Total RNA was extracted from frozen

Total RNA was extracted from frozen testis (n = 10) using TRI re- agent (Molecular Research Center, Cincinnati, OH). RNA samples (1 lg) were reverse transcribed using murine leukaemia virus re- verse transcriptase, according to the standard protocol of the supplier (Applied Biosystems, Foster City, CA). Primers were presented in Table 1. All primer sets were validated to ensure efficient ampli- fication of a single product before use in assays. Real-time poly- merase chain reaction (PCR) was performed using SYBR Premix EX Taq kit according to the manufacturer’s instructions (Takara, Shiga, Japan) in the MyiQ real-time PCR detection system (Bio- rad, Hercules, CA). Relative mRNA levels were calculated using the comparative 2 DDCt method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รวม RNA ถูกแยกจาก testis แช่แข็ง (n = 10) ใช้ตรีใหม่แทน (ศูนย์วิจัยโมเลกุล ซินซินนาติ OH) ตัวอย่างของ RNA (ลง) ได้กลับทับศัพท์ใช้ murine leukaemia ไวรัสใหม่ข้อ transcriptase ตามโพรโทคอลมาตรฐานของผู้ผลิต (ใช้ศาสตร์เชิงชีวภาพ เมืองฟอสเตอร์ CA) ไพรเมอร์มีแสดงในตารางที่ 1 ชุดรองพื้นทั้งหมดได้ผ่านการตรวจสอบเพื่อให้ fication ampli ประสิทธิผลของผลิตภัณฑ์เดียวก่อนใช้ใน assays ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีแบบเรียลไทม์-merase (PCR) ถูกดำเนินการโดยใช้พรีมิกซ์ SYBR EX Taq ชุดตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Takara ชิงะ ญี่ปุ่น) ใน MyiQ แบบเรียลไทม์ PCR ตรวจหาระบบ (Bio rad เฮอร์คิวลิส CA) สัมพันธ์ระดับ mRNA ถูกคำนวณโดยใช้วิธีการเปรียบเทียบของ DDCt 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากลูกอัณฑะแช่แข็ง (n = 10) โดยใช้ TRI อีก Agent (โมเลกุลศูนย์วิจัย Cincinnati, OH) ตัวอย่าง RNA (1 LG) ได้รับการถ่ายทอดกลับโดยใช้ไวรัสโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวหมากลอนอีก transcriptase ตามโปรโตคอลมาตรฐานของผู้ผลิต (Applied Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย) ไพรเมอร์ที่มีการนำเสนอในตารางที่ 1 ชุดทั้งหมดไพรเมอร์ที่ได้รับการตรวจสอบเพื่อให้แน่ใจว่า EF Fi ประสิทธิภาพตะแกรง Fi ไอออนบวกของผลิตภัณฑ์เดียวก่อนที่จะใช้ในการตรวจ แบบ Real-time โพลี merase ปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) คือการดำเนินการโดยใช้ชุด SYBR พรีมิกซ์ EX Taq ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Takara ชิ, ญี​​่ปุ่น) ในเวลาจริงระบบการตรวจสอบ MyiQ PCR (Bio- RAD, Hercules, CA) ระดับ mRNA ญาติถูกคำนวณโดยใช้วิธีการเปรียบเทียบ 2 DDCt

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากอัณฑะแช่แข็ง ( N = 10 ) ใช้เป็นสารไตร ( โมเลกุลศูนย์วิจัยซินซินนาติ โอ ) ตัวอย่าง RNA ( 1 ) กลับใช้ LG ) และ ~ ลูคีเมียไวรัส Re - กลอนอาการตามโปรโตคอลมาตรฐานของผู้ผลิต ( Applied Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย ) ไพรเมอร์ถูกนำเสนอในตารางที่ 1 ชุดรองพื้นทั้งหมดถูกตรวจสอบเพื่อให้แน่ใจว่า EF จึง cient ampli - จึงประจุบวกของผลิตภัณฑ์เดียวก่อนใช้ ) . เวลาจริงโพลี - ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) คือการใช้ merase SYBR รวมชุดอดีตได้ดีตามคำแนะนำของผู้ผลิต ( Takara ชิงะ , ญี่ปุ่น , myiq PCR แบบเรียลไทม์ในระบบตรวจจับ ( Bio - Rad , Hercules , CA ) ระดับของญาติได้ใช้ ddct เปรียบเทียบ 2 วิธี