2.4. Measurement of PSI parameters
PSI parameters were determined through a Dual-PAM-100 system
(Heinz Walz, Effeltrich, Germany) connected to a PC with
WinControl software using pulse-amplitude modulation [21]. Saturation
pulses (SP) introduced primarily for PAM fluorescence
measurement were also applied to assess the P700 parameters. The
P700 signals (P) may vary between the minimal level (P700 fullyreduced) and the maximal level (P700 fully oxidized). The maximal
P was determined by applying SP after far-red pre-illumination was
conducted. Under donor-side limited conditions (produced by farred
exposure), SP transiently induces full P700 oxidation. Briefly,
after SP was applied, the minimal P was measured when P700 was
fully reduced. The difference signal between the fully reduced and
oxidized states is denoted by Pm. Actinic illumination was started,
and SP was supplied every 30 s, with the same pulses used for fluorescence
and P700 analyses. Each SP was followed by a 1 s dark
period to determine the minimal P signal level (Po; P700 fully
reduced). P was recorded prior to applying SP and briefly after SP
was supplied (Pm), when the maximum P700 oxidation under the
effective experimental conditions was observed, and finally at the
end of the 1 s dark interval following each SP (Po determination).
The signals P and Pm were compared with Po. In this way, unavoidable
signal drifts (e.g., due to changes in the water status) do not
interrupt the actual measurements of P700 parameters.
Three types of complementary quantum yields of energy conversion
in PSI were calculated according to the methods described
by Erhard et al. [22]: Y(I), Y(ND), and Y(NA). Effective photochemical
quantum yield [Y(I)] = (Pm −
P)/Pm. Y(ND) (donor side limitation)
represents the fraction of the overall P700 that becomes oxidized
in a given state, which is enhanced by a trans-thylakoid proton gradient
(photosynthetic control at the cytb/f complex as well as the
downregulation of PSII) and photodamage to PSII. Y(ND) is calculated
using the formula Y(ND) = (P
−
Po)/Pm.
Y(NA) (acceptor side limitation) represents the fraction of the
overall P700 that cannot be oxidized by SP in a given state because
of a lack of acceptors, and is enhanced by dark adaptation (deactivation
of key enzymes of the Calvin–Benson cycle) and damage at
the site of CO2 fixation. Y(NA) is determined based on the equation
Y(NA) = (Pm
−
Pm)/Pm.
2.4 วัดของพารามิเตอร์ PSI
PSI พารามิเตอร์ถูกกำหนดผ่านแบบ Dual-PAM-100 ระบบ
(ฮีนซ์วอลซ์, Effeltrich, เยอรมนี) เชื่อมต่อกับเครื่องพีซีที่มี
ซอฟแวร์ WinControl ใช้ชีพจรกว้างฟเอ็ม [21] ความอิ่มตัวของ
พัลส์ (SP) นำหลักสำหรับ PAM เรืองแสง
การวัดยังถูกนำไปใช้ในการประเมินค่า P700
สัญญาณ P700 (P) อาจแตกต่างกันระหว่างระดับน้อยที่สุด (P700 fullyreduced) และระดับสูงสุด (P700 ออกซิไดซ์อย่างเต็มที่) สูงสุด
P ได้รับการคำนวณโดยการใช้ SP หลังจากไกลสีแดงก่อนการส่องสว่างถูก
ดำเนินการ ภายใต้ผู้บริจาคด้านเงื่อนไข จำกัด (ผลิตโดย farred
สัมผัส), SP transiently ก่อให้เกิดการออกซิเดชั่ P700 เต็มรูปแบบ สั้น ๆ
หลังจากที่ถูกนำไปใช้ SP, P น้อยที่สุดวัดเมื่อ P700 ได้
ลดลงอย่างเต็มที่ สัญญาณความแตกต่างระหว่างที่ลดลงได้อย่างเต็มที่และ
รัฐออกซิไดซ์ที่แสดงโดย Pm แสง Actinic เริ่มต้น,
และ SP ได้รับการจัดทุก 30 วินาที, กับพัเดียวกับที่ใช้สำหรับการเรืองแสง
และการวิเคราะห์ P700 แต่ละ SP ตามมาด้วย 1 วินาทีมืด
ระยะเวลาในการตรวจสอบระดับสัญญาณ P น้อยที่สุด (Po; P700 อย่างเต็มที่
ที่ลดลง) P ถูกบันทึกไว้ก่อนที่จะใช้ SP และในเวลาสั้น ๆ หลังจาก SP
ได้มา (PM?) เมื่อออกซิเดชัน P700 สูงสุดภายใต้
เงื่อนไขการทดลองที่มีประสิทธิภาพเป็นที่สังเกตและสุดท้ายที่
ส่วนท้ายของ 1 วินาทีช่วงเวลาที่มืดต่อไปนี้แต่ละเครื่องหมาย SP (วัดโพธิ์)
สัญญาณ P และ PM? เปรียบเทียบกับ Po ด้วยวิธีนี้หลีกเลี่ยงไม่ได้
ลอยสัญญาณ (เช่นเนื่องจากการเปลี่ยนแปลงสถานะของน้ำ) ไม่ได้
ขัดขวางการวัดที่เกิดขึ้นจริงของ P700 พารามิเตอร์
สามประเภทของอัตราผลตอบแทนของควอนตัมที่สมบูรณ์ของการแปลงพลังงาน
ใน PSI จะถูกคำนวณตามวิธีการที่อธิบายไว้
โดยศูนย์ et al, . [22]: Y (I), Y (ND) และ Y (NA) เคมีที่มีประสิทธิภาพ
ผลผลิตควอนตัม [Y (I)] = (PM -
P) / PM Y (ND) (ข้อ จำกัด ด้านผู้บริจาค)
แสดงให้เห็นถึงส่วนของ P700 โดยรวมที่จะออกซิไดซ์
ในสภาพที่ได้รับซึ่งจะเพิ่มขึ้นโดยโปรตอนลาดทรานส์ thylakoid
(ควบคุมการสังเคราะห์แสงที่ cytb / f ที่ซับซ้อนเช่นเดียวกับ
downregulation ของ PSII ) และ photodamage เพื่อ PSII Y (ND) จะถูกคำนวณ
โดยใช้สูตร Y (ND) = (P
-
Po) / PM
Y (NA) (ข้อ จำกัด ด้านใบเสร็จ) แสดงให้เห็นถึงส่วนของ
P700 โดยรวมที่ไม่สามารถออกซิไดซ์โดย SP อยู่ในสถานะที่ได้รับเพราะ
ของ ขาดของผู้รับบริการและจะเพิ่มขึ้นโดยการปรับตัวที่มืด (เสื่อม
ของเอนไซม์ที่สำคัญของคาลวินวงจร-เบนสัน) และความเสียหายที่
เว็บไซต์ของการตรึง CO2 Y (NA) จะถูกกำหนดตามสมการ
Y (NA) = (PM
-
? PM) / PM
การแปล กรุณารอสักครู่..