2.3. Laboratory analyses
Animal source food samples were screened for antibiotic residues using the microbial inhibition plate test described by Koenen-Dierick et al. (1995) but with some modifications in terms of the antibiotics used as controls. The test detects antibiotic levels above recommended maximum residue for various families of antibiotics including β-lactams, tetracyclines, chloramphenicol, macrolides, aminoglycosides, sulphonamides, and quinolones. Briefly, the test procedure is described as follows: using Bacillus subtilis BGA strain as the test organism, a 0.5% McFarland’s standard suspension of the organism was prepared. This was used to inoculate the surface of Mueller-Hinton agar plates prepared at pH = 7.0 and containing 0.2 μg/ml of trimethoprim. A sterile 8 mm diameter cork borer was used to create disc shaped meat samples of 2 mm thickness, which were applied to the surface of the agar medium. The cork borer was also used to make wells in the agar medium for introduction of egg samples. The egg samples were homogenized with 10 ml of phosphate buffer (pH 7.0) after which ∼1 ml was introduced into wells made in the Mueller-Hinton agar medium. Positive controls were set up with 1 mg/ml of ciprofloxacin, chloramphenicol and tetracycline, while negative controls were set up with distilled water. The agar plates were incubated at 37 °C for 18–24 h. After incubation a zone of inhibition of 1 cm or more was considered a positive case of the meat or egg sample containing drug residues. Positive controls were expected to have zones of inhibition while the negative control was not expected to have any zone of inhibition.
2.3 การปฏิบัติวิเคราะห์ตัวอย่างอาหารสัตว์ฉบับที่ฉายสำหรับยาปฏิชีวนะตกค้างโดยใช้การทดสอบแผ่นยับยั้งจุลินทรีย์ที่อธิบายไว้โดย Koenen Dierick et al. (1995) แต่ มีการปรับเปลี่ยนบางอย่างในยาปฏิชีวนะที่ใช้เป็นตัวควบคุม การทดสอบตรวจหาสารตกค้างสูงสุดในครอบครัวต่าง ๆ ของยาβ-lactams, tetracyclines, chloramphenicol, macrolides, aminoglycosides, sulphonamides และ quinolones แนะนำยาปฏิชีวนะระดับข้างต้น ขั้นตอนทดสอบจะอธิบายไว้โดยสังเขปดังนี้: ใช้คัดสายพันธุ์ subtilis สาหร่ายเป็นสิ่งมีชีวิตที่ทดสอบ ระบบกันสะเทือนมาตรฐานของ McFarland 0.5% ของสิ่งมีชีวิตที่ถูกเตรียมไว้ นี้ใช้ฉีดผิว Mueller Hinton agar แผ่นเตรียมที่ pH = 7.0 และประกอบด้วย μg 0.2 ml ของไตรเมโทพริม Borer เป็นคอร์กเส้นผ่าศูนย์กลาง 8 มม.กระบอกที่ใช้สร้างรูปตัวอย่างเนื้อของความหนา 2 มม. ซึ่งถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของ agar สื่อ ดิสก์ Borer คอร์กยังใช้ทำบ่อในกลาง agar สำหรับแนะนำตัวอย่างไข่ ตัวอย่างไข่ถูก homogenized เป็นกลุ่มกับ 10 ml ของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) การที่มล ∼1 ถูกนำลงในบ่อใน Mueller Hinton agar สื่อ ควบคุมบวกถูกตั้งค่ากับ 1 mg/ml ciprofloxacin, chloramphenicol และ เตตราไซคลีน ในขณะที่ลบตัวควบคุมสร้างขึ้น ด้วยน้ำกลั่น แผ่น agar ได้ incubated ที่ 37 ° C สำหรับ h 18-24 หลังจากบ่ม โซนของยับยั้ง 1 ซ.ม.หรือมากกว่าถูกพิจารณากรณีบวกตัวอย่างเนื้อสัตว์หรือไข่ที่ประกอบด้วยยาตกค้าง ควบคุมบวกคาดว่าจะมีโซนของยับยั้งขณะควบคุมลบคาดว่าไม่มียับยั้งโซนอื่น ๆ
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 ห้องปฏิบัติการวิเคราะห์แหล่งที่มาของอาหารสัตว์ที่ได้รับการคัดกรองโดยใช้ยาปฏิชีวนะตกค้างแผ่นทดสอบการยับยั้งจุลินทรีย์อธิบายโดย Koenen-Dierick et al, (1995) แต่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่างในแง่ของยาปฏิชีวนะที่ใช้เป็นตัวควบคุม การทดสอบการตรวจพบระดับยาปฏิชีวนะที่แนะนำข้างต้นตกค้างสูงสุดสำหรับครอบครัวต่างๆของยาปฏิชีวนะรวมทั้งβ-lactams, tetracyclines, chloramphenicol, macrolides, aminoglycosides, sulphonamides และ Quinolones สั้น ๆ , ขั้นตอนการทดสอบอธิบายไว้ดังนี้: การใช้สายพันธุ์สาหร่ายเชื้อ Bacillus subtilis เป็นชีวิตการทดสอบ 0.5% ระงับ McFarland มาตรฐานของของสิ่งมีชีวิตถูกจัดทำขึ้น นี้ถูกใช้ในการฉีดวัคซีนพื้นผิวของ Mueller-Hinton จานอาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมไว้ที่ pH = 7.0 และมี 0.2 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร trimethoprim ผ่านการฆ่าเชื้อ 8 มมหนอนเจาะไม้ก๊อกขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางถูกใช้ในการสร้างตัวอย่างเนื้อสัตว์ที่มีรูปร่างแผ่นมีความหนา 2 มิลลิเมตรซึ่งถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของกลางวุ้น หนอนเจาะก๊อกยังถูกใช้ในการทำหลุมในสื่อวุ้นสำหรับการแนะนำตัวอย่างไข่ ตัวอย่างไข่ถูกหดหาย 10 มิลลิลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) หลังจากที่ ~1 มลถูกนำเข้าสู่หลุมที่เกิดขึ้นใน Mueller-Hinton กลางวุ้น ควบคุมบวกถูกตั้งค่ากับ 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ciprofloxacin chloramphenicol, และ tetracycline ในขณะที่การควบคุมเชิงลบถูกตั้งขึ้นด้วยน้ำกลั่น แผ่นวุ้นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง หลังจากการบ่มโซนของการยับยั้งการ 1 ซม. หรือมากกว่าได้รับการพิจารณาเป็นกรณีในเชิงบวกของเนื้อสัตว์ไข่หรือตัวอย่างที่มีสารตกค้างยาเสพติด การควบคุมในเชิงบวกที่คาดว่าจะมีโซนการยับยั้งในขณะที่การควบคุมเชิงลบก็ไม่ได้คาดว่าจะมีโซนของการยับยั้งใด ๆ
การแปล กรุณารอสักครู่..