Ophiobolin A is sesterterpenoid-typ

Ophiobolin A is sesterterpenoid-type phytotoxin and may be an important candidate for development of new crop protection and pharmaceutical products. The restriction enzyme-mediated integration (REMI) method was used to introduce the plasmid pSH75 into the ophiobolin A-producing filamentous fungus Bipolaris eleusines. A total of 323 stable transformants were obtained, all of which were capable of growing on potato-dextrose agar medium containing 200 μg mL(-1) hygromycin B. The transformation frequency was about 4-5 transformants μg(-1) plasmid DNA. An ophibolin A-deficient transformant (B014) was assessed and the presence of the hph gene in this transformant was confirmed by PCR. The cell-free cultural filtrates of this transformant showed significantly less inhibition on mycelial growth of the fungal pathogen Rhizoctoni solani but little effect on barnyard grass as opposed to that of the wild-type B. eleusines. There was no detectable amount of ophiobolin A in B014 samples measured with HPLC. This research suggests REMI as a potential approach for improving the production of ophiobolin A by B. eleusines via genetic engineering to upregulate certain genes responsible for desired biosynthetic pathways.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Ophiobolin A เป็นชนิด sesterterpenoid phytotoxin และอาจจะมีผู้สมัครที่สำคัญสำหรับพัฒนาอารักขาพืชใหม่และผลิตภัณฑ์ยา วิธีเอนไซม์จำกัดสื่อรวม (REMI) ถูกใช้เพื่อแนะนำ plasmid pSH75 เป็น ophiobolin A ผลิตด้ายรา Bipolaris eleusines ได้รับทั้งหมด 323 เสถียร transformants ที่มีความสามารถในการเจริญเติบโตบนกลางวุ้นมันฝรั่งเดกซ์โทรสที่ประกอบด้วย 200 μ mL(-1) hygromycin b ความถี่ในการเปลี่ยนแปลงแก้ไขเกี่ยวกับการ 4-5 transformants μg(-1) plasmid DNA การ transformant ophibolin A ขาด (B014) ได้รับการประเมิน และการปรากฏตัวของยีน hph ใน transformant นี้ได้รับการยืนยัน โดย PCR Filtrates วัฒนธรรมเซลล์ฟรีของ transformant นี้แสดงให้เห็นมากน้อยยับยั้งการเติบโต mycelial solani Rhizoctoni เชื้อโรคเชื้อราแต่ยุ้งข้าวหญ้าตรงข้ามกับที่ของ eleusines B. ของป่าชนิดผลเล็ก ไม่มียอดเงินสามารถตรวจสอบได้ของ ophiobolin ในตัวอย่าง B014 วัด ด้วย HPLC ได้ งานวิจัยแนะนำเรมี่เป็นวิธีการมีศักยภาพในการปรับปรุงการผลิตของ ophiobolin A โดย B. eleusines ทางพันธุวิศวกรรมเพื่อ upregulate บางยีนที่ต้องการเส้นทางชีวสังเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Ophiobolin เป็น sesterterpenoid ชนิด phytotoxin และอาจจะเป็นผู้สมัครที่สำคัญสำหรับการพัฒนาของการป้องกันพืชใหม่และผลิตภัณฑ์เภสัชกรรม บูรณาการข้อ จำกัด เอนไซม์พึ่ง (REMI) วิธีการถูกใช้ในการแนะนำ pSH75 พลาสมิดเข้าไปใน ophiobolin A-ผลิตเส้นใยเชื้อรา Bipolaris eleusines รวมเป็น 323 transformants มั่นคงที่ได้รับทุกคนที่มีความสามารถในการเจริญเติบโตบนมันฝรั่ง dextrose agar ขนาดกลางที่มี 200 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร (-1) hygromycin บีความถี่ในการเปลี่ยนแปลงเป็นประมาณ 4-5 transformants ไมโครกรัม (-1) พลาสมิดดีเอ็นเอ ophibolin A-ขาด transformant (B014) ได้รับการประเมินและการปรากฏตัวของยีน HPH ใน transformant นี้ได้รับการยืนยันโดยวิธี PCR กรองวัฒนธรรมปราศจากเซลล์ transformant นี้ยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญน้อยลงในการเจริญเติบโตของเส้นใยของเชื้อรา Rhizoctoni solani แต่ผลเพียงเล็กน้อยบนพื้นหญ้าลานยุ้งข้าวเมื่อเทียบกับที่ของชนิดป่า eleusines บี ไม่มีการตรวจพบปริมาณของ ophiobolin เอในตัวอย่าง B014 วัดที่มีความเป็น HPLC งานวิจัยนี้แสดงให้เห็น REMI เป็นวิธีการที่มีศักยภาพสำหรับการปรับปรุงการผลิตของ ophiobolin A ตามแบบบี eleusines ผ่านทางพันธุวิศวกรรม upregulate ยีนบางอย่างที่รับผิดชอบในการทางเดินชีวสังเคราะห์ที่ต้องการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ophiobolin เป็น sesterterpenoid ประเภท phytotoxin และอาจเป็นผู้สมัครที่สำคัญสำหรับการพัฒนาของผลิตภัณฑ์ป้องกันพืชใหม่ และเภสัชกรรม จำกัดเอนไซม์โดยรวม ( เรม ) เป็นวิธีที่จะแนะนำ psh75 พลาสมิดเข้าสู่ ophiobolin a-producing เส้นใยเชื้อรา bipolaris eleusines . ทั้งหมด 323 มั่นคง transformants ที่ได้รับ ซึ่งทั้งหมดสามารถเติบโตบนอาหาร potato dextrose agar medium ที่มีμกรัม 200 ml ( - 1 ) ยีนต้านยา hygromycin B การแปลงความถี่ประมาณ 4-5 transformants μ g ( - 1 ) พลาสมิดดีเอ็นเอ การ ophibolin a-deficient / ( b014 ) คือการประเมินและการปรากฏตัวของยีนใน hph / นี้ได้รับการยืนยันโดย PCR วัฒนธรรมการสังเคราะห์สารละลายถ่ายยีนนี้พบน้อยมากในการยับยั้งการเจริญของเชื้อราสาเหตุโรค rhizoctoni เลทแต่ผลเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับไส้ศึกเป็นนอกคอกที่ของของบี eleusines . ไม่มีปริมาณที่ตรวจพบในตัวอย่างของ ophiobolin b014 วัดด้วย HPLC . งานวิจัยนี้เสนอวิธีการเรมิเป็นศักยภาพสำหรับการปรับปรุงการผลิต ophiobolin โดย B . eleusines ทางพันธุวิศวกรรมเพื่อ upregulate ยีนบางอย่างที่ต้องการการรับผิดชอบสัมภาระ .