2.3. Preparation of the biosensorFi

2.3. Preparation of the biosensor
First of all, a DO probe was covered with a standard teflon membrane using an O-ring and then the membrane which is sensitive for oxygen was pretreated with 0.5% SDS (sodiumdodecylsulphate) in phosphate buffer (50 mM, pH 7.0) to reduce the tension on the membrane surface of the DO probe. After this step, 250 μl of catalase enzyme solution and gelatin were mixed and dissolved at 38 °C for a few minutes. Two-hundred microlitre of the solution was spread over the DO probe membrane surface and allowed to dry at 4 °C for 30 min. At the end of the time, the bioactive layer was treated with glutaraldehyde (2.5%, in phosphate buffer; 50 mM, pH 7.0) for 3 min to form chemical covalent bonds (Schiff bases) between gelatin, enzyme and glutaraldehyde molecules for the immobilisation of the enzyme on the surface of the DO probe.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 เตรียมความพร้อมของไบโอเซนเซอร์
แรกของทุกสอบสวน DO ถูกปกคลุมด้วยเยื่อเทฟลอนมาตรฐานโดยใช้โอริงและจากนั้นเมมเบรนที่มีความไวต่อออกซิเจนถูกปรับสภาพกับ 0.5% SDS (sodiumdodecylsulphate) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (50 มิลลิพีเอช 7.0 ) เพื่อลดความตึงเครียดบนพื้นผิวของเยื่อสอบสวน DO หลังจากขั้นตอนนี้ 250 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาการทำงานของเอนไซม์ catalase และเจลาตินที่ถูกผสมและละลายที่ 38 องศาเซลเซียสเป็นเวลาไม่กี่นาที สองร้อยไมโครลิตรของการแก้ปัญหาที่ถูกแผ่กระจายไปทั่วพื้นผิวเมมเบรนสอบสวน DO และได้รับอนุญาตให้แห้งที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที ในตอนท้ายของเวลาที่ชั้นออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่ได้รับการรักษาด้วย glutaraldehyde (2.5% ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์; 50 มิลลิเมตรค่า pH 7.0) เป็นเวลา 3 นาทีในรูปแบบพันธะโควาเลนเคมี (ฐานชิฟฟ์) ระหว่างเจลาตินเอนไซม์และโมเลกุล glutaraldehyde สำหรับตรึง ของเอนไซม์บนพื้นผิวของหัววัด DO

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การเตรียมการของไบโอเซนเซอร์
ครั้งแรกของทั้งหมด ทำให้วัดถูกปกคลุมด้วยเยื่อแผ่นเทฟลอนมาตรฐานใช้โอริงและเมมเบรนซึ่งเป็นเรื่องละเอียดอ่อนสำหรับออกซิเจนคือ 0.5 กรัม SDS ( sodiumdodecylsulphate ( 50 มม. ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 7.0 ) เพื่อช่วยลดความตึงเครียดในเยื่อบุผิวของคุณด้วย หลังจากขั้นตอนนี้μสารละลายเอนไซม์คะตะเลส 250 ลิตรและผสมเจลาตินละลายที่อุณหภูมิ 38 องศา C เป็นเวลาไม่กี่นาที 200 ไมโครลิตรของสารละลายที่กระจายไปทำผิวเยื่อ probe และอนุญาตให้แห้งที่อุณหภูมิ 4 องศา C เป็นเวลา 30 นาที ในตอนท้ายของเวลา ชั้นสารถูกปฏิบัติด้วยกลูตารัลดีไฮด์ ( 2.5% ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ; 50 มม. , pH 70 ) สำหรับ 3 นาทีการสร้างพันธะโควาเคมี ( ฐานชิฟ ) ระหว่างเจลาติน , เอนไซม์และดีสำหรับ immobilisation โมเลกุลของเอนไซม์ในผิวของคุณด้วย