2.4. Growth, preservation, storage

2.4. Growth, preservation, storage and recovery
The ability of each media to support sufficient growth for
preservation and storage was determined. Bacteria, yeast cells and fungal spores were grown on TSA as well as each
vegetable-based agar media and grown under appropriate
conditions. A concentrated cell suspension was made in the
corresponding growth medium and mixed 1:1 with a 12% (w/v)
stock solution of glycine-betaine cryoprotectant (Cleland et al.,
2004). The cell suspensions were dispensed into serum vials
and subjected to batch lyophilization. Randomly selected vials
from each lyophilized batch were placed at 37 °C for 4 days to
simulate long-term storage at 4 °C for 5 years (Sakane and
Kuroshima, 1997). The viable load (CFU/mL) for pre- and postlyophilization
vials and vials held in accelerated storage
conditions was determined by suspending the lyophilized pellet
in phosphate buffered saline (PBS). The cell suspension was
diluted with a series of ten-fold dilutions using PBS and appropriate
dilutions were plated onto animal-based TSA. Following
an incubation period optimal for each isolate, colony
density wasmanually counted on plates and the reported numbers
represent the average viable counts for at least three serum
vials.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การเจริญเติบโต อนุรักษ์ จัดเก็บ และกู้คืนความสามารถของแต่ละสื่อเพื่อสนับสนุนการเติบโตเพียงพอเก็บรักษาและการจัดเก็บที่ถูกกำหนด แบคทีเรีย เซลล์ยีสต์ และเชื้อราเพาะเฟิร์นถูกปลูกใน TSA เป็นแต่ละผักใช้ agar media และเติบโตขึ้นภายใต้ความเหมาะสมเงื่อนไขการ ทำการระงับเซลล์เข้มข้นในการตรงกลางเจริญเติบโต และผสม 1:1 กับ 12% (w/v)หุ้นของ glycine betaine cryoprotectant (Cleland et al.,2004) . บริการเซลล์มีคำเป็นเซรั่ม vialsและชุด lyophilization สุ่มเลือก vialsจากชุดละ lyophilized ถูกวางที่ 37 ° C สำหรับ 4 วันจำลองการจัดเก็บที่ 4 ° C ระยะยาว 5 ปี (Sakane และKuroshima, 1997) โหลดได้ (CFU/mL) ในก่อน และ postlyophilizationvials vials ขึ้นเร่งเก็บเงื่อนไขถูกกำหนด โดยเม็ด lyophilized ระงับในน้ำเกลือฟอสเฟต buffered (PBS) การระงับเซลล์ถูกแตกออก มีชุด dilutions ten-fold ใช้ PBS และเหมาะสมdilutions ถูกชุบไปตามสัตว์ TSA ต่อไปนี้มีระยะฟักตัวดีที่สุดสำหรับแต่ละแยก โคโลwasmanually ความหนาแน่นนับบนแผ่นและหมายเลขรายงานนับได้เฉลี่ยในซีรั่มน้อย 3 แสดงถึงvials

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การเจริญเติบโตของการเก็บรักษาการจัดเก็บข้อมูลและการกู้คืนความสามารถของสื่อแต่ละที่จะรองรับการเติบโตเพียงพอสำหรับการเก็บรักษาและการเก็บรักษาที่ถูกกำหนด แบคทีเรียเซลล์ยีสต์และสปอร์ของเชื้อราที่ถูกปลูกใน TSA เช่นเดียวกับแต่ละสื่อวุ้นผักที่ใช้และการเจริญเติบโตที่เหมาะสมภายใต้เงื่อนไข ระงับเซลล์ที่มีความเข้มข้นได้ทำในสื่อการเจริญเติบโตที่สอดคล้องกันและผสม 1: 1 กับ 12% (w / v) การแก้ปัญหาสต็อกของ glycine-เบทาอีน cryoprotectant (. คลีเอตอัล2004) แขวนลอยเซลล์ถูกจ่ายเข้าไปในขวดเซรั่มและยัดเยียดให้ชุด lyophilization ขวดสุ่มเลือกจากแต่ละชุดแห้งถูกวางไว้ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 วันในการจำลองการจัดเก็บระยะยาวที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 ปี (Sakane และ Kuroshima, 1997) โหลดที่ทำงาน (โคโลนี / มิลลิลิตร) สำหรับก่อนและ postlyophilization ขวดและขวดที่จัดขึ้นในการจัดเก็บเร่งเงื่อนไขถูกกำหนดโดยการระงับเม็ดแห้งในน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์(พีบีเอส) ระงับเซลล์ถูกเจือจางด้วยชุดของการเจือจางสิบเท่าโดยใช้พีบีเอสและเหมาะสมเจือจางถูกชุบบนTSA สัตว์ตาม ต่อไปนี้ระยะฟักตัวที่ดีที่สุดสำหรับแต่ละแยกอาณานิคมหนาแน่นwasmanually นับบนจานและตัวเลขรายงานตัวแทนนับทำงานได้เฉลี่ยไม่น้อยกว่าสามในซีรั่มขวด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การเจริญเติบโต , การรักษา , การจัดเก็บและกู้คืน
ความสามารถของสื่อแต่ละสื่อเพื่อสนับสนุนการเติบโตเพียงพอ
การอนุรักษ์และกระเป๋าถูกนำ แบคทีเรีย , เซลล์ยีสต์ และสปอร์ของเชื้อราเติบโตบน TSA เช่นเดียวกับแต่ละ
ผักตามอาหารวุ้นและเติบโตภายใต้สภาวะที่เหมาะสม

สารสกัดเข้มข้นจากเซลล์แขวนลอยได้ในการผสม 1 : 1 กลาง
สอดคล้องกับ 12 % ( w / v )
โซลูชั่นหุ้นของไกลซีนบีเทนน้ำยา ( คลีฟแลนด์ et al . ,
2004 ) เซลล์แขวนลอยถูกจ่ายเป็นเซรั่มขวด
และภายใต้กลุ่มเอนไซม์ การสุ่มเลือกตัวอย่างจากแต่ละชุดไลโอ
ไว้ที่ 37 องศา C เป็นเวลา 4 วันเพื่อ
จำลองกระเป๋าระยะยาวใน 4 ° C เป็นเวลา 5 ปี ( sakane และ
kuroshima , 1997 ) โหลดได้ ( CFU / ml ) ก่อน และ postlyophilization
หลอดและหลอดที่จัดขึ้นในการเร่งสภาพกระเป๋า
ถูกกำหนดโดยระงับในฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือแห้งเม็ด
( PBS ) เซลล์แขวนลอยอยู่
เจือจางกับชุดของวิธีการพับโดยใช้วิธีการที่เหมาะสมและพีบีเอส 10
ถูกชุบลงบนสัตว์หรือตาม ต่อไปนี้เป็นระยะเวลาการบ่มที่เหมาะสม

แต่ละแยก อาณานิคมความหนาแน่น wasmanually นับจานและรายงานตัวเลข
เป็นตัวแทนได้ มีค่าเฉลี่ยอย่างน้อยสามขวดเซรั่ม
.