A modification of themodel previous

A modification of the
model previously described by other investigators (8, 10, 17,
27) was used. Bacteria were grown to mid-exponential phase
in TSB-DC at 32°C. When the culture reached an A540 Of
0.23, cells were removed by centrifugation, washed twice
with PBS, then suspended in a 0.1 volume of PBS to obtain 2
x 109 CFU/ml. Viable numbers of bacteria were confirmed
by plating serial dilutions on nutrient agar to obtain the CFU.
Female Swiss-Webster mice weighing ca. 20 g were obtained
from Simonson, Hayword, Calif. Mice were anesthetized
by inhalation of metofane (methoxyfluorane; Pitman-
Moore, Inc., Washington Crossing, N.J.) and then subjected
to three 1-mm corneal incisions with a sterile 27-gauge
needle using a stereoscopic microscope to avoid penetration
of the anterior chamber. Dilutions of bacteria suspended in 5
,ul were applied to the traumatized cornea. Where indicated,
an inoculum containing bacteria and S ,ug of purified alkaline
protease or 0.5 ,ug of purified elastase was used.
The progress of infection was determined by examination
of infected eyes with a 5Ox stereoscopic microscope. All
mice were anesthetized (metofane) before examination. The
extent of damage was estimated by a previously established
comeal damage index (CDI) (27). As previously defined (27),
a CDI of 1.0 corresponds to light or partial opacity, whereas
a CDI of 4.0 indicates necrosis and perforation of the cornea.
To assess colonization and persistence of bacteria in infected
eyes, eyes were periodically swabbed with sterile salinesoaked
swabs, and the swabs were used to inoculate King B
plates (19). Representative mice with culture-negative eyes
were sacrificed by cervical dislocation, and their eyes were
enucleated (8), macerated, and suspended in PBS, and
dilutions were plated on King B plates. This was done to
address the possibility of intra-stromal persistence of bacteria
that would not be evident by culturing of the corneal
surface.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การปรับเปลี่ยนของ
รูปแบบที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยนักวิจัยอื่น ๆ (8, 10, 17,
27) ถูกนำมาใช้ แบคทีเรียที่เจริญเป็นขั้นตอนกลางชี้แจง
ใน TSB-DC ที่ 32 ° C เมื่อถึงวัฒนธรรมของ A540
0.23 เซลล์ถูกถอดออกโดยการหมุนเหวี่ยงการล้างครั้งที่สอง
กับพีบีเอส, ระงับแล้วใน 0.1 ปริมาณของพีบีเอสที่จะได้รับ 2
x 109 CFU / ml หมายเลขทำงานของแบคทีเรียที่ได้รับการยืนยัน
โดยการชุบเจือจางอนุกรมบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่จะได้รับ CFU.
หญิงหนูสวิสเว็บสเตอร์ชั่งน้ำหนักแคลิฟอร์เนีย 20 กรัมได้รับ
. จากไซมอน Hayword, แคลิฟอร์เนียหนูถูกวางยาสลบ
โดยการสูดดม metofane (methoxyfluorane; Pitman-
มัวร์, Inc, Washington Crossing, นิวเจอร์ซีย์) แล้วภายใต้
สาม 1 มมแผลที่กระจกตาด้วยหมัน 27 วัด
เข็ม โดยใช้กล้องจุลทรรศน์สามมิติที่จะหลีกเลี่ยงการเจาะ
ของหน้าห้อง เจือจางของเชื้อแบคทีเรียที่ลอยอยู่ใน 5
, UL ถูกนำไปใช้กับกระจกตาบอบช้ำ ในกรณีที่มีข้อบ่งชี้
ที่มีเชื้อแบคทีเรียและ S, ไมโครกรัมด่างบริสุทธิ์
โปรติเอสหรือ 0.5 ไมโครกรัมของ elastase บริสุทธิ์ถูกนำมาใช้.
ความคืบหน้าของการติดเชื้อที่ได้รับการกำหนดโดยการตรวจสอบ
ของดวงตาที่ติดเชื้อด้วยกล้องจุลทรรศน์ 5Ox สามมิติ ทั้งหมด
หนูถูกวางยาสลบ (metofane) ก่อนที่จะตรวจสอบ
ขอบเขตของความเสียหายอยู่ที่ประมาณโดยที่จัดตั้งขึ้นก่อนหน้านี้
ดัชนีความเสียหาย comeal (CDI) (27) ตามที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ (27),
CDI 1.0 สอดคล้องกับความทึบแสงหรือบางส่วนในขณะ
CDI 4.0 บ่งชี้เนื้อร้ายและการเจาะของกระจกตา.
เพื่อประเมินการล่าอาณานิคมและความเพียรของเชื้อแบคทีเรียที่ติดเชื้อใน
ดวงตาดวงตาถูก swabbed เป็นระยะ ๆ ด้วย salinesoaked หมัน
Swabs และแผ่นที่ใช้ในการฉีดวัคซีนกษัตริย์ B
แผ่น (19) หนูแทนด้วยดวงตาวัฒนธรรมเชิงลบ
ถูกเสียสละโดยการเคลื่อนที่ปากมดลูกและตาของเขาก็
enucleated (8), macerated และแขวนลอยในพีบีเอสและ
เจือจางถูกชุบบนจาน B กษัตริย์ นี้ทำเพื่อ
อยู่เป็นไปได้ของการคงอยู่ภายใน stromal ของแบคทีเรีย
ที่จะไม่เป็นที่เห็นได้ชัดจากการเพาะเลี้ยงของกระจกตา
ผิว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเปลี่ยนแปลงของรุ่นก่อนหน้านี้โดยนักวิจัยอื่น ๆที่อธิบาย
8 , 10 , 17 ,
27 ) คือใช้ แบคทีเรียปลูกกลางชี้แจงในเฟส
tsb-dc ที่ 32 องศา เมื่อวัฒนธรรมถึง a540 ของ
0.23 , เซลล์ถูกเอาออกโดยการเหวี่ยงแยก ล้างหน้าสองครั้ง
กับ PBS แล้วระงับใน 0.1 ปริมาตรของ PBS ที่ได้รับ 2
x 109 CFU / ml ได้ตัวเลขของแบคทีเรียได้รับการยืนยัน
โดยวิธีการชุบแบบอนุกรมบนอาหารวุ้นสารอาหารที่จะได้รับ cfu .
หญิงชาวสวิส เว็บสเตอร์ หนูหนักประมาณ 20 กรัม ได้จาก ไซมอนสัน hayword
, .
หนูอสัญญีโดยการสูด metofane ( methoxyfluorane ; พิตแมน -
มัวร์ , อิงค์ , Washington Crossing , นิวเจอร์ซีย์ ) แล้วถูก
3 1-mm แผลกระจกตาด้วย 27 วัด
เป็นหมันเข็มใช้กล้องจุลทรรศน์แบบสามมิติเพื่อหลีกเลี่ยงการเจาะ
ของห้องด้านหน้า . วิธีการของแบคทีเรียระงับ 5
, UL ประยุกต์การบอบช้ำในกระจกตา ที่ระบุเป็นเชื้อที่มีแบคทีเรียและ s
2
, บริสุทธิ์อัลคาไลน์โปรหรือ 0.5 ไมโครกรัมของ elastase บริสุทธิ์ การใช้ความก้าวหน้าของโรค

โดยกำหนดสอบตาติด 5ox สามมิติกล้องจุลทรรศน์ ทั้งหมด
หนูอสัญญี ( metofane ) ก่อนสอบ
ขอบเขตของความเสียหายอยู่ที่ประมาณโดยก่อตั้ง
ก่อนหน้านี้ comeal ความเสียหายดัชนี ( CDI ) ( 27 ) ตามที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ ( 27 ) : CDI สำหรับสอดคล้องกับแสงหรือความทึบบางส่วน ในขณะที่
เป็น CDI 4.0 บ่งชี้โรคใบไหม้และการรั่วของกระจกตา
เพื่อประเมินการล่าอาณานิคมและการคงอยู่ของตาติดเชื้อแบคทีเรียในสายตาเป็นระยะ ๆ

salinesoaked เช็คกับ swabs หมันและ swabs ใช้ปลูกฝี กษัตริย์ B
แผ่น ( 19 ) ตัวแทนหนูตาวัฒนธรรมเชิงลบ
พลีชีพโดยปากมดลูก เคลื่อน และตา
enucleated ( 8 ) , macerated และแขวนลอยใน PBS และ
เจือจางเป็นชุบบนแผ่นกษัตริย์ B .ทำ

ที่อยู่ความเป็นไปได้คงอยู่ภายใน stromal แบคทีเรีย
ที่จะเห็นได้ชัดจากการเพาะเลี้ยงของพื้นผิวกระจกตา