3. Results3.1. Colonization experim

3. Results
3.1. Colonization experiments. G. diazotrophicus
PAL 5 or UAP 5541/pRGS561 were isolated from surface
disinfected and non-disinfected plant tissues and enumerated
in specific media to estimate the epi- and endophytic colonization.
In situ microscopic localization of G. diazotrophicus
UAP 5541/pRGS561 allowed detection of colonization sites.
Tomato plants colonization was not accompanied by inhibition
of plant growth or other macroscopically visible disease
symptom.
3.1.1. Control of disinfection treatment of plant tissues
(1) No zones of blue staining were observed in disinfected
samples from plants previously inoculated with the gusA-marked
strain, (2) no bacterial growth was observed in LGI plates mounted
with disinfected tissues, (3) bacterial growth was rarely observed
when the wash solution from the last tissue rinse was plated on LGI.
Similar to the root tests, no bacterial colonies were found on aerial
parts neither in post disinfection wash tests nor in incubations of
whole aerial tissues. Based on these results, we can assume that the
disinfection procedure employed in this work was sufficient for the
elimination of the surface-associated bacteria, in agreement with
Dong et al. (2003).
3.1.2. Root colonization
Colony counting of plants inoculated with either G. diazotrophicus
PAL 5 or UAP 5541/pRGS561 showed a similar behavior for both
strains (Fig. 1).
The rhizoplane of tomato plantlets was rapidly colonized by
G. diazotrophicus after seedling inoculation: bacterial concentrations
of 7.0–7.5 log CFU g−1 (fw) were observed since 2 days P.I. and
remained almost constant along the 25 days period of observation
(Fig. 1).
Endophytic population remained at 5.0–6.0 log CFU g−1 (fw) for
the first 7 days (Fig. 1). After that, the population showed fluctuations
varying between 4.0 and 6.0 log CFU g−1 (fw) along the
observation period. No bacteria could be isolated from the control
plants (non-inoculated).
Tomato roots recovered at different times revealed the presence
of G. diazotrophicus after GUS technique application. Seedlings
inoculated with strain UAP 5541/pRGS561 showed intense blue
staining in root-stem junctions and in sites of emergence of lateral
roots after 2 days P.I. (Fig. 2). Microscopic observations showed
blue color on root hairs, sub-stomatal cavities of root–stem junctions,
epidermal regions and on the external cell layer as shown in
root transversal sections (Fig. 2). Root tip cells were rarely stained.
Non-inoculated roots did not develop blue zones after GUS staining,
confirming the lack of endogenous -glucuronidase activity
and providing the specificity of the visualization procedure (data
not shown).
3.1.3. Stems colonization
Surface disinfected stems from inoculated tomato seedlings
showed significant bacterial populations after 2 days P.I., varying
around 3.5–5.0 log CFU g−1 (fw) throughout the experiment (Fig. 1).
Stem endophytic bacterial population, although significant, was
lower than the one found in roots (Fig. 1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์3.1. การทดลองสนาม Diazotrophicus กรัมPAL 5 หรือสตริคแอ 5541/pRGS561 แยกจากพื้นผิวเนื้อเยื่อพืช และไม่ฆ่าเชื้อฆ่าเชื้อ และระบุในสื่อที่เฉพาะเจาะจงเพื่อประเมิน epi - กับสนาม endophyticในการแปลด้วยกล้องจุลทรรศน์ซิของ diazotrophicus กรัมสตริคแอ 5541/pRGS561 ของอเมริกาสนามได้มะเขือเทศพืชสนามไม่พร้อมกับการ โดยยับยั้งเจริญเติบโตของพืชหรือโรคอื่น ๆ เห็น macroscopicallyอาการ3.1.1 การควบคุมรักษาฆ่าเชื้อของเนื้อเยื่อพืช(1) ไม่มีโซนของการย้อมสีน้ำเงินสุภัคฆ่าเชื้อตัวอย่างจากพืช inoculated ก่อนหน้านี้ ด้วยการ gusA เครื่องหมายการติดตั้งต้องใช้, (2) เจริญเติบโตของแบคทีเรียไม่ถูกตรวจสอบในแผ่น LGIมีเนื้อเยื่อฆ่าเชื้อ, (3) เจริญเติบโตของแบคทีเรียไม่ค่อยสังเกตโซลูชันการล้างจากล้างเนื้อเยื่อครั้งสุดท้ายเมื่อถูกชุบบน LGIเช่นเดียวกับการทดสอบราก อาณานิคมแบคทีเรียไม่พบบนชั้นส่วนที่ใช่ ในการทดสอบลงฆ่าเชื้อล้าง หรือ ใน incubations ของเนื้อเยื่อทั้งทางอากาศ ขึ้นอยู่กับผลลัพธ์เหล่านี้ เราสามารถสมมติที่ขั้นตอนการฆ่าเชื้อพนักงานในงานนี้ก็เพียงพอสำหรับการตัดการเชื่อมโยงพื้นผิวแบคทีเรีย ในข้อตกลงกับดง et al. (2003)3.1.2 การรากสนามนับโคโลนีพืช inoculated มีทั้ง diazotrophicus กรัมPAL 5 หรือสตริคแอ 5541/pRGS561 พบลักษณะการทำงานคล้ายกันสำหรับทั้งสองสายพันธุ์ (Fig. 1)Rhizoplane ของ plantlets มะเขือเทศได้อย่างรวดเร็วยึดครองโดยDiazotrophicus กรัมหลังจากแหล่ง inoculation: แบคทีเรียความเข้มข้นล็อก 7.0 – 7.5 CFU g−1 (fw) สุภัคตั้งแต่ 2 วัน P.I. และยังคงคงเกือบตลอดระยะเวลา 25 วันเก็บข้อมูล(Fig. 1)ประชากร endophytic ยังคงอยู่ที่ 5.0 – 6.0 ล็อก CFU g−1 (fw) สำหรับ7 วันแรก (Fig. 1) หลังจากนั้น ประชากรแสดงให้เห็นความผันผวนแตกต่างกันระหว่าง 4.0 และ 6.0 ล็อก CFU g−1 (fw) ตามรอบระยะเวลาที่สังเกต แบคทีเรียไม่สามารถแยกจากตัวควบคุมพืช (ไม่ใช่-inoculated)รากมะเขือเทศที่กู้ต่างเวลาเปิดเผยสถานะของ diazotrophicus กรัมหลังจากโปรแกรมประยุกต์เทคนิค GUS กล้าไม้inoculated ด้วยต้องใช้ 5541 สตริคแอ/พบสีน้ำเงินเข้ม pRGS561ย้อมสี ใน junctions ก้านราก และ ในอเมริกาเกิดขึ้นด้านข้างรากหลังจาก 2 วัน P.I. (Fig. 2) สังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์พบว่าสีฟ้าบนเส้นขนราก ฟันผุ stomatal ย่อยของราก – ก้าน junctionsภูมิภาค epidermal และชั้นภายนอกเซลล์มากราก transversal ส่วน (Fig. 2) ไม่ค่อยมีสีเซลล์ปลายรากInoculated ไม่ใช่รากไม่พัฒนาโซนสีน้ำเงินหลัง GUS ย้อมสียืนยันการขาดกิจกรรม endogenous - glucuronidaseให้ specificity ของขั้นตอนการแสดงภาพประกอบเพลง (ข้อมูลไม่แสดง)เป็น 3.1.3 สนามลำต้นลำพื้นผิวฆ่าเชื้อจากกล้าไม้มะเขือเทศ inoculatedแสดงให้เห็นว่าประชากรแบคทีเรียสำคัญหลังจาก 2 วัน P.I. แตกต่างกันประมาณ 3.5-5.0 ล็อก CFU g−1 (fw) ทดลอง (Fig. 1)ก้าน endophytic แบคทีเรียประชากร แม้ว่ามีนัยสำคัญ ถูกต่ำกว่าที่พบในราก (Fig. 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการ
3.1 การทดลองการล่าอาณานิคม G. diazotrophicus
PAL 5 หรือ UAP 5541 / pRGS561 ถูกแยกออกจากพื้นผิว
ฆ่าเชื้อและไม่ได้ฆ่าเชื้อเนื้อเยื่อพืชและแจกแจง
ในสื่อที่เฉพาะเจาะจงในการประมาณ epi- และการตั้งรกรากเอนโดไฟท์.
ในการแปลด้วยกล้องจุลทรรศน์แหล่งกำเนิดของ G. diazotrophicus
UAP 5541 / pRGS561 ได้รับอนุญาตการตรวจสอบของ สถานที่ตั้งรกราก.
มะเขือเทศล่าอาณานิคมพืชไม่ได้มาพร้อมกับการยับยั้ง
การเจริญเติบโตของพืชหรือโรคอื่น ๆ ที่มองเห็นได้ macroscopically
อาการ.
3.1.1 การควบคุมของการรักษาฆ่าเชื้อโรคของเนื้อเยื่อพืช
(1) โซนไม่มีการย้อมสีฟ้าถูกตั้งข้อสังเกตในการฆ่าเชื้อ
ตัวอย่างจากพืชเชื้อก่อนหน้านี้ที่มีการทำเครื่องหมาย gusA
ความเครียด (2) ไม่มีการเจริญเติบโตของแบคทีเรียพบว่าในแผ่น LGI ติด
กับเนื้อเยื่อฆ่าเชื้อ (3) เจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ไม่ค่อยเป็นที่สังเกต
เมื่อการแก้ปัญหาการซักล้างจากเนื้อเยื่อที่ถูกชุบใน LGI.
คล้ายกับการทดสอบรากไม่มีแบคทีเรียที่พบในอากาศ
ส่วนในการฆ่าเชื้อไม่โพสต์การทดสอบการซักหรือในฟักตัวของเชื้อของ
เนื้อเยื่อทางอากาศทั้งหมด บนพื้นฐานของผลเหล่านี้เราสามารถสรุปได้ว่า
ขั้นตอนการฆ่าเชื้อลูกจ้างในงานนี้ก็เพียงพอสำหรับ
การกำจัดของแบคทีเรียบนพื้นผิวที่เกี่ยวข้องในข้อตกลงกับ
ดงและคณะ (2003).
3.1.2 รากล่าอาณานิคม
อาณานิคมนับของพืชที่มีทั้งเชื้อ G. diazotrophicus
PAL 5 หรือ UAP 5541 / pRGS561 แสดงให้เห็นพฤติกรรมที่คล้ายกันสำหรับทั้งสอง
สายพันธุ์ (รูปที่ 1)..
rhizoplane ของต้นกล้ามะเขือเทศเป็นอาณานิคมอย่างรวดเร็วโดย
G. diazotrophicus หลังจากต้นกล้าฉีดวัคซีน: ความเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรีย
ของ 7.0-7.5 log CFU กรัม-1 (FW) ถูกตั้งข้อสังเกตตั้งแต่ 2 วัน PI และ
คงที่เกือบจะพร้อมในช่วงเวลา 25 วันของการสังเกต
(รูปที่ 1)..
ประชากรเอนโดไฟต์ยังคงอยู่ที่ 5.0-6.0 ล็อก CFU กรัม-1 (FW) สำหรับ
7 วันแรก (รูปที่ 1). หลังจากนั้นประชากรที่แสดงให้เห็นความผันผวน
ที่แตกต่างกันระหว่าง 4.0 และ 6.0 log CFU กรัม-1 (FW) พร้อม
ช่วงเวลาการสังเกต แบคทีเรียที่ไม่สามารถแยกออกจากการควบคุม
พืช (ที่ไม่ใช่เชื้อ).
รากมะเขือเทศกู้คืนในเวลาที่แตกต่างกันเผยให้เห็นการปรากฏตัว
ของจี diazotrophicus หลังจากการประยุกต์เทคนิค GUS ต้นกล้า
เชื้อด้วยความเครียด UAP 5541 / pRGS561 แสดงให้เห็นสีฟ้าเข้ม
ในการย้อมสีแยกรากลำต้นและในเว็บไซต์ของการเกิดขึ้นของด้านข้าง
รากหลังจาก 2 วัน PI (รูปที่ 2). สังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์พบ
สีฟ้าในรากขน, ฟันผุย่อยปากใบของทางแยกรากลำต้น
ภูมิภาคผิวหนังและชั้นเซลล์ภายนอกตามที่แสดงใน
ส่วนที่ตัดขวางราก (รูปที่ 2). รากเซลล์ปลายมีการย้อมไม่ค่อย.
รากไม่เชื้อไม่ได้พัฒนาโซนสีฟ้าหลังจากการย้อมสี GUS,
ยืนยันขาดภายนอก? -glucuronidase กิจกรรม
และการให้ความจำเพาะของขั้นตอนการสร้างภาพ (ข้อมูล
ไม่แสดง).
3.1.3 ลำต้นตั้งรกราก
พื้นผิวฆ่าเชื้อเกิดจากต้นกล้ามะเขือเทศเชื้อ
พบว่าประชากรแบคทีเรียอย่างมีนัยสำคัญหลังจากที่ 2 วัน PI, ที่แตกต่างกัน
ทั่ว 3.5-5.0 log CFU กรัม-1 (FW) ตลอดการทดลอง (รูปที่ 1)..
ต้นกำเนิดประชากรแบคทีเรียเอนโดไฟท์แม้ว่าอย่างมีนัยสำคัญเป็น
ที่ต่ำกว่า มากกว่าหนึ่งที่พบในราก (รูปที่ 1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลลัพธ์
3.1 . กลุ่มการทดลอง กรัม diazotrophicus
เพื่อน 5 หรือ uap เอเซีย / prgs561 แยกจากพื้นผิว
ฆ่าเชื้อและไม่ฆ่าเชื้อเนื้อเยื่อพืช และแจกแจง
เฉพาะในสื่อเพื่อประเมิน EPI - และกลุ่มรา .
ใน situ กล้องจุลทรรศน์จำกัด . diazotrophicus
uap เอเซีย / prgs561 อนุญาตการตรวจหาเว็บไซต์อาณานิคม .
ต้นมะเขือเทศไม่ได้มาพร้อมกับการยับยั้งการเจริญเติบโตของพืช หรืออื่น ๆ ซึ่งมองเห็นด้วยตาเปล่า


3.1.1 อาการโรคที่มองเห็น . . การควบคุมการรักษาเนื้อเยื่อพืช
( 1 ) ไม่มีโซนสีฟ้า staining พบว่าในตัวอย่างก่อนหน้านี้ฆ่าเชื้อ
จากพืชปลูกด้วย gusa เครื่องหมาย
สายพันธุ์ ( 2 ) ไม่พบว่าแบคทีเรียเจริญเติบโตใน lgi แผ่นติดตั้ง
กับฆ่าเชื้อเนื้อเยื่อ( 3 ) การเติบโตของแบคทีเรียก็ไม่ค่อยได้สังเกต
เมื่อล้างโซลูชั่นจากเนื้อเยื่อที่ล้างครั้งสุดท้าย ชุบบน lgi .
คล้ายกับรากทดสอบไม่มีโคโลนีแบคทีเรีย พบชิ้นส่วนเครื่องบิน
ทั้งในโพสต์หรือ incubations ฆ่าเชื้อโรคล้างการทดสอบของ
ขับถ่ายอากาศทั้งหมด ขึ้นอยู่กับผลลัพธ์เหล่านี้เราสามารถสมมติว่าขั้นตอน
ฆ่าเชื้อที่ใช้ในงานวิจัยนี้ก็เพียงพอสำหรับ
ขจัดผิวแบคทีเรีย ในข้อตกลงกับ
ดง et al . ( 2546 ) .
3.1.2 . รากของพืชที่ปลูกอาณานิคมอาณานิคม
นับด้วย . diazotrophicus
เพื่อน 5 หรือ uap เอเซีย / prgs561 แสดงพฤติกรรมที่คล้ายกันทั้ง 2 สายพันธุ์ ( รูปที่ 1 )
.
ไรโซแพลนของต้นมะเขือเทศมีเมืองขึ้น
G diazotrophicus อย่างรวดเร็วหลังจากต้นกล้า : แบคทีเรียเชื้อความเข้มข้น
7 – 75 log CFU G − 1 ( FW ) พบได้ตั้งแต่ 2 วัน PI และ
ยังคงเกือบคงที่ตลอด 25 วัน ระยะเวลาของการสังเกต
( รูปที่ 1 ) .
ประชากรราอยู่ที่ 5.0 และ 6.0 log CFU G − 1 ( FW )
7 วันแรก ( รูปที่ 1 ) หลังจากนั้น ประชากรมีความผันผวน
แตกต่างกันระหว่าง 4.0 และ 6.0 log CFU G − 1 ( FW ) ตาม
ช่วงเวลาการสังเกต ไม่มีแบคทีเรียอาจจะแยกจากการควบคุม
พืช ( ไม่ใส่ )
รากมะเขือเทศหายในเวลาต่าง ๆ พบว่ามี diazotrophicus
G . หลังจากที่กัสเทคนิคโปรแกรม ปลูกต้นกล้า
กับสายพันธุ์ uap เอเซีย / prgs561 พบสีเข้ม
จากลำต้นทางราก และในเว็บไซต์ของการเกิดของรากด้านข้าง
หลังจาก 2 วัน PI ( รูปที่ 2 ) สังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์พบ
สีฟ้าบนรากขนซับปากโพรงของลำต้นและรากเชื่อม , ภูมิภาคและ
epidermal ชั้นเซลล์ภายนอกดัง
รากขวางส่วน ( รูปที่ 2 ) เซลล์ปลายรากฟันก็ไม่ค่อยเปื้อน .
ปลอดเชื้อรากไม่ได้พัฒนาโซนสีฟ้าหลังกัสการย้อมสี
ยืนยันการขาด  ที่มีอวัยวะภายในกิจกรรม
และให้ความจำเพาะของวิธีการ ( ข้อมูล

ไม่แสดง ) 3.1.3 .ต้นอาณานิคม
ฆ่าเชื้อพื้นผิวต้นเชื้อจากมะเขือเทศ seedlings
พบประชากรแบคทีเรียที่สำคัญหลังจาก 2 วัน PI แตกต่างกัน
ประมาณ 3.5 – 5.0 log CFU G − 1 ( FW ) ตลอดการทดลอง ( รูปที่ 1 ) .
ก้านราประชากรแบคทีเรีย แต่สำคัญ คือ
ต่ำกว่าที่พบในราก ( รูปที่ 1 ) .