4.2. Colchicine Treatment Procedure

4.2. Colchicine Treatment ProceduresColchicine (Sigma-Aldrich®, Saint Louis, MO, USA) was prepared from a stock solu- tion of colchicine, previously dissolved in a 1% (v/v) solution of dimethylsulfoxide (Synth®). Five concentrations were tested in this experiment: 0.00 μM; 250 μM; 500 μM; 750 μM and 1000 μM, combined with four immersion times: 6, 12, 18 and 24 h.Treatments with colchicine were applied to seeds collected and stored from the Blc. hybrid and used as explants, and to protocorms also obtained from the germination of the same seeds, but after 90 days of in vitro cultivation in the culture medium described in Section 4.1. For seed treatment, 5 mg fresh mass of seeds per treatment and 15 protocorms per replication (60 per treatment) were used for this study (Figure 8). The graphical abstract with step-by-step experiment is also presented (Figure 9).For the seeds, the different concentrations of colchicine were applied as pre-treatment, by the immersion of seeds in solutions containing different concentrations of colchicine, using a 250 mL Erlenmeyer flask kept in a horizontal rotary shaker at 60 rpm and in dark conditions at 25 ± 1 ◦C during exposure times. After exposure time, seeds were subjected to asepsis and inoculated in vitro in a germination culture medium, as described in Section 4.1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4.2. ขั้นตอนการบำบัดโคลชิซีนโคลชิซีน (Sigma-Aldrich®, Saint Louis, MO, USA) เตรียมจากสารละลายโคลชิซีนซึ่งก่อนหน้านี้ละลายในสารละลายไดเมทิลซัลฟอกไซด์ (Synth®) 1% (ปริมาตร/ปริมาตร) ทดสอบความเข้มข้นห้าระดับในการทดลองนี้: 0.00 μM; 250 ไมโครโมลาร์; 500 ไมโครโมลาร์; 750 μM และ 1000 μM รวมกับเวลาในการแช่สี่ครั้ง: 6, 12, 18 และ 24 ชั่วโมง การบำบัดด้วยโคลชิซีนถูกนำไปใช้กับเมล็ดที่เก็บและจัดเก็บจาก Blc ลูกผสมและใช้เป็นสารสำรวจ และโปรโตคอร์มยังได้มาจากการงอกของเมล็ดชนิดเดียวกัน แต่หลังจาก 90 วันของการเพาะปลูกในหลอดทดลองในอาหารเลี้ยงเชื้อที่อธิบายไว้ในหัวข้อ 4.1 สำหรับการบำบัดเมล็ดพันธุ์ จะใช้เมล็ดสดมวล 5 มก. ต่อการบำบัด และ 15 โปรโตคอร์มต่อการจำลอง (60 ต่อการบำบัด) ถูกนำมาใช้สำหรับการศึกษานี้ (รูปที่ 8) นอกจากนี้ยังมีการนำเสนอนามธรรมเชิงกราฟิกพร้อมการทดลองทีละขั้นตอนด้วย (รูปที่ 9) สำหรับเมล็ด มีการใช้โคลชิซีนที่มีความเข้มข้นต่างกันในการบำบัดเบื้องต้น โดยการแช่เมล็ดในสารละลายที่มีโคลชิซีนที่มีความเข้มข้นต่างกัน โดยใช้ขวดรูปชมพู่ขนาด 250 มล. เก็บไว้ในเครื่องปั่นแบบหมุนแนวนอนที่ 60 รอบต่อนาที และในสภาวะมืดที่ 25 ± 1 ◦C ในช่วงเวลาเปิดรับแสง หลังจากเวลาเปิดรับแสง เมล็ดจะถูกนำไปปลอดเชื้อและเพาะเชื้อ ในหลอดทดลอง ในอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการงอก ตามที่อธิบายไว้ในหัวข้อ 4.1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4.2 ขั้นตอนการรักษาโคลชิซีน
โคลชิซีน (Sigma-Aldrich®, Saint-Louis, MO, USA) จัดทำขึ้นจากสารละลายโคลชิซีนดิบที่ละลายในสารละลาย 1% (v / v) dimethylsulfoxide (Synth®) การทดลองนี้ทดสอบความเข้มข้นห้าชนิด: 0.00μM; 250μM； 500μM； 750μmและ1000μmรวมเวลาแช่สี่ครั้ง: 6, 12, 18 และ 24 ชั่วโมง
รักษาเมล็ดที่เก็บรวบรวมและเก็บจาก Blc ด้วย Colchicine ไฮบริดและใช้เป็น extraplants เช่นเดียวกับหลอดไฟเดิมที่ได้จากการงอกของเมล็ดเดียวกัน แต่หลังจาก 90 วันของการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองในสื่อที่อธิบายไว้ในข้อ 4.1 สำหรับการรักษาเมล็ดพันธุ์การศึกษานี้ใช้ 5 mg ของเมล็ดสดต่อการรักษาและ 15 หลอดเดิมต่อการทำซ้ำ (60 ต่อการรักษา) (รูปที่ 8) บทสรุปกราฟิกที่มีการทดลองทีละขั้นตอน (รูปที่ 9) นอกจากนี้ยังมี
สำหรับเมล็ด colchicine ความเข้มข้นที่แตกต่างกันจะถูกนำไปใช้เป็น pretreatment โดยการแช่เมล็ดในสารละลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4.2ขั้นตอนการรักษารากเหง้า
colchicine ( sage ma-oldrich,เซนต์หลุยส์,มิสซูรี่,สหรัฐอเมริกา)ถูกเตรียมจากสารละลายprochicineที่ละลายในสารละลาย1 % ( v/v ) dimethylsulfonyl ( synth ) ในการทดลองนี้ได้มีการทดสอบความเข้มข้นห้าแบบ:0.00ไมครอน 250 ไมครอน; 500 ไมครอน; 750 ไมครอนและ 1000 ไมครอน รวมกับเวลาแช่สี่: 6, 12, 18 และ 24 ชั่วโมง
เมล็ดที่เก็บรวบรวมและเก็บไว้จากBlcได้รับการรักษาด้วยcryptin ไฮบริดและใช้เป็นเซลล์ต้นกําเนิดและเซลล์ต้นกําเนิดที่ได้จากการงอกของเมล็ดเดียวกันแต่ได้รับการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองเป็นเวลา90วันในอาหารที่อธิบายไว้ในส่วน4.1 สําหรับการรักษาเมล็ดพันธุ์เมล็ดสด5มิลลิกรัมในแต่ละครั้งทําซ้ํา15ถั่ว( 60ต่อการรักษา)สําหรับการศึกษานี้(รูปที่8 ) นอกจากนี้ยังมีการสรุปแบบกราฟิกของการทดลองทีละขั้นตอน(รูปที่9 )
สําหรับเมล็ดพืชโดยการแช่เมล็ดในสารละลายที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันขวดรูปกรวย250มิลลิลิตรถูกเก็บไว้ในออสซิลเลเตอร์หมุนในแนวนอนที่60รอบต่อนาทีและเวลาในการสัมผัสที่ความมืด25±1องศาเซลเซียสความเข้มข้นที่แตกต่างกันของออสซิลินถูกนํามาใช้เป็นตัวปรับสภาพ หลังจากสัมผัสกับระยะเวลาหนึ่งเมล็ดจะปลอดเชื้อและได้รับการฉีดวัคซีนในหลอดทดลองในอาหารที่งอกตามที่อธิบายไว้ในส่วน4.1