as
internal standards to fit lipid extracts corresponding to 20 mg of
crude lipids. The lipid extracts were then dried under a stream
of nitrogen at 37 °C and redissolved in 200 μL of chloroform.
This fraction was applied on a 500 mg aminopropyl SPE glass
cartridge (Macherey-Nagel, D¨uren, Germany) conditioned with
7.5 mL of chloroform. NL, PL, and FFA were fractionated into
glass tubes using vacuum to generate a flow of 1 mL/min. NL
and FFA were eluted with 6 mL of chloroform:methanol (95:5
v/v) and diethylether:acetic acid (98:2 v/v), respectively. PL were
eluted with 3.0 mL of methanol:chloroform (6:1 v/v) followed by
3 mL of 0.05Msodium acetate in methanol:chloroform (6:1 v/v).
The lipid fractions were evaporated to dryness under a stream of
nitrogen at 37 °C before derivatization.
แยกเข้ากล้ามเนื้อไขมันIMF ถูกแบ่งเป็น NL, PL และไขมันฟรีกรด (เอเอฟซี) ตาม toRuiz และคนอื่น ๆ (2004) ด้วยการปรับเปลี่ยนMicroliters 50 ของโซลูชันที่ประกอบด้วย 15 ไมโครกรัม/μLของ tritricosanoin, 1 ไมโครกรัม/μL heneicosanoic กรด (นูเชคMN สหรัฐอเมริกา), และ 5 ไมโครกรัม/μL ของ 1, 2-dipentadecanoyl-sn-glycero -เพิ่มเป็น 3-phosphatidylcholine (Larodan, Malm¨o สวีเดน)มาตรฐานภายในให้สอดคล้องกับ 20 มก.ของสารสกัดไขมันไขมันดิบ สารสกัดไขมันถูกอบแห้งภายใต้กระแสของไนโตรเจนที่ 37 ° C และ redissolved ใน 200 μL ของคลอโรฟอร์มใช้ส่วนนี้ในแก้ว SPE aminopropyl 500 มิลลิกรัมตลับ (Nagel Macherey, D¨uren เยอรมนี) ปรับ7.5 mL ของคลอโรฟอร์ม NL, PL และเอเอฟซีได้แบ่งเป็นหลอดที่ใช้ดูดสร้างการไหล 1 มิลลิลิตร/นาที NLและเอเอฟซีได้ eluted กับ 6 mL ของคลอโรฟอร์ม: เมทานอล (95:5v/v) และ diethylether: กรดอะซิติก (98:2 v/v), ตามลำดับ มี PLeluted กับ 3.0 mL ของเมทานอล: คลอโรฟอร์ม (6:1 v/v) ตามด้วย3 mL ของ 0.05Msodium อะซีเตเมทานอล: คลอโรฟอร์ม (6:1 v/v)ส่วนไขมันที่ระเหยให้แห้งภายใต้กระแสไนโตรเจนที่อุณหภูมิ 37 ° C ก่อน derivatization
การแปล กรุณารอสักครู่..
แยกของไขมันกล้าม
กองทุนการเงินระหว่างประเทศได้รับการ fractionated เข้า NL, PL และไขมันอิสระ
กรด (FFA) ตาม toRuiz และอื่น ๆ (2004) ด้วยการปรับเปลี่ยน.
ห้าสิบไมโครลิตรของการแก้ปัญหาที่มี 15 ไมโครกรัม / ไมโครลิตร
ของ tritricosanoin 1 ไมโครกรัม / ไมโครลิตรของกรด heneicosanoic (Nu-Chek,
MN, USA) และ 5 ไมโครกรัม / ไมโครลิตรของ 1,2-dipentadecanoyl-SN-glycero-
3 phosphatidylcholine (Larodan มัลโมประเทศสวีเดน) ถูกเพิ่มเป็น
มาตรฐานภายในเพื่อให้พอดีกับสารสกัดจากไขมันที่สอดคล้องกับ 20 mg ของ
ไขมันดิบ สารสกัดจากไขมันก็แห้งแล้วภายใต้กระแส
ของไนโตรเจนที่ 37 องศาเซลเซียสและ redissolved ใน 200 ไมโครลิตรคลอโรฟอร์ม.
ส่วนนี้ถูกนำมาใช้ใน 500 มิลลิกรัมแก้ว aminopropyl SPE
ตลับหมึก (Macherey-แจคกี้ Duren, เยอรมนี) ปรับอากาศพร้อม
7.5 มิลลิลิตร คลอโรฟอร์ม NL, PL และ FFA ถูก fractionated เข้าไปใน
หลอดแก้วสูญญากาศที่ใช้ในการสร้างการไหลของ 1 มิลลิลิตร / นาที NL
และ FFA ถูกชะ 6 มลคลอโรฟอร์ม: เมทานอล (95: 5
v / v) และไดเอทิลอีเทอร์: กรดอะซิติก (98: 2 v / v) ตามลำดับ PL ถูก
ชะ 3.0 มลเมทานอล: คลอโรฟอร์ม (6: 1 v / v) ตามด้วย
3 มล 0.05Msodium อะซิเตทในเมทานอล: คลอโรฟอร์ม (6: 1 v / v).
เศษไขมันถูกระเหยแห้งภายใต้กระแสของ
ไนโตรเจนที่ 37 ° C ก่อนอนุพันธ์
การแปล กรุณารอสักครู่..
การฉีดไขมันกองทุนการเงินระหว่างประเทศถูกพบใน NL , PL , และกรดไขมันอิสระกรด ( FFA ) ตาม toruiz และอื่น ๆ ( 2004 ) กับการปรับเปลี่ยน50 ตัวเลขของสารละลายที่มี 15 μกรัม / μ lของ tritricosanoin 1 μกรัม / ลิตรμ heneicosanoic acid ( นู๋ เชค ,มินนิโซตา , USA ) และ 5 μกรัม / ลิตร และμ 2 dipentadecanoyl SN glycero -3-phosphatidylcholine ( larodan ต้องตั้ง , โอ , สวีเดน ) เพิ่มเป็นภายในมาตรฐานเพื่อให้พอดีกับไขมันสารสกัดที่ 20 มิลลิกรัมดิบไขมัน . สารสกัดจากไขมันแล้วแห้งภายใต้กระแสของไนโตรเจนที่อุณหภูมิ 37 องศา C และ redissolved 200 μ L ของคลอโรฟอร์มส่วนนี้ถูกใช้ใน aminopropyl 500 มิลลิกรัม สารแก้วตลับหมึก ( macherey นาเกล , D ตั้งชั่วโมง เยอรมนี ) เว็บไซด์กับ7.5 ml ของคลอโรฟอร์ม NL , PL , และ FFA เป็นลำดับในหลอดแก้วสูญญากาศเพื่อสร้างการไหลของ NL 1 มิลลิลิตร / นาทีมีตัวอย่างภาชนะบรรจุ 6 ml คลอโรฟอร์ม : เมทานอล ( 95:5v / v ) และไดเ ธิลอีเทอร์ : กรดน้ำส้ม ( 98:2 v / V ) ตามลำดับ คุณคือตัวอย่างกับ 3.0 มิลลิลิตรเมธา : คลอโรฟอร์ม ( 6 : 1 v / v ) ตามด้วย3 ml 0.05msodium acetate ในเมทานอล : คลอโรฟอร์ม ( 6 : 1 v / v )ไขมันเศษส่วนถูกระเหยแห้งภายใต้กระแสของไนโตรเจนที่อุณหภูมิ 37 องศา C ก่อนกับ .
การแปล กรุณารอสักครู่..